目的探討大鼠脊髓缺血再灌注損傷（spinal cord ischemia/reperfusion injury，SCII）后脊髓細胞熱休克蛋白27（heat shock protein 27，HSP27）與凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2蛋白的表達及其相互關(guān)系。 方法成年雄性SD大鼠70只，體重200～220 g，隨機分為假手術(shù)組和SCII組，每組35只。假手術(shù)組僅顯露左腎動脈，不夾閉腹主動脈；SCII組夾閉大鼠腹主動脈20 min，于缺血后4、8、12 h及1、2、3、5 d分別取5只大鼠進行再灌注處理。各時間點再灌注后處死大鼠取脊髓組織，采用免疫組織化學染色檢測HSP27、Bax、Bcl-2蛋白的相對表達量。 結(jié)果SCII組HSP27于4 h時開始表達，3 d達高峰，5 d表達減少；在3 d及5 d時相對表達量與其他各時間點比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。Bcl-2于4 h開始表達，1 d達高峰，2 d時仍維持高表達狀態(tài)，之后逐漸減少；1、2 d時相對表達量與其他各時間點比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。Bax的表達分別在12 h和3 d達高峰，5 d表達減少；12 h、3 d時相對表達量與其他各時間點比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。假手術(shù)組各時間點各蛋白僅少量表達，SCII組HSP27、Bax、Bcl-2蛋白的相對表達量均明顯高于假手術(shù)組（P lt; 0.05）。 結(jié)論SCII后脊髓神經(jīng)可能存在自行修復(fù)時間窗，HSP27對SCII組織產(chǎn)生保護效應(yīng)的可能機制是促進脊髓組織抗凋亡蛋白Bcl-2表達，減少促凋亡蛋白Bax表達，以抑制脊髓組織細胞凋亡，從而發(fā)揮其保護作用。
檢測人腰椎間盤組織中的細胞密度、細胞凋亡率以及Bax 和半胱氨酸蛋白酶蛋白3（Caspase-3）的表達，為深入了解人腰椎間盤退變的機制提供實驗依據(jù)，并為將來通過生物學方法延緩腰椎間盤退變提供新的思路。 方法 實驗組30 個椎間盤標本（L2 ～ S1）來自27 例行后路腰椎間盤切除椎間融合手術(shù)自愿捐贈的患者，男18 例，女9 例；年齡30 ～ 72 歲，平均51.09 歲。所有病變節(jié)段均經(jīng)MRI 證實，患者術(shù)前均未接受椎間盤造影、膠原酶髓核溶解或椎間盤激光汽化術(shù)。對照組20 個標本（L2 ～ S1）來自5 例青年男性意外死亡者新鮮尸檢腰椎間盤；年齡24 ～ 37 歲，平均30.83 歲。采用HE 染色觀察凋亡軟骨細胞、凋亡小體和細胞密度，TUNEL 染色法檢測人腰椎間盤中的凋亡細胞率，用SP 免疫組織化學法檢測Bax 及Caspase-3 表達，圖像分析Bax 及Caspase-3 的平均灰度值。 結(jié)果 HE 染色示對照組、實驗組軟骨終板和髓核內(nèi)的平均細胞密度分別為（17.16 ± 1.22）、（12.41 ± 0.95）個/HP，二者差異有統(tǒng)計學意義（P lt;0.01）。TUNEL染色觀察示對照組的軟骨終板與髓核內(nèi)的平均凋亡細胞率為6.97% ± 0.92%，低于實驗組的12.59% ± 0.95%（P lt; 0.01）。SP 免疫組織化學染色示對照組髓核內(nèi)Bax 、Caspase-3 染色陽性細胞率分別為11.02% ± 1.18% 和9.01% ±1.00%，均低于實驗組的19.29% ± 1.18% 和15.07% ± 0.97%，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。對照組腰椎間盤髓核內(nèi)Bax、Caspase-3 的平均灰度值分別為187.33 ± 7.88 和185.68 ± 3.26，實驗組分別為124.98 ± 6.69 和160.13 ± 4.37，兩組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。將全部腰椎間盤標本進行Pearson 相關(guān)分析，對照組和實驗組腰椎間盤凋亡細胞率與細胞密度間成負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r 分別為－ 0.88 和－ 0.93（P lt; 0.01）；兩組髓核內(nèi)Bax、Caspase-3 陽性細胞率與凋亡細胞率之間成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r 分別為 0.83 和 0.91（P lt; 0.01）。 結(jié)論 細胞密度下降參與了人腰椎間盤的退變過程，Bax和Caspase-3 的表達上調(diào)在人腰椎間盤髓核細胞的凋亡過程中有一定作用。
目的通過研究潰瘍性結(jié)腸炎（UC）模型大鼠結(jié)腸組織 Bcl-2、Bax mRNA 的變化，探討香連丸對 UC大鼠細胞凋亡的影響。 方法將 50 只 7 周齡 Wistar 大鼠隨機分為正常組、模型組（UC 模型）、中藥組（香連丸）、抑制劑組、中藥+抑制劑組。采用經(jīng)典三硝基苯磺酸灌腸法復(fù)制 UC 模型大鼠；造模成功后光學顯微鏡下觀察各組大鼠結(jié)腸黏膜組織損傷程度并評分，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測 Bcl-2、Bax mRNA 表達變化，原位末端凋亡法檢測細胞凋亡情況。 結(jié)果UC 模型大鼠肉眼及鏡下可見結(jié)腸潰瘍形成，可伴有炎癥、充血、水腫等病理改變；與正常組相比，模型組 Bcl-2 mRNA 表達降低， Bax mRNA 表達增高；香連丸干預(yù)后可改善結(jié)腸上皮細胞凋亡，降低 Bax mRNA 表達， Bcl-2 mRNA 表達增加。 結(jié)論UC 模型大鼠結(jié)腸黏膜損傷，與細胞凋亡因子 Bcl-2、Bax 的變化有關(guān)；香連丸可提高 Bcl-2 mRNA、減少 Bax mRNA 的表達，改善結(jié)腸黏膜損傷，減少上皮細胞凋亡，改善細胞凋亡情況。
目的探討E2F1、ID1和Bax蛋白在膽囊腺癌組織中的表達及意義。 方法采用免疫組織化學SP法檢測70例膽囊腺癌、20例高級別腺上皮內(nèi)瘤變、30例低級別腺上皮內(nèi)瘤變和20例膽囊炎癥組織中E2F1、ID1和Bax蛋白的表達。 結(jié)果E2F1、ID1和Bax蛋白在膽囊腺癌組織中的表達陽性率分別為84.3%、70.0%和25.7%；在高級別腺上皮內(nèi)瘤變的表達陽性率分別為75.0%、65.0%和55.0%；在低級別腺上皮內(nèi)瘤變的表達陽性率分別為16.7%、23.3%和56.7%；在膽囊炎癥組織中的表達陽性率分別為10.0%、20.0%和75.0%。在膽囊腺癌組織中E2F1和ID1蛋白表達陽性率高于而Bax蛋白表達陽性率低于上皮內(nèi)瘤變及炎癥組織（P＜0.05）；E2F1和ID1蛋白表達與膽囊腺癌的臨床Nevin分期相關(guān)（P＜0.05），與膽囊腺癌的分化程度無關(guān)（P＞0.05）；Bax蛋白表達與膽囊腺癌分化程度相關(guān)（P＜0.05），與膽囊腺癌的臨床Nevi分期無關(guān)（P＞0.05）。E2F1蛋白表達與Bax蛋白表達呈負相關(guān)（r=-0.375，P＜0.05），ID1蛋白表達與Bax蛋白表達無關(guān)（P＞0.05），E2F1蛋白表達與ID1蛋白正相關(guān)（r=7.031，P＜0.05）。 結(jié)論E2F1、ID1和Bax蛋白表達與膽囊腺癌的發(fā)生相關(guān)；聯(lián)合檢測E2F1、ID1和Bax蛋白的表達對膽囊腺癌輔助診斷及臨床分期有重要的指導(dǎo)意義。
目的檢測 Notch 信號通路在激活和失活狀態(tài)下，鼠膝骨關(guān)節(jié)軟骨細胞中 Notch1、Bax 和 Bcl-2 基因的表達情況，探討 Notch 信號通路在大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）軟骨細胞凋亡中的作用機制。方法選取 34 只無特定病原體級 Sprague Dawley 大鼠，其中 32 只使用 Hulth 方法制造右膝 OA 模型，余下 2 只正常飼養(yǎng)。4 周后，造模大鼠隨機選擇 2 只以及正常飼養(yǎng)的 2 只大鼠全部處死，觀察右膝軟骨的形態(tài)變化，并進行病理檢查證實造模成功，余下的 30 只大鼠隨機分成激活組、抑制組、空白對照組，每組 10 只。于每周星期二、五行大鼠膝關(guān)節(jié)腔注射，其中激活組注射 Nocth 信號通路特異性激活劑 Jagged1 蛋白 25 ng/kg，抑制組注射 γ 分泌酶抑制劑 DAPT（GSI-IX）100 ng/kg，空白對照組注射同體積磷酸鹽緩沖液。關(guān)節(jié)腔注射 8 周后全部處死大鼠，取右膝股骨髁關(guān)節(jié)骨軟骨標本，大體觀察 3 組大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的退變程度，行光學顯微鏡下組織形態(tài)學觀察及 Mankin 評分，并采用免疫組織化學檢測各組軟骨細胞中 Notch1、Bax 和 Bcl-2 蛋白的表達情況。結(jié)果關(guān)節(jié)腔注射 8 周后，抑制組、空白對照組、激活組 Mankin 評分分別為（3.40±0.84）、（6.70±0.95）、（11.10±1.37）分，組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。抑制組大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的 Notch1、Bax 陽性率均低于空白對照組及激活組（P<0.05），Bcl-2 陽性率高于空白對照組及激活組（P<0.05）。結(jié)論Notch 信號通路激活后可能通過凋亡途徑上調(diào) Bax 蛋白，下調(diào) Bcl-2 蛋白，從而促進軟骨細胞凋亡，加重 OA；Notch 信號通路抑制后可能通過凋亡途徑下調(diào) Bax 蛋白，上調(diào) Bcl-2 蛋白，從而抑制軟骨細胞凋亡，減輕 OA 發(fā)展。
摘要:目的:動態(tài)觀察大鼠腦出血后血腫周圍組織補體激活與細胞凋亡的規(guī)律。方法:用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術(shù)組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、免疫組織化學染色及原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標記法(TUNEL)分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時血腫周圍補體C3、促凋亡基因(Bax)、抑凋亡基因(Bclxl)及TUNEL的表達。結(jié)果補體C3的表達峰值在24~48 h;TUNEL、Bax蛋白表達術(shù)后12h增加,48~72 h達高峰,而Bclxl蛋白表達高峰在48h。結(jié)論:大鼠腦出血后血腫周圍組織補體C3的表達增加與細胞凋亡的演變趨勢一致,C3與凋亡有相關(guān)。Abstract: Objective: To study the complement activation and apoptosis regular genes changes in the tissues of the perihematoma of intracerebral hemorrhage (ICH) in rats. Methods: Intracerebral hemorrhage was induced in rats by injection of bacterial collagenase into the caudate nucleus. Histopathological changes were studied in 6 h,12 h, 24 h, 2 d, 3 d, 5 d, 7 d after the injection. The immunohistochemistry and TUNEL analysis were performed. The expression of complement factor C3, the TUNELpositive cells, the proapoptotic gene expression (Bax) and the antiapoptotic gene (Bclxl) were examined. Results: The expression of C3 increased to its maximum between 2448 h. The TUNELpositive cells and Bax protein expression increased gradually and reached the peak level between 4872 h. The Bclxl protein reached the peak level at 48 h. The correlation analysis showed that the quantity of C3 was positively related to that of the TUNELpositive cells, but the bax protein was not related to Bclxl protein. Conclusion: The expression of complement factor C3 may contributes to the nerve injury after cerebral hemorrhage and relate to the apotosis in the tissues surrounding the hametoma in rats.
目的研究抑凋亡基因bcl2和促凋亡基因bax在大腸癌及癌旁組織中的表達及意義。方法應(yīng)用免疫組織化學SP法對31例大腸癌患者的癌組織及距癌組織外緣3 cm內(nèi)的癌旁組織和3 cm以遠的正常大腸組織中bcl2和bax基因的表達進行檢測。結(jié)果大腸癌及其癌旁組織中bcl2蛋白表達陽性率分別為64.5%和60.0%，顯著高于正常組織（35.0%），P＜0.05； bax蛋白表達陽性率分別為45.2%和45.0%，顯著低于正常組織（60.0%），P＜0.05； 大腸癌組織與癌旁組織中bcl2和bax蛋白表達陽性率的差異無顯著性意義（Pgt;0.05）。bcl2和bax蛋白在大腸癌組織中的表達與其病理類型和臨床分期無明顯關(guān)系（Pgt;0.05）。結(jié)論大腸癌及其癌旁組織中有不同水平的bcl2蛋白過度表達和bax蛋白低表達，兩者通過參與調(diào)節(jié)細胞凋亡而與大腸癌的發(fā)生有關(guān)，但與大腸癌的病理類型、臨床分期無關(guān)。距大腸癌組織外緣3 cm以內(nèi)的癌旁組織應(yīng)視為癌前期組織，手術(shù)時應(yīng)切除。
目的觀察逆行灌注心臟不停跳雙瓣膜置換術(shù)圍術(shù)期心肌細胞凋亡及Bcl-2，Bax蛋白表達的變化。方法將26例風濕性心臟病患者分為兩組，實驗組：14例，阻斷主動脈后淺低溫逆行灌注持續(xù)給予氧合血，使心臟緩慢跳動（40～50次／分）；對照組：12例，中度低溫阻斷主動脈后根部灌注高鉀含血停搏液，待心臟停搏后改為逆行灌注。術(shù)中多時點檢測血漿肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌鈣蛋白T（cTnT）的含量；分別于體外循環(huán)（CPB）前，CPB后30min留取右心房標本，檢測心肌凋亡細胞及免疫組化法測定心肌細胞Bcl-2和Bax蛋白表達。結(jié)果與CPB前比較，主動脈阻斷30min時兩組CK-MB、cTnT和心肌細胞凋亡數(shù)明顯升高（P〈0．01），Bax表達明顯降低（P〈0．01），實驗組Bcl-2表達降低不明顯（P〉0．05），而對照組Bcl-2表達降低明顯（P〈0．01）。與對照組比較，主動脈阻斷30min后實驗組CK-MB、cTnT和心肌細胞凋亡數(shù)明顯降低（P〈0．05），Bcl-2表達明顯升高（P〈0．01）。結(jié)論逆行灌注心臟不停跳雙瓣膜置換術(shù)與心臟停搏手術(shù)相比較，對心肌細胞凋亡的影響較小，可能與維持Bcl-2蛋白表達水平，抑制Bcl-2／Bax基因向Bax偏移等因素有關(guān)。
目的研究新西蘭大白兔心肌細胞缺血-再灌注后原癌基因（c-fos）、增殖細胞核抗原（PCNA），Bax基因，Bcl-2基因的表達及其臨床意義。方法用18只新西蘭大白兔建立心肌缺血-再灌注模型，按不同再灌注方法隨機分為3組，每組6只。Ⅰ組，缺血15min，不灌注；Ⅱ組，缺血15min，再灌注15min；Ⅲ組，缺血15min，再灌注30min。術(shù)后分別取缺血-再灌注區(qū)及對照區(qū)（非缺血-再灌注區(qū)）心肌組織進行c-fos，PCNA，Bax，Bcl-2的免疫組織化學檢測。結(jié)果3組心肌細胞缺血-再灌注后c-fos、PCNA、Bax和Bcl-2均有陽性表達，缺血-再灌注區(qū)均高于對照區(qū)（P〈0．01或〈0．05）；組間比較：缺血-再灌注區(qū)c-fos、Bax和Bcl-2陽性率Ⅱ組、Ⅲ組均高于Ⅰ組，且Ⅲ組高于Ⅱ組（P〈0．01），PCNA陽性率Ⅲ組高于Ⅰ組（P〈0．01）。3組缺血-再灌注區(qū)Bax／Bcl-2比值均較對照區(qū)增高。結(jié)論心肌缺血和再灌注顯著誘導(dǎo)c-fos的表達，其增加與心肌再灌注損傷有關(guān)；心肌缺血-再灌注后誘發(fā)細胞促凋亡／抗凋亡相關(guān)基因Bax／Bcl-2的激活，存在著與增殖基因共同表達的特點。
目的 探討胸腺瘤表皮生長因子受體(EGFR)、增殖細胞核抗原(PCNA)、Bcl-2和Bax的表達與胸腺瘤臨床病理特征的關(guān)系及臨床意義. 方法 應(yīng)用免疫組織化學鏈霉素親生物蛋白-過氧化酶(S-P)法檢測46例胸腺瘤患者EGFR、PCNA、Bcl-2和Bax的表達. 結(jié)果 胸腺瘤EGFR陽性表達率為71.7%,PCNA標記指數(shù)為4.00%±1.87%,Bcl-2、Bax陽性率分別為41.3%、15.2%.EGFR表達與胸腺瘤Masaoka分期、腫瘤性質(zhì)有明顯關(guān)系,EGFR陰性者術(shù)后生存率顯著高于陽性者(P=0.005).PCNA標記指數(shù)和Bcl-2與胸腺瘤腫瘤性質(zhì)有明顯關(guān)系,Bcl-2陰性者術(shù)后生存率顯著高于陽性者(P=0.002).EGFR、PCNA、Bcl-2和Bax表達均與胸腺瘤組織學類型、是否合并重癥肌無力無明顯關(guān)系. 結(jié)論 EGFR與胸腺瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān),可作為Masaoka分期的補充推測預(yù)后.Bcl-2與胸腺癌發(fā)生有關(guān),可作為胸腺癌的標記物用于鑒別診斷.