目的 報道應(yīng)用小腿外側(cè)皮瓣修復(fù)脛前和足軟組織缺損的方法和臨床效果。方法 1999年8月～2004年12月應(yīng)用小腿外側(cè)島狀皮瓣順行修復(fù)脛前軟組織缺損5例，逆行修復(fù)足跟、足背軟組織缺損10例，游離小腿外側(cè)皮瓣修復(fù)足背軟組織缺損3例。結(jié)果 術(shù)后皮瓣全部成活。其中2例術(shù)后出現(xiàn)動脈危象，經(jīng)拆除蒂部縫線，注射利多卡因注射液，危象解除； 1例因術(shù)中意外損傷腓靜脈出現(xiàn)皮瓣靜脈危象，術(shù)后切開皮瓣邊緣皮膚放血并局部滴注肝素液1周，皮瓣成活。本組均獲隨訪2個月～1年，皮瓣無臃腫，彈性好。結(jié)論 小腿外側(cè)皮瓣具有血管解剖恒定、厚薄適中、供區(qū)隱蔽等優(yōu)點，是修復(fù)脛前和足軟組織缺損的有效方法。
目的 探討伴會陰部損傷的開放性骨盆骨折治療方法及療效。 方法 2000 年8 月－ 2010 年7 月，收治16 例伴會陰部損傷的開放性骨盆骨折患者。男12 例，女4 例；年齡17 ～ 69 歲，平均41 歲。致傷原因：交通事故傷9 例，高處墜落傷6 例，重物砸傷1 例。受傷至入院時間為5 ～ 20 min，平均8 min。骨盆骨折按照Tile 分型標(biāo)準(zhǔn)：A 型2 例，B 型6 例，C 型8 例。創(chuàng)面范圍5 cm × 3 cm ～ 15 cm × 12 cm。會陰部損傷部位：腹膜內(nèi)直腸損傷2 例，腹膜外直腸肛管損傷14 例。按創(chuàng)傷嚴(yán)重度評分標(biāo)準(zhǔn)（injury severity score，ISS）評分為25 ～ 48 分，平均29 分。入院后按創(chuàng)傷骨折流程急救處理，主要包括急救復(fù)蘇、結(jié)腸造瘺、外固定架固定、創(chuàng)面多次清創(chuàng)、沖洗、持續(xù)封閉式負(fù)壓引流技術(shù)（vacuum sealingdrainage，VSD）。 結(jié)果 入院4 d 內(nèi)死亡5 例，其中3 例死于失血性休克，2 例死于多器官功能衰竭。余11 例存活患者均獲隨訪，隨訪時間6 ～ 46 個月，平均14 個月。X 線片檢查示骨盆骨折于術(shù)后2 ～ 4 個月達(dá)骨性愈合。術(shù)后會陰部損傷創(chuàng)面均有不同程度感染，經(jīng)擴(kuò)創(chuàng)、VSD 治療后，其中10 例創(chuàng)面直接拉攏縫合后Ⅱ期愈合，1 例行股薄肌皮瓣移位修復(fù)后愈合。直腸肛管損傷患者隨訪期間無失禁表現(xiàn)。 結(jié)論 對于伴會陰部損傷的開放性骨盆骨折，應(yīng)早期積極抗休克、保護(hù)重要臟器功能、處理合并癥，后期抗感染、恢復(fù)骨盆環(huán)穩(wěn)定性、修復(fù)重建直腸肛管及尿道功能，以獲得較好療效。
目的制備小腸黏膜下層（small intestinal submucosa，SIS）-蠶絲復(fù)合支架用于前交叉韌帶（anteriorcruciate ligament，ACL）重建，并對其力學(xué)性能、細(xì)胞相容性、組織相容性以及體內(nèi)重建減緩脛骨隧道關(guān)節(jié)液滲入作用進(jìn)行評價。 方法蠶絲脫膠后編織成蠶絲支架，將膜狀SIS呈圓筒狀包繞在蠶絲支架外圍構(gòu)建復(fù)合支架，采用生物力學(xué)測試儀評價支架生物力學(xué)性能；支架復(fù)合BMSCs培養(yǎng)后，以活死細(xì)胞染色及細(xì)胞計數(shù)試劑盒8法評價支架的細(xì)胞相容性。取30只6周齡SD大鼠隨機(jī)分為蠶絲支架組（S組）與復(fù)合支架組（SS組），每組15只，分別將兩組支架材料移植于大鼠皮下，2、4、8周取材行HE染色觀察組織相容性。取20只28周齡新西蘭大白兔雙側(cè)后肢隨機(jī)分為S組與SS組（n=20），分別用蠶絲支架與復(fù)合支架行雙膝ACL重建，脛骨隧道開窗，5 mL 10% NaCl和墨水溶液分別行關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，不同時間點測量骨窗內(nèi)移植物的電阻值并記錄骨窗處墨水滲出時間。 結(jié)果支架大體觀察見復(fù)合支架內(nèi)部為雙股螺旋蠶絲束，外圍SIS呈圓筒狀包繞。蠶絲支架與復(fù)合支架最大載荷分別為（138.62±11.41）、（137.05±16.95）N，剛度分別為（24.65±2.62）、（24.21±2.39）N/mm，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）?；钏兰?xì)胞染色顯示蠶絲支架和復(fù)合支架上細(xì)胞活力均良好，其中復(fù)合支架上細(xì)胞伸展性更好。細(xì)胞增殖曲線示蠶絲支架組、復(fù)合支架組及正常細(xì)胞對照組各時間點吸光度（A）值差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。大鼠皮下埋植標(biāo)本HE染色觀察示，材料植入后SS組與周圍組織相容性好，炎性細(xì)胞和新生血管數(shù)與S組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。兔關(guān)節(jié)腔灌注后SS組電阻值開始下降時間點和墨水滲出時間均明顯晚于S組（P＜0.05），且墨水滲出持續(xù)時間明顯長于S組（P＜0.05）。 結(jié)論制備的SIS-蠶絲復(fù)合支架生物力學(xué)性能及細(xì)胞、組織相容性好，體內(nèi)移植能早期血管化，并對ACL重建早期脛骨隧道關(guān)節(jié)液滲入有較好的減緩作用，有望成為較理想的ACL重建材料。
【摘 要】 目的 探討體外快速培養(yǎng)犬食管黏膜上皮細(xì)胞（esophageal mucosa epithelial cells，EMECs）及其與SIS 體外復(fù)合培養(yǎng)的方法，為組織工程食管研究提供實驗依據(jù)。 方法 取2 ～ 5 周齡幼犬5 只，無菌獲取其食管組織，采用混合酶消化法，分離培養(yǎng)EMECs，于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，取第2 代細(xì)胞培養(yǎng)1 ～ 5 d 繪制生長曲線并進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK-19）檢測。取第2 代EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4、8 d，行形態(tài)學(xué)、組織學(xué)及掃描電鏡觀察。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下EMSCs 呈典型鋪路石樣。CK-19 免疫組織化學(xué)染色可見細(xì)胞胞漿呈陽性染色。MTT 法測定第2 代細(xì)胞在傳代培養(yǎng)2 d 生長達(dá)高峰。EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4 d，細(xì)胞呈多角形，細(xì)胞間連接緊密，呈鋪路石樣排列；SIS 表面形成1 ～ 2 層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)。8 d 時，細(xì)胞密度增大，SIS 表面形成2 ～ 3層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)；掃描電鏡見細(xì)胞在材料上已大量增長，呈層狀排列。 結(jié)論 采用混合酶消化法，用含6%FBS 的DKSFM 培養(yǎng)犬EMECs，方法簡便，適合推廣應(yīng)用。SIS 與EMECs 有良好的相容性，可作為構(gòu)建組織工程食管的理想支架材料。
目的 探討上皮細(xì)胞條件培養(yǎng)液（epithelial cell conditioned medium，ECCM）體外誘導(dǎo)犬BMSCs 向上皮細(xì)胞分化的可行性。 方法 成年健康雄性比格犬1 只，體重10 kg。于犬髂后上棘采用骨髓穿刺法取骨髓5 mL，分離培養(yǎng)BMSCs。取犬口腔黏膜下組織，剪成約 4 mm × 4 mm 大小，制備ECCM。取第2 代BMSCs 以2 × 104 個/ 孔細(xì)胞密度接種，實驗組于ECCM 中培養(yǎng)，對照組于低糖DMEM 完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。觀察兩組細(xì)胞形態(tài)特征，MTT 法繪制生長曲線，誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d 免疫組織化學(xué)染色鑒定上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物——細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin19，CK-19）和細(xì)胞角蛋白AE1/AE3，透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下見兩組細(xì)胞均呈長梭形，均勻分布，折光性較強(qiáng)，增殖迅速。兩組細(xì)胞生長曲線均呈“S”形，實驗組生長曲線較對照組右移，提示ECCM 對細(xì)胞增殖有抑制作用。實驗組CK-19 和細(xì)胞角蛋白AE1/AE3 免疫組織化學(xué)染色均呈陽性反應(yīng)，對照組呈陰性。透射電鏡下實驗組細(xì)胞胞漿內(nèi)可見緊密連接。 結(jié)論 ECCM 體外有誘導(dǎo)同種BMSCs 向上皮細(xì)胞分化的作用。