目的 研究組織工程骨體外構(gòu)建過(guò)程中,成骨細(xì)胞與生物衍生骨相互作用的基因表達(dá)。方法用人胚骨膜來(lái)源的成骨細(xì)胞與生物衍生骨體外復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建組織工程骨。培養(yǎng)2、4、6、8和10 d,分別提取總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。用熒光及TaqMan探針行實(shí)時(shí)定量PCR,分別擴(kuò)增成骨細(xì)胞特異轉(zhuǎn)錄因子(Cbfa1)、成骨細(xì)胞特異基因(Osterix)、Ⅰ型膠原、骨鈣素(osteocalcin,OC)和整合素α5和β1(Integrin α5 and β1),讀取擴(kuò)增循環(huán)數(shù)(Ct值),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以單純培養(yǎng)的成骨細(xì)胞作為對(duì)照組。 結(jié)果 Cbfa1與Osterix變化一致,其中實(shí)驗(yàn)組Osterix在2 d和 8 d的表達(dá)均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。Ⅰ型膠原與OC的表達(dá)變化一致,實(shí)驗(yàn)組除10 d時(shí),其余各時(shí)間段Ⅰ型膠原表達(dá)均明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。Intgerin的表達(dá)始終處于較高水平,在培養(yǎng)最初的2 d,實(shí)驗(yàn)組Integrin β1表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。結(jié)論 成骨細(xì)胞與生物衍生材料復(fù)合后,重要基因可持續(xù)正常表達(dá)。作為支架材料,生物衍生骨在保持成骨細(xì)胞性狀、誘導(dǎo)及促進(jìn)成骨細(xì)胞分化方面有明顯優(yōu)越性;它不僅對(duì)細(xì)胞順利進(jìn)入增殖狀態(tài)無(wú)影響,而且為細(xì)胞增殖提供廣闊而有效的空間。成骨細(xì)胞最終可良好分化,充分發(fā)揮成骨功能,并有利于成骨細(xì)胞黏附,黏附行為貫穿細(xì)胞與材料相互作用的整個(gè)過(guò)程,而并非局限于開始階段。
引用本文: 祁潔,楊志明,解慧琪,李秀群. 成骨細(xì)胞與生物衍生支架材料相互作用的基因表達(dá)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2005, 19(7): 563-568. doi: 復(fù)制