目的 制備脫細胞人羊膜(HAAM),檢測其細胞相容性和組織相容性,探討其作為組織工程支架材料的可行性。方法 新鮮人羊膜經(jīng)漂洗后戊二醛交聯(lián),0.5%SDS震搖24小時,胰蛋白酶消化4小時,充分漂洗,冷凍干燥,分裝,環(huán)氧乙烷消毒備用。倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察表面結(jié)構(gòu),測量孔徑,并作HE、Mallory染色。體外培養(yǎng)人成纖維細胞并復合于HAAM,倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察細胞的黏附、生長,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定HAAM浸提液對培養(yǎng)的人成纖維細胞的細胞毒性。將HAAM植入SD大鼠背部皮下,觀察其組織相容性。結(jié)果 HAAM的一面為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),孔徑為10~80 nm,另一面為致密纖維結(jié)構(gòu)。HE、Mallory染色表明材料無細胞殘留,均為膠原組成。成纖維細胞能在HAAM上黏附、增殖。MTT示材料細胞毒性為0或1級,動物埋置實驗無異常反應。結(jié)論 應用去垢劑-酶消化法處理新鮮人羊膜,能有效去除組織中的細胞和可溶性成分,可進一步降低其免疫原性,保留基質(zhì)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),有良好的細胞相容性和組織相容性,可作為組織缺損的修復材料及組織工程的膜支架材料。
引用本文: 羅靜聰,李秀群,楊志明,鄧力. 脫細胞羊膜的制備及其生物相容性研究. 中國修復重建外科雜志, 2004, 18(2): 108-111. doi: 復制