目的 富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)對(duì)軟組織修復(fù)、創(chuàng)傷愈合及骨缺損修復(fù)均有促進(jìn)作用,通過建立蛋白酶誘導(dǎo)的兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型并以PRP 進(jìn)行干預(yù),探討PRP 對(duì)滑膜炎的抑制及治療作用。 方法 取6 月齡清潔級(jí)新西蘭大白兔20 只,雌雄不限,體重2.5 ~ 3.0 kg;于兔耳中央動(dòng)脈取血采用Landesberg 等的方法制備PRP,同時(shí)對(duì)外周血及PRP 進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)及PDGF、TGF 和VEGF 濃度檢測(cè)。于20 只兔雙側(cè)膝關(guān)節(jié)內(nèi)分別注射0.3 mL 4% 木瓜蛋白酶建立膝骨性關(guān)節(jié)炎模型后,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組(n=10)。實(shí)驗(yàn)組:雙側(cè)膝關(guān)節(jié)每周注射0.3 mL PRP,共10周;對(duì)照組:注射無(wú)菌生理鹽水。于第1 次注射后第2、4、6、8、10 周取血檢測(cè)紅細(xì)胞沉降率及IL-1β 濃度,取膝關(guān)節(jié)滑膜標(biāo)本行大體及HE 染色觀察,并根據(jù)Mankin 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)滑膜評(píng)分。 結(jié)果 血小板計(jì)數(shù)示PRP 中血小板濃度約為外周血的6.8 倍。PRP 中PDGF、TGF-β 和VEGF 的濃度分別約為外周血中的5、8、7 倍,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成。實(shí)驗(yàn)組第2、6、8、10 周紅細(xì)胞沉降率與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05),第4 周組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。實(shí)驗(yàn)組第4、6、8、10 周IL-1β 濃度與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05),第2 周組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。對(duì)照組關(guān)節(jié)滑膜廣泛水腫、增厚,表面纖維素性滲出,標(biāo)本滑膜表面偶見血管翳樣組織出現(xiàn);實(shí)驗(yàn)組自第2 周開始,可見滑膜滲出減少,隨時(shí)間延長(zhǎng)表面充血現(xiàn)象減輕,水腫程度下降,第10周時(shí)可見標(biāo)本滑膜略增厚,未見明顯水腫,表面少量淡黃色關(guān)節(jié)液覆蓋,無(wú)粘連現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)組第4、6、8、10 周Mankin 評(píng)分與對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05),第2 周組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論 PRP 通過修復(fù)受損組織、抑制炎性因子釋放等途徑,對(duì)蛋白酶誘導(dǎo)的兔滑膜炎發(fā)揮緩解和治療作用。
目的 介紹富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)及其在慢性組織損傷治療中的作用。 方法 檢索近年來國(guó)內(nèi)外關(guān)于PRP 在慢性組織損傷治療應(yīng)用方面的文獻(xiàn),并進(jìn)行總結(jié)。 結(jié)果 PRP 中的血小板和各類生長(zhǎng)因子以及它們之間的相互作用,通過各種作用途徑,能促進(jìn)多種慢性組織損傷的修復(fù)。但目前尚缺乏標(biāo)準(zhǔn)化的臨床試驗(yàn)以推廣其應(yīng)用。 結(jié)論 PRP 在慢性組織損傷的治療中有望得到更廣泛的應(yīng)用。
目的 觀察富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)在體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)的增殖及成骨作用,探討PRP促進(jìn)骨修復(fù)的細(xì)胞和分子機(jī)制。方法 體外培養(yǎng)人MSCs,分為實(shí)驗(yàn)組(n=9)與對(duì)照組(n=9),實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行PRP干預(yù)(10 μl/ml培養(yǎng)液)。于不同時(shí)間點(diǎn)收集兩組細(xì)胞,以流式細(xì)胞儀檢測(cè)S期比例,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)測(cè)定和四環(huán)素?zé)晒夥z測(cè)細(xì)胞成骨活性,逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)成骨啟動(dòng)基因cbfa1的表達(dá)。結(jié)果 PRP作用于MSCs,可刺激細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測(cè)PRP加入后24 h S期比例由對(duì)照組7.2±0.5至14.5±0.4具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),MTT法顯示PRP作用后細(xì)胞增殖加速,第4天達(dá)到平臺(tái)期。而ALP活性在作用后3、6和9 d達(dá)到7.79±1.98、9.51±2.31和14.03±3.02,與對(duì)照組2.06±0.77、2.84±0.82和2.58±0.84組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。礦化結(jié)節(jié)形成增多,逆轉(zhuǎn)錄PCR顯示cbfa1的表達(dá)在PRP加入2、4和8 h逐漸加強(qiáng)。結(jié)論 PRP對(duì)骨修復(fù)的促進(jìn)作用與其促進(jìn)MSCs增殖、加強(qiáng)成骨啟動(dòng)基因的表達(dá)、增強(qiáng)成骨活性的作用有關(guān)。
目的優(yōu)化富白細(xì)胞富血小板血漿(leukocytes-rich platelet-rich plasma,L-PRP)的離心方案,提高容錯(cuò)率及其制備方法的可推廣性。方法取 76 例志愿者外周血樣(45.0 mL/例),并與 5 mL 輸血用枸櫞酸鈉注射液混勻,均采用兩次離心法制備 L-PRP。根據(jù)兩次離心法參數(shù)不同將所有血樣分為 3 組:實(shí)驗(yàn)組 A(12 例,400×g、10 min,1 100×g、10 min)、實(shí)驗(yàn)組 B(27 例,800×g、10 min,1 100×g、10 min)及對(duì)照組(37 例,1 360×g、10 min,1 360×g、10 min)。計(jì)算并比較 3 組離心方案的 L-PRP 血小板富集系數(shù)及回收率和白細(xì)胞富集系數(shù)。結(jié)果剔除異常血樣(血小板回收率高于 100% 或出現(xiàn)白色血栓)后,剩余 55 例納入統(tǒng)計(jì)分析,其中實(shí)驗(yàn)組 A 10 例,實(shí)驗(yàn)組 B 21 例,對(duì)照組 24 例。實(shí)驗(yàn)組 B 血小板富集系數(shù)和血小板回收率顯著高于實(shí)驗(yàn)組 A 和對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組 A 和對(duì)照組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)組 A、B 和對(duì)照組的白細(xì)胞富集系數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論P(yáng)RP 的制備質(zhì)量受多種因素影響,包括離心力、離心時(shí)間、溫度和操作過程等。兩次離心法(800×g、10 min,1 100×g、10 min)是一種較為理想且可行的離心方案,可獲得較為滿意的血小板回收率和富集系數(shù),且白膜層較厚,可降低對(duì)操作者的精細(xì)化操作要求,提高容錯(cuò)率及可推廣性。
目的 通過分析富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)中血小板、白細(xì)胞和生長(zhǎng)因子的濃度,計(jì)算回收率和富集系數(shù),并做相關(guān)性分析,探討PRP 制備套裝的實(shí)用性和穩(wěn)定性。 方法 取30 例符合納入標(biāo)準(zhǔn)的自愿者自愿捐贈(zèng)的外周血各40 mL,應(yīng)用山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司的PRP 制備套裝制備PRP 各4 mL。全自動(dòng)血液分析儀計(jì)數(shù)全血和PRP 中血小板和白細(xì)胞濃度,并計(jì)算血小板或白細(xì)胞回收率及富集系數(shù);并分別測(cè)定男、女自愿者血小板及白細(xì)胞濃度。ELISA 法定量分析激活后全血及PRP 中PDGF、TGF-β、VEGF 的濃度。 結(jié)果 全血和PRP 中血小板濃度分別為(131.40 ± 29.44)× 109/L 和(819.47 ± 136.32)× 109/L,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=—27.020,P=0.000);PRP 中血小板回收率為60.85% ± 8.97%,富集系數(shù)為6.40 ± 1.06。全血和PRP 中白細(xì)胞濃度分別為(5.57 ± 1.91)× 1012/L和(32.20 ± 10.42)× 1012/L,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=—13.780,P=0.000);PRP 中白細(xì)胞回收率為58.30% ± 19.24%,富集系數(shù)為6.10 ± 1.93。PRP 中血小板濃度和白細(xì)胞濃度分別與全血中血小板濃度(r=0.652,P=0.000)和白細(xì)胞濃度(r=0.460,P=0.011)成正相關(guān)。男性組和女性組PRP 中血小板濃度和白細(xì)胞濃度比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。PRP 中PDGF、TGF-β、VEGF 濃度分別為(698.15 ± 64.48)、(681.36 ± 65.90)、(1 071.55 ± 106.04)ng/mL,是全血的(5.67 ± 1.18)、(6.99 ± 0.61)、(5.74 ± 0.83)倍。PRP 中PDGF 濃度(r=0.832,P=0.020)、TGF-β 濃度(r=0.835,P=0.019)、VEGF 濃度(r=0.824,P=0.023)均與PRP 中血小板濃度成正相關(guān)。 結(jié)論 PRP 制備套裝可以穩(wěn)定地制備出富含高濃度血小板、白細(xì)胞和生長(zhǎng)因子的PRP。
目的 通過臨床隨機(jī)對(duì)照研究,探討PRP 促進(jìn)骨折修復(fù)的作用效果。 方法 2007 年1 月- 3 月,將采用改良二次離心法制作的PRP 用于治療新鮮骨折29 例(PRP 組),并與采用常規(guī)手術(shù)切開復(fù)位內(nèi)固定治療的30 例新鮮骨折患者(對(duì)照組)進(jìn)行療效比較。PRP 組男19 例,女10 例;年齡18 ~ 57 歲,平均43.6 歲。骨折部位:股骨8 例,脛腓骨12 例,肱骨2 例,尺橈骨3 例,手足部2 例,鎖骨2 例。對(duì)照組男19 例,女11 例;年齡22 ~ 57 歲,平均35 歲。骨折部位:股骨7 例,脛腓骨9 例,肱骨5 例,尺橈骨7 例,手足部1 例,鎖骨1 例。所有患者均為外傷后24 h 內(nèi)入院,入院至手術(shù)時(shí)間24 ~ 48 h,平均36 h。兩組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。術(shù)后評(píng)價(jià)兩組傷口炎性反應(yīng)程度、傷口愈合等級(jí)及住院時(shí)間,并行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 術(shù)后5 d,PRP 組傷口炎性反應(yīng)程度為無(wú)22 例,輕6 例,中1 例;對(duì)照組為無(wú)17 例,輕8 例,中3 例,重2 例;兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。術(shù)后PRP 組傷口均達(dá)甲級(jí)愈合,不良反應(yīng)率為0。對(duì)照組甲級(jí)愈合29 例;乙級(jí)愈合1 例,傷口出現(xiàn)紅腫并有少許滲液,經(jīng)3 d 換藥后正常愈合;不良反應(yīng)率為3.33%,與PRP 組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。PRP 組住院時(shí)間為(8.21 ± 1.52)d,對(duì)照組為(11.67 ± 1.48)d,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。兩組患者均獲隨訪,隨訪時(shí)間6 ~ 12 個(gè)月,平均10 個(gè)月。術(shù)后X 線片隨訪示,PRP 組患者于術(shù)后6 ~ 8 個(gè)月達(dá)骨性愈合,對(duì)照組于術(shù)后8 ~ 10 個(gè)月達(dá)骨性愈合,兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論 臨床使用PRP 后未增加術(shù)后并發(fā)癥,可加快傷口愈合,縮短住院時(shí)間;但其在新鮮骨折中是否促進(jìn)骨折愈合尚需進(jìn)一步評(píng)估。
目的 富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)能促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖和修復(fù)軟骨缺損,通過比較膝關(guān)節(jié)退行性變患者關(guān)節(jié)內(nèi)注射PRP 及透明質(zhì)酸鈉的療效,分析PRP 治療關(guān)節(jié)軟骨退行性變的安全性和可行性。 方法 于2010 年1 月- 6 月收治的膝關(guān)節(jié)軟骨退行性變患者中,選擇符合標(biāo)準(zhǔn)的30 例30 膝患者納入研究。根據(jù)注射藥物不同,將患者隨機(jī)分為PRP 組(試驗(yàn)組)和透明質(zhì)酸鈉組(對(duì)照組),每組各15 例。兩組患者性別、年齡、體重指數(shù)、Kellgren-Lawrence 分級(jí)等一般資料比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05),具有可比性。試驗(yàn)組患者抽取自體靜脈血制備PRP 后,于關(guān)節(jié)腔內(nèi)均勻注射3.5 mL PRP;對(duì)照組注射2 mL 透明質(zhì)酸鈉。每3 周注射1 次,3 次為一療程。記錄兩組患者注射后不良反應(yīng)發(fā)生情況,并采用國(guó)際膝關(guān)節(jié)文獻(xiàn)委員會(huì)(IKDC)評(píng)分、美國(guó)西部Ontario 與McMaster 大學(xué)骨關(guān)節(jié)炎指數(shù)(WOMAC)評(píng)分及Lequesne 指數(shù)評(píng)定關(guān)節(jié)功能。 結(jié)果 兩組患者均獲隨訪6 個(gè)月。兩組治療后IKDC 評(píng)分、WOMAC 評(píng)分及Lequesne 指數(shù)與治療前比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);試驗(yàn)組治療后3、4、6 個(gè)月間比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P gt; 0.05);對(duì)照組治療后6 個(gè)月各評(píng)價(jià)指標(biāo)較3、4 個(gè)月差,但差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。治療后3 個(gè)月及4 個(gè)月, 兩組IKDC 評(píng)分、WOMAC 評(píng)分及Lequesne 指數(shù)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05);6 個(gè)月時(shí),試驗(yàn)組各指標(biāo)均優(yōu)于對(duì)照組(P lt; 0.05)。試驗(yàn)組患者12 例31 次出現(xiàn)不良反應(yīng),對(duì)照組12 例30 次;兩組不良反應(yīng)起始時(shí)間、終止時(shí)間及持續(xù)時(shí)間比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論 關(guān)節(jié)內(nèi)注射PRP 治療關(guān)節(jié)軟骨退行性變安全,可緩解疼痛、腫脹等癥狀,提高患者生活質(zhì)量,但需要大樣本長(zhǎng)期隨訪觀察進(jìn)一步驗(yàn)證其安全性和遠(yuǎn)期療效。