華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"李秀群" 28條結(jié)果
  • 以生物衍生材料為支架的組織工程骨移植早期兔外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化

    目的 檢測體外構(gòu)建的組織工程骨移植后兔外周血T細(xì)胞亞群的變化,對(duì)移植組織進(jìn)行組織學(xué)觀察,探討以生物衍生材料作為骨組織工程支架材料的可行性。 方法 組織工程骨以兔骨膜來源的成骨細(xì)胞為種子細(xì)胞,經(jīng)抗原自消化、部分脫鈣、凍干后的異體骨為支架材料于體外構(gòu)建。將健康新西蘭白兔48只制成1 cm長橈骨缺損模型后,隨機(jī)分成A~D 4組,每組12只,分別用部分脫鈣凍干骨(partial demineralized freezedried bone,PDFDB)、組織工程骨、自體骨、同種異體骨植入兔橈骨節(jié)段性缺損。術(shù)后1、2、4周取材,用流式細(xì)胞儀檢測4種材料移植早期兔外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化;通過常規(guī)組織學(xué)檢測觀察2、4、8、12周時(shí)4種材料的成骨作用。 結(jié)果 B組術(shù)后2周材料孔隙內(nèi)有成骨細(xì)胞和成軟骨細(xì)胞,可見骨、軟骨混合性新生物形成,周邊分布有破骨細(xì)胞,部分網(wǎng)架呈蠶食狀被破壞吸收。術(shù)后4周,形成的新生骨過渡為編織骨。A、B組材料植入后1、2周外周血CD4+和CD8+ T細(xì)胞較術(shù)前明顯升高(P<0.05);術(shù)后4周CD4+ T細(xì)胞較術(shù)前輕度偏高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。C組術(shù)后CD4+和CD8+ T細(xì)胞升高不明顯(P>0.05)。D組術(shù)后1、2、4周外周血CD4+和CD8+ T細(xì)胞較術(shù)前及其他各組同期均明顯增高(P<0.05)。 結(jié)論 PDFDB為支架材料構(gòu)建的細(xì)胞材料復(fù)合物移植后外周血T淋巴細(xì)胞增高,但不影響其良好的修復(fù)骨缺損能力,生物衍生骨可作為支架材料應(yīng)用于骨組織工程研究。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:22 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • WO-1生物衍生骨緩釋材料抗感染的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 研制具有抗感染作用的WO-1生物衍生骨緩釋材料。方法 應(yīng)用Ⅰ型膠原和同種骨制備膠原生物衍生骨復(fù)合材料,將WO-1吸附于膠原生物衍生骨構(gòu)建成WO-1生物衍生骨緩釋材料,掃描電鏡觀察其形貌特征;將3 H四環(huán)素(45.1GBq/mmol)以WO-1標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋,吸附于膠原生物衍生骨,測定緩釋材料中WO-1的體外釋放;將WO-1生物衍生骨緩釋材料置入接種金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌的培養(yǎng)基中,檢測其體外抑菌能力。將WO-1生物衍生骨植入24只新西蘭大白兔橈骨缺損處,術(shù)后9、16、23及30 d各處死2只兔測定血中WO-1的濃度,以及材料周圍肌肉與骨中的WO-1的濃度。結(jié)果 WO-1生物衍生骨復(fù)合材料保留了天然骨的三維結(jié)構(gòu),表面有膠狀膜覆蓋;在體外釋放實(shí)驗(yàn)中第1天呈暴發(fā)釋放,以后呈恒定釋放;對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等骨感染的常見致病菌有持久穩(wěn)定的抑菌能力。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中周圍骨組織及肌肉組織中WO-1在各時(shí)間點(diǎn)均保持較高的濃度,組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而動(dòng)物血中WO-1濃度較低,與骨及肌肉組織中WO-1濃度相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 WO-1生物衍生骨緩釋材料具有良好的藥物緩釋功能及較強(qiáng)的抑菌能力。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:29 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • WO-1生物衍生組織工程骨支架材料的制備及性能研究

    目的 制備WO-1膠原生物衍生骨復(fù)合支架材料,檢測其理化性質(zhì)及力學(xué)強(qiáng)度,為骨組織工程研究和應(yīng)用提供可選擇的支架材料。方法 將同種異體骨、I型膠原、WO-1進(jìn)行系列理化處理,制成單純生物衍生骨材料、膠原生物衍生骨復(fù)合材料及WO-1膠原生物衍生骨復(fù)合材料。制備后的材料行大體及掃描電鏡觀察其形貌特征,X線衍射分析材料成分,并對(duì)材料的力學(xué)性能進(jìn)行分析測定。結(jié)果 單純生物衍生骨材料具有天然骨的網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng);膠原生物衍生骨復(fù)合材料具有天然骨的網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng),微孔表面覆蓋膠原膜;WO-1膠原生物衍生組織工程骨復(fù)合支架材料具有骨組織的天然網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng),微孔表面可見膠原膜覆蓋。3種材料的孔徑依次為90~700 μm、75~600 μm、80~600 μm;孔隙率依次為87.96%、80.47%、84.29%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);其主要成分為羥基磷灰石,彎曲強(qiáng)度和壓縮強(qiáng)度無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 WO.1膠原生物衍生骨復(fù)合材料與其它兩種材料相同,可作為一種有效的天然組織工程骨支架材料。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:29 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 低溫保存的組織工程骨修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 探討低溫保存的組織工程骨修復(fù)骨缺損的能力及低溫保存的可行性。方法 將人源性生物衍生骨材料復(fù)合成骨細(xì)胞構(gòu)建的組織工程骨,在4℃ 和-196℃的溫度環(huán)境中保存3個(gè)月和6個(gè)月,同時(shí)以未行低溫保存的組織工程骨和生物衍生骨材料作為對(duì)照,分別修復(fù)實(shí)驗(yàn)兔橈骨的長段骨缺損。80只成年日本大耳白兔,隨機(jī)分為4個(gè)實(shí)驗(yàn)組(左前肢植入材料):A3組:組織工程骨在4℃ 保存3個(gè)月;A6組:組織工程骨在4℃ 保存6個(gè)月;B組:組織工程骨在-196℃ 保存3個(gè)月;B6組:組織工程骨在-196℃ 保存6個(gè)月。2個(gè)對(duì)照組(右前肢植入材料):C組:組織工程骨未行低溫保存;D組:單純生物衍生骨材料。于術(shù)后2、4、6和12周行大體和組織學(xué)觀察,并于6周和12周行X線片檢查和生物力學(xué)檢測。結(jié)果 術(shù)后大體觀察,A3、A6、B3、B6和C組間無顯著差異,D組骨痂少且斷端更為明顯。各時(shí)間點(diǎn)組織學(xué)觀察,A3、A6、B3、B6和C組植入材料周圍膠原及骨痂均較D組明顯,術(shù)后12周組織學(xué)評(píng)分,D組與其它各組比較 P值<0.05。X線片示D組植入材料皮質(zhì)骨無明顯變化,骨痂較少;余各組12周植入材料與自體骨融合,髓腔開通,骨折線消失,塑形好。生物力學(xué)檢測D組與其它各組比較P值<0.05。結(jié)論 以4℃和-196℃保存方法能有效保存組織工程骨,對(duì)修復(fù)骨缺損有明顯效果,這一方法適宜推廣應(yīng)用。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:29 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 成骨細(xì)胞與生物衍生支架材料相互作用的基因表達(dá)研究

    目的 研究組織工程骨體外構(gòu)建過程中,成骨細(xì)胞與生物衍生骨相互作用的基因表達(dá)。方法用人胚骨膜來源的成骨細(xì)胞與生物衍生骨體外復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建組織工程骨。培養(yǎng)2、4、6、8和10 d,分別提取總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。用熒光及TaqMan探針行實(shí)時(shí)定量PCR,分別擴(kuò)增成骨細(xì)胞特異轉(zhuǎn)錄因子(Cbfa1)、成骨細(xì)胞特異基因(Osterix)、Ⅰ型膠原、骨鈣素(osteocalcin,OC)和整合素α5和β1(Integrin α5 and β1),讀取擴(kuò)增循環(huán)數(shù)(Ct值),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以單純培養(yǎng)的成骨細(xì)胞作為對(duì)照組。 結(jié)果 Cbfa1與Osterix變化一致,其中實(shí)驗(yàn)組Osterix在2 d和 8 d的表達(dá)均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。Ⅰ型膠原與OC的表達(dá)變化一致,實(shí)驗(yàn)組除10 d時(shí),其余各時(shí)間段Ⅰ型膠原表達(dá)均明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。Intgerin的表達(dá)始終處于較高水平,在培養(yǎng)最初的2 d,實(shí)驗(yàn)組Integrin β1表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。結(jié)論 成骨細(xì)胞與生物衍生材料復(fù)合后,重要基因可持續(xù)正常表達(dá)。作為支架材料,生物衍生骨在保持成骨細(xì)胞性狀、誘導(dǎo)及促進(jìn)成骨細(xì)胞分化方面有明顯優(yōu)越性;它不僅對(duì)細(xì)胞順利進(jìn)入增殖狀態(tài)無影響,而且為細(xì)胞增殖提供廣闊而有效的空間。成骨細(xì)胞最終可良好分化,充分發(fā)揮成骨功能,并有利于成骨細(xì)胞黏附,黏附行為貫穿細(xì)胞與材料相互作用的整個(gè)過程,而并非局限于開始階段。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:29 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 脫細(xì)胞羊膜的制備及其生物相容性研究

    目的 制備脫細(xì)胞人羊膜(HAAM),檢測其細(xì)胞相容性和組織相容性,探討其作為組織工程支架材料的可行性。方法 新鮮人羊膜經(jīng)漂洗后戊二醛交聯(lián),0.5%SDS震搖24小時(shí),胰蛋白酶消化4小時(shí),充分漂洗,冷凍干燥,分裝,環(huán)氧乙烷消毒備用。倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察表面結(jié)構(gòu),測量孔徑,并作HE、Mallory染色。體外培養(yǎng)人成纖維細(xì)胞并復(fù)合于HAAM,倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察細(xì)胞的黏附、生長,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定HAAM浸提液對(duì)培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞的細(xì)胞毒性。將HAAM植入SD大鼠背部皮下,觀察其組織相容性。結(jié)果 HAAM的一面為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),孔徑為10~80 nm,另一面為致密纖維結(jié)構(gòu)。HE、Mallory染色表明材料無細(xì)胞殘留,均為膠原組成。成纖維細(xì)胞能在HAAM上黏附、增殖。MTT示材料細(xì)胞毒性為0或1級(jí),動(dòng)物埋置實(shí)驗(yàn)無異常反應(yīng)。結(jié)論 應(yīng)用去垢劑-酶消化法處理新鮮人羊膜,能有效去除組織中的細(xì)胞和可溶性成分,可進(jìn)一步降低其免疫原性,保留基質(zhì)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),有良好的細(xì)胞相容性和組織相容性,可作為組織缺損的修復(fù)材料及組織工程的膜支架材料。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:33 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 生物衍生羊膜對(duì)大鼠跟腱粘連影響的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 研究生物衍生羊膜預(yù)防SD大鼠跟腱粘連的效果,并為臨床預(yù)防術(shù)后跟腱粘連提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法 以28只SD大鼠后肢跟腱為實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,切斷并縫合跟腱,實(shí)驗(yàn)側(cè)跟腱包裹生物衍生羊膜,對(duì)側(cè)不包裹作為對(duì)照,術(shù)后1、2、4、6、8和12周分別取跟腱,大體及組織學(xué)觀察跟腱的粘連、愈合情況。結(jié)果 術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)兩側(cè)跟腱吻合處炎性細(xì)胞浸潤情況、跟腱愈合進(jìn)程無明顯差別,跟腱粘連的半定量評(píng)分表明實(shí)驗(yàn)側(cè)和對(duì)照側(cè)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。結(jié)論 生物衍生羊膜能有效預(yù)防跟腱粘連,是一種較為理想的預(yù)防跟腱粘連的生物材料。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:33 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 組織工程軟骨修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的初步研究

    目的 探討運(yùn)用組織工程軟骨植入修復(fù)兔脛骨平臺(tái)外側(cè)髁全關(guān)節(jié)軟骨淺層缺損的可行性。方法 取 2周齡乳兔軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)傳代至第 3代后 ,與人胎盤 型膠原蛋白海綿復(fù)合后植入成年兔的脛骨體平臺(tái)外側(cè)髁淺層完全軟骨缺損區(qū) ,并設(shè)立空白對(duì)照組 ,分別于術(shù)后 4、12和 2 4周取材 ,觀察修復(fù)效果。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組術(shù)后 4周缺損表面未見明顯的新生軟骨形成 ;12周 ,缺損表面有少量的新生軟骨形成 ,組織學(xué)切片上可見軟骨細(xì)胞呈邊緣不規(guī)則的 ,小蜂窩狀結(jié)構(gòu) ,軟骨細(xì)胞周圍有軟骨陷窩形成 ;2 4周 ,缺損表面的新生軟骨較 4、12周的新生軟骨明顯 ,表面光滑 ,且與周圍組織結(jié)合緊密 ,但仍存在部分缺損尚未修復(fù)。組織學(xué)切片上可見軟骨陷窩形成 ,并分泌甲苯胺藍(lán)異染的軟骨基質(zhì)。而對(duì)照組則均未見明顯的修復(fù)。結(jié)論 制成的組織工程軟骨對(duì)兔脛骨平臺(tái)軟骨淺層完全缺損有修復(fù)作用 ,但不能完全修復(fù)缺損。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:35 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 改良的硬組織包埋技術(shù)對(duì)乳牙破骨細(xì)胞的觀察

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:35 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 成骨細(xì)胞與生物衍生材料聯(lián)合培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 探索凍干脫鈣骨基質(zhì) (FDBM)作為組織工程骨支架的可行性。方法 取兔顱骨外膜的成骨細(xì)胞 ,經(jīng)傳代培養(yǎng)后作為種子細(xì)胞與FDBM于體外聯(lián)合培養(yǎng) ,通過對(duì)復(fù)合物相差顯微鏡、光鏡及掃描電鏡等觀察 ,了解細(xì)胞在材料中的生長情況。結(jié)果 經(jīng)系統(tǒng)處理后的FDBM呈現(xiàn)不規(guī)則的網(wǎng) -孔結(jié)構(gòu),其孔隙直徑為10 0~40 0 μm,孔隙率為70 %。體外復(fù)合培養(yǎng) 8小時(shí) ,成骨細(xì)胞即開始貼附于FDBM網(wǎng)架上;復(fù)合培養(yǎng)7天,分布于支架材料上的成骨細(xì)胞迅速分化增殖,分泌細(xì)胞外基質(zhì)并形成鈣結(jié)節(jié)。結(jié)論 FDBM可作為構(gòu)建組織工程骨的一種較好支架材料。

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