目的 探討納米炭吸附5-FU淋巴靶向化療對胃癌組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及正常胃組織中bcl-2、bax及caspase-3表達的影響。方法 將2005年10月至2006年8月在我科住院的28例胃癌患者分為淋巴靶向化療（ＬＮＴＣ）組（ n =14）和對照組（ n =14）。ＬＮＴＣ組先以納米炭吸附5-FU行淋巴靶向化療后再行手術(shù)，對照組直接手術(shù)。術(shù)畢取胃癌組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及正常胃組織，采用免疫組化法檢測其中bcl-2、bax及caspase-3表達情況。結(jié)果 ＬＮＴＣ組中胃癌組織及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)內(nèi)bcl-2表達陽性率低于對照組（28.6% 比78.6% ，25.0% 比70.0% ），bax表達陽性率高于對照組（85.7% 比28.6% ，80.0% 比30.0% ），caspase-3表達陽性率高于對照組（57.1% 比14.3% ， 55.0%比15.0% ），2組間差異有統(tǒng)計學意義（ P ＜ 0.05）； 正常胃組織中三者表達陽性率2組間差異無統(tǒng)計學意義（ P ＞ 0.05)。結(jié)論 納米炭吸附5-FU淋巴靶向化療可使胃癌組織及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)內(nèi)bcl-2表達下降，bax和 caspase-3 表達增加，影響這些凋亡調(diào)節(jié)分子表達可能是其誘導腫瘤細胞凋亡的機理之一。
目的 觀察人工關(guān)節(jié)磨損產(chǎn)物 Co2+、Cr3+ 刺激下人單核細胞生物反應過程中TNF-α 的表達，以及人單核細胞凋亡與Caspase-3 的變化，探討Co2+、Cr3+ 引發(fā)假體周圍骨溶解的作用機制。 方法 將CoCl2 粉末與CrCl3 粉末溶于無菌注射用水，分別配制成濃度為10 mg/L 和500 mg/L 的CoCl2 溶液和CrCl3 溶液。從健康志愿者外周血分離培養(yǎng)單核細胞，調(diào)整濃度為4 × 106 個/ 培養(yǎng)皿，根據(jù)培養(yǎng)液不同，分為3 組。A 組生理鹽水作為對照，B 組CoCl2 溶液，C 組CrCl3 溶液。于培養(yǎng)12、24 及48 h 后吸取細胞上清液，ELISA 法檢測TNF-α 含量，TUNEL 檢測細胞凋亡情況，比色法測定Caspase-3 活性。 結(jié)果 各時間點B、C 組TNF-α 含量及Caspase-3 活性均高于A 組（P lt; 0. 05），分別于24 h 及48 h達峰值。各時間點3 組均存在TUNEL 染色陽性細胞，細胞核固縮深染，細胞體積皺縮，胞膜完整。各時間點B、C 組細胞凋亡率與A 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。Caspase-3 活性與細胞凋亡率成正相關(guān)（r=0.765）。 結(jié)論 Co2+、Cr3+均能刺激人單核細胞釋放TNF-α 并誘導其凋亡；細胞凋亡參與了假體周圍骨溶解的病理過程，且可能與Casepase-3的激活有關(guān)。
目的 觀察無菌性松動全髖關(guān)節(jié)假體周圍界膜中凋亡調(diào)控蛋白Caspase-3表達和細胞凋亡分布的變化,探討其與假體周圍骨溶解之間的關(guān)系。方法 2001年4月~2006年8月臨床上選取16例高分子聚乙烯金屬配伍全髖關(guān)節(jié)翻修術(shù)的患者，其中男10例，女6例；初裝年齡45~67歲，翻修年齡55~78歲，使用時間7~13年。根據(jù)術(shù)前X線片和術(shù)中所見，分為松動/非骨溶解組和松動/骨溶解組，每組各8例，取出假體周圍各區(qū)的假體骨間界膜組織。另取6例初裝人工全髖關(guān)節(jié)的骨性關(guān)節(jié)炎患者作為對照組，其中男2例，女4例；年齡54~68歲，病程9~15年；采用免疫組織化學法檢測界膜組織中Caspase-3的表達,末端標記法原位檢測細胞凋亡，分析并比較Caspase-3和細胞凋亡的陽性表達和分布,與磨損顆粒的局部聚積和骨溶解程度的關(guān)系。結(jié)果 高分子聚乙烯磨損顆粒局部聚積區(qū)的Caspase-3陽性細胞率和細胞凋亡指數(shù)明顯高于金屬磨損顆粒；重度磨損細胞凋亡指數(shù)高于輕度磨損，差異有統(tǒng)計學意義(Plt;0.05);松動/骨溶解組Caspase-3陽性細胞率和細胞凋亡指數(shù)明顯高于松動/非骨溶解組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義(Plt;0.01)。結(jié)論 假體周圍界膜組織Caspase-3的表達和細胞凋亡具有一定規(guī)律性,并與磨損微粒的局部聚積和骨溶解程度密切相關(guān)，可能是磨損顆粒造成界面骨重建受阻而溶骨大量發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一；細胞凋亡參與了假體無菌性松動的病理過程，且與Caspase-3信號激活有關(guān)。
目的觀察靶向性重組腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3對原發(fā)性肝癌HepG2細胞及裸鼠皮下種植瘤的治療作用。方法采用先前構(gòu)建的靶向性重組腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3感染肝癌HepG 2細胞、乳腺癌MDA-MB-231細胞以及正常肝L-02細胞，觀察細胞形態(tài)學改變，并通過流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡指數(shù); 采用裸鼠皮下種植瘤模型、重組腺病毒瘤內(nèi)給藥治療，觀察腫瘤生長情況及病理學改變。 結(jié)果流式細胞學可見HepG 2細胞凋亡和明顯的凋亡峰，MDA-MB-231和L-02細胞凋亡指數(shù)分別為0和7.3%，明顯低于HepG2細胞（48.2%），Plt;0.01。 種植腫瘤細胞2周后HepG 2細胞組、MDA-MB-231細胞組和對照組腫瘤體積大小分別為(0.26±0.31) cm 3、(0.25±0.15) cm 3和(0.26±0.28) cm 3，各組間差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）; 種植腫瘤細胞4周后HepG 2細胞組、MDA-MB-231細胞組和對照組腫瘤體積大小分別為(0.53±0.12) cm 3、(0.49±0.22) cm 3和(0.54±0.13) cm 3，各組間差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）; HepG 2細胞組腫瘤經(jīng)重組腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3治療后8周時腫瘤體積為(0.65±0.13) cm 3，明顯小于MDA-MB-231細胞組〔(1.27±0.32) cm 3〕和對照組〔(1.43±1.09) cm 3〕，Plt;0.01，而后兩組之間比較差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。 治療后HepG 2細胞組腫瘤細胞出現(xiàn)壞死區(qū)，伴淋巴浸潤細胞和凋亡細胞; 對照組腫瘤細胞區(qū)域內(nèi)未見明顯壞死區(qū); 而MDA-MB-231細胞組腫瘤細胞呈實性排列，呈小腺腔樣結(jié)構(gòu)，異型性明顯，瘤巨細胞及多核瘤細胞可見，治療前、后未見明顯變化。 結(jié)論 靶向性重組腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3具有有效靶向性凋亡誘導作用，體內(nèi)、外治療原發(fā)性肝癌有效，可能為原發(fā)性肝癌的靶向性基因治療提供新途徑。
目的 研究聯(lián)合應用靶向survivin的反義寡核苷酸(ASODN)和三苯氧胺(TAM)對MCF-7乳腺癌細胞的作用。方法 將一條20 mer的ASODN序列與TAM作用于MCF-7乳腺癌細胞，分別為TAM組（單獨應用TAM）、ASODN組（單獨應用ASODN）及TAM+ASOND聯(lián)合組（聯(lián)合應用TAM+ASODN）。運用四甲基偶氮唑鹽比色試驗（MTT）、流式細胞儀（FCM）、原位雜交以及分光光度法分別檢測各組MCF-7細胞的抑制率、細胞周期和凋亡率、survivin mRNA表達和caspase-3活性。結(jié)果 TAM+ASOND聯(lián)合組對MCF-7細胞的抑制率〔(62.26±3.92)%〕明顯高于TAM組〔(42.30±6.63)%〕及ASODN組〔(54.77±9.99)%〕，Plt;0.05。TAM+ASOND聯(lián)合組的細胞凋亡率為（28.08±4.32）%，明顯高于TAM組〔(18.94±4.01)%〕及ASODN組〔(21.12±3.95)%〕，Plt;0.01。TAM+ASODN聯(lián)合組對MCF-7細胞的G0/G1期阻滯作用明顯強于TAM組和ASODN組（Plt;0.05，Plt;0.01）; TAM+ASODN聯(lián)合組survivin mRNA表達陽性率為（13.38±3.45）%，明顯低于TAM組〔(39.67±7.42)%〕或ASODN組〔(27.50±5.80)%〕，Plt;0.01。 TAM+ASOND聯(lián)合組MCF-7細胞的caspase-3活性(0.93±0.13)高于TAM組(0.50±0.09)或ASODN組(0.64±0.08)，Plt;0.01。結(jié)論 靶向survivin的反義寡核苷酸能夠促進MCF-7乳腺癌細胞凋亡，增加其對TAM治療的敏感性。
【摘要】目的探討三七總皂苷（PNS）預處理對大鼠供肝缺血-再灌注損傷的保護作用及其對供肝細胞凋亡和Bcl-2及Caspase-3 mRNA表達的影響。方法雄性SD大鼠分別用作供、受體，采用Kamada’s袖套法建立原位肝移植模型，根據(jù)供肝切取前1 h是否靜脈注射PNS（50 mg/kg）將大鼠隨機分為PNS預處理組（PNS組）和生理鹽水對照組（NS組）； 另設假手術(shù)作對照組（SO組）。分別于供肝再灌注后 2 h、6 h及24 h處死各組動物，檢測血清ALT及AST，HE切片作病理組織學檢查，TUNEL法檢測肝細胞凋亡，RT-PCR法檢測Bcl-2及Caspase-3 mRNA的表達。結(jié)果供肝再灌注后2 h、6 h及24 h各時點，PNS組大鼠血清ALT和AST水平及肝細胞凋亡指數(shù)（AI）均明顯低于NS組（P＜0.05，P＜0.01）； 6 h及24 h，PNS組大鼠肝組織Bcl-2 mRNA的表達水平明顯高于NS組（P＜0.05）； 2 h及6 h，PNS組大鼠肝組織Caspase-3 mRNA的表達水平明顯低于NS組（P＜0.05）。結(jié)論PNS預處理大鼠供肝，可以有效地減輕移植肝的缺血/再灌注損傷和細胞凋亡，影響細胞凋亡調(diào)控基因Bcl-2和 Caspase-3的表達。這可能為PNS抗細胞凋亡的機理之一。
目的探討膿毒癥對大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元的凋亡蛋白酶caspase-3表達的影響。 方法80只30日齡健康雄性Wistar大鼠，隨機分為盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)（CLP）組（n=50）和對照組（n=30）。CLP組采用CLP建立膿毒癥模型，對照組行假手術(shù)不造成膿毒癥模型。于手術(shù)后6、12、24 h，CLP組和對照組分別取10只大鼠，5只做神經(jīng)行為學評分，另外5只處死取腦，采用蛋白免疫印跡法觀察caspase-3的表達，術(shù)后24 h，兩組各取3只大鼠，采用免疫熒光檢測caspase-3的表達。 結(jié)果對照組大鼠大腦海馬區(qū)僅微量表達caspase-3，神經(jīng)行為學評分較高。CLP組大鼠caspase-3的表達量于CLP后6 h就開始升高，24 h達高峰，均明顯高于對照組（P＜0.05），大鼠的神經(jīng)行為學評分在CLP后6 h開始降低，并隨著時間逐漸下降，均明顯低于對照組（P＜0.05）。 結(jié)論膿毒癥腦損傷時大鼠的神經(jīng)行為學評分降低，海馬區(qū)神經(jīng)元caspase-3表達上調(diào)，并隨時間變化而波動。
目的研究雷公藤紅素對人肝癌細胞系SMMC-7721增殖及凋亡的影響，并初步探討其可能的作用機理。 方法體外培養(yǎng)SMMC-7721細胞，細胞接受雷公藤紅素處理后，采用CCK-8實驗及Annexin V-FITC/PI雙染實驗觀察其對SMMC-7721細胞增殖及凋亡的影響；采用Caspase-3活性檢測試劑盒測定Caspase-3活性及Western blot法檢測SMMC-7721細胞中NF-κB蛋白的表達；同時用人肝癌細胞系SMMC-7721進行裸鼠成瘤實驗，觀察雷公藤紅素對裸鼠成瘤的影響。 結(jié)果雷公藤紅素可以抑制SMMC-7721細胞增殖并呈濃度和時間依賴性；Annexin V-FITC/PI雙染實驗顯示隨著藥物濃度的增加，出現(xiàn)凋亡的細胞明顯增加；Caspase-3活性測定實驗顯示細胞接受雷公藤紅素處理后，Caspase-3活性明顯增強；Western blot實驗顯示SMMC-7721細胞接受雷公藤紅素處理后，細胞中NF-κB蛋白表達下調(diào)，并呈現(xiàn)一定的時間依賴性。裸鼠成瘤實驗顯示，雷公藤紅素可以抑制裸鼠種植瘤的生長。 結(jié)論雷公藤紅素能顯著抑制SMMC-7721增殖并誘導其凋亡，并可以抑制裸鼠種植瘤的生長。雷公藤紅素可能通過激活Caspase-3通路及抑制NF-κB通路誘導SMMC-7721細胞凋亡。
目的探討分泌 EphrinAl-Caspase-3 的 T 淋巴細胞體內(nèi)移植對乳腺癌生長的抑制作用。方法采用 6 周齡的 BALB/c 裸鼠接種乳腺腫瘤細胞構(gòu)建裸鼠乳腺癌模型后，按隨機數(shù)字表法隨機分為 3 組：PBS 組瘤內(nèi)注射 10 μL PBS，陰性對照組瘤內(nèi)注射 1×106 個未感染腺病毒的 T 淋巴細胞，感染組瘤內(nèi)注射 1×106 個 EphrinAl-Caspase3-T 淋巴細胞，每隔 3 天用游標卡尺測量腫瘤的大?。?、3、6、9、12 及 15 d）至實驗結(jié)束。處死裸鼠取其腫瘤組織檢測組織中 EphrinAl-Caspase-3 的含量，并行病理學檢查觀察表達綠色熒光蛋白的 T 淋巴細胞的存在，以及 Caspase-3 和 Ki-67 陽性細胞的表達情況。結(jié)果第 0 天和第 3 天時，3 組裸鼠的腫瘤體積比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；第 6 天及以后，感染組和 PBS 組/陰性對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但各時點 PBS 組和陰性對照組的腫瘤體積比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。感染組的腫瘤組織中可見散在的綠色熒光蛋白標記的 EphrinAl-Caspase-3-T 淋巴細胞的存在，而 PBS 組和陰性對照組均沒有檢測到綠色熒光蛋白的存在。與 PBS 組和陰性對照組比較，感染組的腫瘤細胞中，Caspase-3 陽性細胞比例較高，Ki-67 陽性細胞比例較低。感染組在第 3 天就可以檢測出 EphrinAl-Caspase-3 的表達，第 6 天時達到高峰，隨后分泌量逐漸降低；PBS 組和陰性對照組各時點均沒有檢測到 EphrinAl-Caspase-3 的表達。結(jié)論EphrinAl-Caspase-3 能明顯抑制體內(nèi)乳腺癌細胞的生長，促進凋亡。
目的探討銀杏內(nèi)酯B（ginkgolide B，GB）對缺氧/復氧心肌細胞半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）/10號染色體缺失張力蛋白同源的磷酸酶基因（chromosome 10 deletion phosphatase-tension protein homologue，PTEN）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）通路及細胞增殖凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)H9C2細胞，對照組用無血清DMEM高糖培養(yǎng)基在37℃、5% CO2條件下培養(yǎng)28 h，其余各組制備缺氧/復氧模型，GB低劑量組和GB高劑量組在缺氧/復氧前1 h分別用終濃度為50 μmol/L和200 μmol/L的GB預處理，卡維地洛組在缺氧/復氧前1 h用終濃度為10 μmol/L的卡維地洛預處理。檢測H9C2細胞增殖和細胞凋亡，同時檢測H9C2細胞中乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、活性氧（reactive oxygen species，ROS）、PTEN、Akt、磷酸化 Akt（phosphorylated Akt，p-Akt）和Caspase-3水平。結(jié)果與對照組比較，其余各組H9C2細胞增殖率、PTEN、Akt和p-Akt水平降低，細胞凋亡率、LDH、MDA、ROS和Caspase-3水平升高（P<0.05）；與缺氧復氧組比較，各GB劑量組和卡維地洛組H9C2細胞增殖率、PTEN、Akt和p-Akt水平升高，細胞凋亡率、LDH、MDA、ROS和Caspase-3水平降低，各GB劑量組呈劑量依賴性，但GB的作用強度不如卡維地洛（P<0.05）。結(jié)論GB通過激活Caspase-3/PTEN/Akt通路，抑制缺氧/復氧H9C2細胞凋亡，促進H9C2細胞增殖。