• 四川大學(xué)華西醫(yī)院 生物治療國家重點(diǎn)實驗室? 干細(xì)胞與組織工程研究室(成都,610041);

【摘 要】 目的 探討體外快速培養(yǎng)犬食管黏膜上皮細(xì)胞(esophageal mucosa epithelial cells,EMECs)及其與
SIS 體外復(fù)合培養(yǎng)的方法,為組織工程食管研究提供實驗依據(jù)。 方法 取2 ~ 5 周齡幼犬5 只,無菌獲取其食管組織,采
用混合酶消化法,分離培養(yǎng)EMECs,于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,取第2 代細(xì)胞培養(yǎng)1 ~ 5 d 繪制生長曲線并
進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK-19)檢測。取第2 代EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4、8 d,行形態(tài)學(xué)、
組織學(xué)及掃描電鏡觀察。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下EMSCs 呈典型鋪路石樣。CK-19 免疫組織化學(xué)染色可見細(xì)胞胞漿
呈陽性染色。MTT 法測定第2 代細(xì)胞在傳代培養(yǎng)2 d 生長達(dá)高峰。EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4 d,細(xì)胞呈多角形,細(xì)胞間
連接緊密,呈鋪路石樣排列;SIS 表面形成1 ~ 2 層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)。8 d 時,細(xì)胞密度增大,SIS 表面形成2 ~ 3層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu);掃描電鏡見細(xì)胞在材料上已大量增長,呈層狀排列。 結(jié)論 采用混合酶消化法,用含6%
FBS 的DKSFM 培養(yǎng)犬EMECs,方法簡便,適合推廣應(yīng)用。SIS 與EMECs 有良好的相容性,可作為構(gòu)建組織工程食管的
理想支架材料。

引用本文: 譚波,魏人前,楊志明,李秀群,韓平,智偉,解慧琪. 食管黏膜上皮細(xì)胞與SIS 復(fù)合培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(6): 742-746. doi: 復(fù)制