目的 研究內(nèi)皮素-3(endothelin-3,ET-3)mRNA的表達(dá)水平與急性胰腺炎時胰腺炎癥程度的關(guān)系。方法 將54只SD大鼠編號后隨機分為4組，其中假手術(shù)組9只，胰腺炎組、動脈給藥組和靜脈給藥組〔多巴胺： 5 μg/（kg·min）〕各15只，按Aho法用4.5%?；悄懰徕c膽胰管逆行注射制作急性胰腺炎模型，分別在1、6及24 h取胰腺組織,采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測ET-3基因的轉(zhuǎn)錄水平，并觀察各組胰腺組織病理變化，確定ET-3 mRNA的表達(dá)水平與胰腺炎炎癥程度的關(guān)系。結(jié)果 模型制作后1、6及24 h均可見到ET-3 mRNA表達(dá)，各組（除假手術(shù)組外）均以6 h時ET-3 mRNA表達(dá)最強。除1 h外，動脈給藥組ET-3 mRNA表達(dá)量明顯低于靜脈給藥組及胰腺炎組（P＜0.05，P＜0.01）； 而假手術(shù)組在任何時相均明顯低于另外3組（P＜0.05，P＜0.01）。各組胰腺組織病理學(xué)評分按假手術(shù)組→動脈給藥組→靜脈給藥組→胰腺炎組的順序逐漸升高。結(jié)論 ET-3 mRNA的表達(dá)與胰腺炎炎癥程度有一定關(guān)系，ET-3 mRNA表達(dá)量隨胰腺炎嚴(yán)重程度的加重而增加； 急性胰腺炎中，多巴胺動脈給藥比靜脈給藥有效。
目的探討自主神經(jīng)控制對人肝細(xì)胞增殖的影響及其機理，并對增殖相關(guān)受體定位。方法用去甲腎上腺素（NE）及其拮抗劑及激動劑和乙酰膽堿（Ach）及其阻滯劑作用于人傳代正常肝L02細(xì)胞及肝癌Bel7402細(xì)胞，分別于4 h、24 h、48 h及72 h用改良MTT法檢測上述藥物對細(xì)胞增殖的影響； 免疫組織化學(xué)染色法對肝L02細(xì)胞的腎上腺素受體（α1BAR及β2AR）和表皮生長因子受體（EGFR）定位。結(jié)果NE對人正常肝細(xì)胞及肝癌細(xì)胞具有促增殖作用，且隨濃度增加其促增殖作用也增加，4 h的增殖率較其它時間點顯著增高（P＜0.05）； NE+心得安組的作用與NE組間差異無顯著性意義； 二羥苯基異丙氨基乙醇的作用不明顯; Ach對人正常肝細(xì)胞的增殖具有抑制作用，且隨濃度增加其抑制作用也增加，加用阿托品在24 h及48 h與Ach比抑制率顯著降低（P＜0.05）； 琥珀膽堿組在24 h、48 h及72 h對細(xì)胞的增殖也具有抑制作用（P＜0.05，P＜0.01）。所有人肝L02細(xì)胞都呈α1BAR、β2AR及EGFR免疫反應(yīng)陽性，主要定位于胞膜及胞漿。結(jié)論血清存在下，交感神經(jīng)遞質(zhì)NE早期對人正常肝細(xì)胞L02及人肝癌細(xì)胞Bel7402具有促增殖作用，其作用是通過激動αAR實現(xiàn)的, βAR對人肝細(xì)胞增殖無影響。副交感神經(jīng)遞質(zhì)Ach對人正常肝細(xì)胞L02的增殖具有抑制作用，其作用是通過激動M及N型膽堿受體實現(xiàn)的。
【摘要】目的研究三七總皂苷（PNGS）對大鼠肝臟低溫保存的影響及其作用機理。方法采用大鼠離體肝臟再灌注模型（IPRL），用Fura-2法測定DMEM液中加入不同濃度的PNGS置低溫保存2 h后肝細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度； 將含有不同濃度PNGS的乳酸林格氏液（LR）低溫保存24 h的肝臟再灌注30 min后檢測肝臟功能、氧自由基代謝產(chǎn)物、能量物質(zhì)和膽汁流量并進行形態(tài)學(xué)觀察。 結(jié)果大鼠肝細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、MDA、AST、ALT及LDH濃度明顯低于對照組，而SOD、ATP、TAN、EC含量及膽汁引流量則高于對照組（P＜0.01），PNGS對大鼠肝臟的保護作用顯示出劑量依賴性，在200~600 mg范圍內(nèi)隨劑量增加保護作用隨之增強（P＜0.01），在800~1 000 mg范圍內(nèi)雖有增強，但差異無顯著性意義（Pgt;0.05）。結(jié)論PNGS可通過抑制鈣超載、抗氧自由基損傷、促進能量物質(zhì)代謝等多種機理減輕大鼠肝臟在低溫保存時的損傷。
目的探討鼠肝大部切除術(shù)后空、回腸粘膜固有層細(xì)胞免疫功能的變化及其與腸道細(xì)菌移位的關(guān)系。方法將48只SD大鼠隨機分為實驗組和假手術(shù)組，每組24只。實驗組切除70%肝臟，假手術(shù)組除不切除肝臟外，其余手術(shù)步驟同實驗組。分別于術(shù)后6、12、24和72 h取兩組大鼠（n=6）空、回腸粘膜冰凍切片，而后行免疫組化染色，觀察不同時相腸粘膜固有層CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴細(xì)胞的數(shù)量及肝臟功能的變化。結(jié)果實驗組術(shù)后24 h和72 h，其腸粘膜固有層CD3+、CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞的數(shù)量較假手術(shù)組明顯下降（P＜0.05），而兩組大鼠術(shù)后不同時相的ALT及AST變化，實驗組明顯高于假手術(shù)組（Plt;0.05）。結(jié)論鼠肝大部切除（70%）術(shù)后24 h，腸粘膜固有層CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯降低。這種細(xì)胞免疫功能降低所導(dǎo)致的腸粘膜屏障功能受損，可能是造成腸道細(xì)菌移位的原因之一。
目的探討S腺苷蛋氨酸在肝硬變大鼠行部分肝葉切除后對肝細(xì)胞的再生及肝功能的影響。方法用40%四氯化碳誘導(dǎo)Wistar大 鼠肝硬變模型，而后將成模大鼠隨機分為肝硬變組（n=20）、治療1組〔S腺苷蛋氨酸10 mg/（kg·d），n=16〕及治療2組〔S腺 苷蛋氨酸20 mg/（kg·d），n=16〕，另設(shè)正常對照組（n=16）。4組大鼠均行30%左右肝葉切除。自手術(shù)當(dāng)天起，治療1、2組分別肌 注S腺苷蛋氨酸10 mg/（kg·d）和20 mg/（kg·d），對照組肌注生理鹽水5 ml/d，共15 d。4組大鼠分別于術(shù)后15 d和30 d處死一 半，取血檢測Alb、ALT、TB、TBA及TNFα，同時在光鏡及電鏡下觀察肝組織的病理改變及超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果肝硬變組術(shù)后15 d和 30 d的TB、TBA、ALT及TNFα水平明顯高于正常對照組（P＜0.01）, Alb水平明顯低于正常對照組（P＜0.01）； 治療1、2組術(shù)后 15 d的上述4項指標(biāo)高于正常對照組(P＜0.05)，但明顯低于肝硬變組（P＜0.01），Alb水平低于正常對照組（P＜0.05），卻明顯高 于肝硬變組（P＜0.01）； 治療1、2組術(shù)后30 d上述各指標(biāo)均接近正常對照組水平。TNFα和TB、TBA、ALT呈顯著正相關(guān)（r值分別 為 0.99、0.97、0.93， P＜0.01），與Alb呈顯著負(fù)相關(guān)（r值為-0.88，P＜0.01）。治療組光鏡觀察見肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整，有較 多的雙核肝細(xì)胞以及少量淋巴細(xì)胞浸潤，電鏡觀察見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及糖原增生，線粒體豐富。結(jié)論S腺苷蛋氨酸能促進肝葉切除術(shù)后 肝細(xì)胞的再生，可改善肝功能。
目的探討T細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)特異性免疫耐受與外周血T細(xì)胞凋亡的關(guān)系。方法制備針對Wistar大鼠的SD大鼠T細(xì)胞疫苗，然后用該疫苗免疫健康SD大鼠，每周1次, 連續(xù)3周，作為實驗組（n=6）。對照組（n=6）用RPMI 1640培養(yǎng)液替代T細(xì)胞疫苗。以被免疫的SD大鼠的脾細(xì)胞作為反應(yīng)細(xì)胞，以Wistar大鼠的脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞(經(jīng)絲裂霉素處理)，于接種前和每次接種后第5天進行單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（3HTDR摻入法）,測定其cpm值； 用流式細(xì)胞儀對外周血T細(xì)胞凋亡情況進行檢測。結(jié)果混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果顯示，實驗組SD大鼠脾細(xì)胞免疫應(yīng)答能力于接種后受到顯著抑制，其cpm值較接種前顯著降低 (P＜0.01)； 對照組接種前后各時點比較，其差異無顯著性（Pgt;0.05）； 接種后相同時點的cpm值組間比較, 實驗組顯著低于對照組(P＜0.01)； 與接種前比較，接種后實驗組外周血T細(xì)胞凋亡率顯著增高(Plt;0.01)，且隨著疫苗接種次數(shù)的增加而升高，而對照組接種后各時點T細(xì)胞凋亡率與接種前比較差異無顯著性（Pgt;0.05）。結(jié)論T細(xì)胞疫苗可以誘導(dǎo)同種特異性免疫耐受，其機理可能是通過誘導(dǎo)外周血T細(xì)胞凋亡，清除抗原特異性反應(yīng)性T細(xì)胞克隆來實現(xiàn)的。
目的 探討血管生長抑素基因聯(lián)合生長抑素在體外對人胰腺癌細(xì)胞BXPC-3和血管內(nèi)皮細(xì)胞ECV-304增殖的抑制作用。方法 重組pcDNA3/angio質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胰腺癌細(xì)胞BXPC-3，利用RT-PCR和Western blot檢測其表達(dá)及分泌血管生長抑素的情況； MTT法和流式細(xì)胞儀檢測生長抑素和血管生長抑素對BXPC-3和ECV-304細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果 轉(zhuǎn)染后的BXPC-3細(xì)胞表達(dá)并分泌血管生長抑素。一定濃度（≥10 μg/ml）的生長抑素對BXPC-3細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用（P＜0.01），并在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴性，同時能誘導(dǎo)BXPC-3細(xì)胞凋亡（P＜0.01）； 但其對ECV-304細(xì)胞的增殖無明顯影響（Pgt;0.05）。血管生長抑素對ECV-304細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用（P＜0.01），并能誘導(dǎo)其凋亡（P＜0.01）； 但對BXPC-3細(xì)胞的增殖無明顯影響（Pgt;0.05）。血管生長抑素聯(lián)合生長抑素對BXPC-3及ECV-304細(xì)胞的增殖均有明顯抑制作用（P＜0.01），也可誘導(dǎo)其凋亡（P＜0.01），但無協(xié)同增強效應(yīng)。結(jié)論 ①生長抑素主要通過直接抑制胰腺癌細(xì)胞增殖、促進其凋亡而發(fā)揮抗胰腺癌作用； 在體外其對血管內(nèi)皮細(xì)胞無抑制作用。②血管生長抑素主要通過特異性地抑制胰腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，從而抑制新生毛細(xì)血管的生成，致胰腺癌細(xì)胞壞死和腫瘤消退。
目的選擇能夠早期反映同種異體原位肝移植術(shù)后他克莫司(FK506)對患者腎功能損傷的靈敏指標(biāo)。方法回顧性分析我院自2000年2月至2005年5月的15例腎功能正常的肝移植患者的臨床資料，重點分析其尿α1微球蛋白（α1MG）和微量白蛋白（mAlb）以及血肌肝（Cr）和尿素氮(BUN)與FK506血藥濃度之間的關(guān)系。結(jié)果15例肝臟移植患者，尿α1MG及mAlb含量與FK506血藥濃度呈正相關(guān)（r=0.939,P＜0.005; r=0.893, P＜0.05）， 血Cr及BUN與FK506血藥濃度無相關(guān)性(r=0.490,Pgt;0.05； r=0.382,Pgt;0.05)。結(jié)論尿α1MG和mAlb可作為反映腎功能損傷的早期的靈敏指標(biāo)，有利于監(jiān)測肝移植術(shù)后FK506的理想全血濃度，能夠為臨床早期診斷和治療腎功能損傷提供參考指標(biāo)。