目的 采用新型雙向三維可降解生物活性材料膠原復(fù)合梯度TCP(collagen complex TCP,Col/TCP)對(duì)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損進(jìn)行修復(fù),并對(duì)再生軟骨進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察。 方法 取30 只成年大白兔,體重2.0 ~ 2.5 kg,雌雄不限,于雙側(cè)股骨外側(cè)髁制作關(guān)節(jié)軟骨缺損模型。于右側(cè)植入Col/TCP 修復(fù)缺損,作為實(shí)驗(yàn)組,左側(cè)不予處理作為對(duì)照組。術(shù)后4、6、8、12 和24 周分別處死6 只動(dòng)物,取股骨外側(cè)髁關(guān)節(jié)面行大體、組織學(xué)、透射電鏡及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察。采用Wakitanifa 法軟骨組織形態(tài)學(xué)評(píng)分評(píng)價(jià)修復(fù)組織質(zhì)量。 結(jié)果 大體觀察:實(shí)驗(yàn)組術(shù)后4 周,缺損區(qū)由白色組織完全充填,表面較光滑,有光澤;12 周,修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨組織與周圍正常軟骨基本一致,且與關(guān)節(jié)下骨結(jié)合緊密;24 周,再生軟骨未見(jiàn)明顯退變。對(duì)照組觀察期內(nèi)均未見(jiàn)軟骨組織形成,缺損由纖維組織填充,修復(fù)組織表面粗糙,與正常組織界線清楚。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后4、6、8、12 和24 周組織學(xué)評(píng)分分別為(7.60 ± 0.98)、(5.69 ± 0.58)、(4.46 ± 0.85)、(4.35 ± 0.12)、(4.41 ±0.58)分,對(duì)照組分別為(10.25 ± 1.05)、(9.04 ± 0.96)、(8.96 ± 0.88)、(8.88 ± 0.68)、(8.66 ± 0.54)分;Ⅱ型膠原含量實(shí)驗(yàn)組分別為0.28% ± 0.01%、0.59% ± 0.03%、0.68% ± 0.02%、0.89% ± 0.02%和0.90% ± 0.01%,對(duì)照組為0.08% ± 0.02%、0.09% ±0.04%、0.11% ± 0.03%、0.25% ± 0.03% 和0.29% ± 0.01%;兩組各指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。透射電鏡觀察實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)典型軟骨細(xì)胞,而對(duì)照組為粗大膠原纖維,細(xì)胞少見(jiàn)。 結(jié)論 雙向三維可降解生物活性材料Col/TCP 在動(dòng)物體內(nèi)可誘導(dǎo)關(guān)節(jié)軟骨缺損后的軟骨修復(fù)。
目的評(píng)價(jià)數(shù)字化術(shù)前計(jì)劃對(duì)人工全髖關(guān)節(jié)置換(total hip arthroplasty,THA)治療發(fā)育性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良(development dysplasia of the hip,DDH)中髖臼重建的作用。方法將2009年1月-2011年12月收治并符合選擇標(biāo)準(zhǔn)的42例DDH患者納入研究,根據(jù)術(shù)前計(jì)劃方法不同隨機(jī)分為兩組,其中23例(A組)行常規(guī)術(shù)前影像學(xué)分析,19例(B組)采用TraumaCad軟件進(jìn)行術(shù)前計(jì)劃。兩組患者性別、年齡、體重指數(shù)、DDH分型及術(shù)前Harris評(píng)分比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05),具有可比性。記錄兩組手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量以及相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生情況;于術(shù)后7 d復(fù)查骨盆標(biāo)準(zhǔn)前后位X線片,采用TraumaCad軟件測(cè)量髖臼假體水平距離、垂直距離、影像學(xué)前傾角、影像學(xué)外傾角和假體大小,比較兩組髖臼假體放置合格率,以及B組術(shù)前預(yù)測(cè)和實(shí)際放置假體大小符合率。 結(jié)果A、B組手術(shù)時(shí)間分別為(119.25 ± 47.16)、(155.31 ± 84.03)min,術(shù)中出血量分別為(410.00 ± 200.39)、(387.50 ± 251.99)mL,兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。術(shù)后3例發(fā)生并發(fā)癥,其中A組切口感染1例,假體前脫位1例;B組假體后脫位1例?;颊呔@隨訪,A組隨訪時(shí)間1年1個(gè)月~4年1個(gè)月,平均2年8個(gè)月;B組1年3個(gè)月~4年,平均2年7個(gè)月。末次隨訪時(shí),A組Harris評(píng)分為(91.09 ± 5.35)分,B組為(91.72 ± 3.48)分,均較術(shù)前顯著提高(P lt; 0.05);但兩組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.41,P=0.69)。TraumaCad軟件測(cè)量示,B組髖臼假體放置合格率為78.95%(15/19),明顯高于A組的43.48%(10/23)(χ2=5.43,P=0.02)。B組髖臼假體術(shù)前預(yù)測(cè)大小與實(shí)際放置符合率為68.42%(13/19)。 結(jié)論THA治療DDH時(shí)數(shù)字化術(shù)前計(jì)劃能進(jìn)一步優(yōu)化髖臼重建。
目的 探討含聚乳酸-羥基乙酸共聚物(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)的新型磷酸鈣骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)(CPC/PLGA)體內(nèi)降解性能,為臨床試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。 方法按照45%磷酸氫鈣、45%部分結(jié)晶磷酸鈣、10% PLGA比例,制備CPC/PLGA。健康成年新西蘭兔32只,體重2.2~3.0 kg,雌雄各半;隨機(jī)分為CPC/PLGA組(實(shí)驗(yàn)組,n=17)及CPC組(對(duì)照組,n=15)。兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物制備雙側(cè)股骨內(nèi)側(cè)髁直徑4.5 mm、深1.5 cm骨缺損模型,右側(cè)骨缺損分別采用CPC/PLGA及CPC修復(fù),左側(cè)不作處理作為空白對(duì)照。術(shù)后觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況,術(shù)后2、4、8、16、24周兩組取材行組織學(xué)觀察、骨形態(tài)計(jì)量學(xué)分析,術(shù)后8周及16周實(shí)驗(yàn)組取材行掃描電鏡觀察。 結(jié)果實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。組織學(xué)觀察顯示,隨時(shí)間延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組CPC/PLGA逐漸降解,并有新生骨小梁從邊緣長(zhǎng)入其中,并且增粗、增長(zhǎng),24周時(shí)材料基本降解,被新生骨小梁取代;對(duì)照組CPC降解明顯較實(shí)驗(yàn)組延遲。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后總骨組織含量百分比為44.9% ± 23.7%,顯著高于對(duì)照組的25.7% ± 10.9%(t=3.302,P=0.001);實(shí)驗(yàn)組術(shù)后4周骨組織含量百分比與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05),8、16、24周均顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。掃描電鏡觀察結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組術(shù)后8周CPC/PLGA降解后形成孔徑為100~300 μm孔隙;隨著時(shí)間延長(zhǎng),16周時(shí)新生骨小梁長(zhǎng)入孔隙內(nèi),并與殘余骨水泥牢固結(jié)合。 結(jié)論CPC/PLGA植入兔體內(nèi)后具有良好的降解性能,有望成為一種良好骨移植材料。
目的? 探討人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后股骨偏心距對(duì)行走過(guò)程中骨盆穩(wěn)定性的影響。? 方法 2000 年1 月- 2005 年 12 月,29 例患者行單側(cè)人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)。男 10 例,女 19 例;年齡 33 ~ 75 歲,平均 64.3 歲。左髖 15例,右髖 14 例。隨訪時(shí)間 5 ~ 10 年,平均 7.7 年。末次隨訪時(shí) Harris 評(píng)分為 90 ~ 100 分,平均 97 分。末次隨訪時(shí)行標(biāo)準(zhǔn)骨盆正位 X 線片檢查,測(cè)量雙側(cè)股骨偏心距,計(jì)算股骨偏心距比(femoral offset ratio,F(xiàn)OR);根據(jù)測(cè)量結(jié)果將患者分為兩組, A 組:術(shù)側(cè)股骨偏心距小于健側(cè), 10 例; B 組:術(shù)側(cè)股骨偏心距大于健側(cè), 19 例。行三維步態(tài)分析,采集行走時(shí)骨盆在冠狀面的傾斜角度;并對(duì)FOR與傾斜角度進(jìn)行Pearson相關(guān)分析。? 結(jié)果 A組FOR 為0.81 ± 0.08, B組FOR為1.27 ± 0.15。A 組患肢單腿支撐相骨盆在冠狀面的傾斜角度為(— 0.42 ± 0.91)°,B 組為(1.02 ± 0.94)°,健側(cè)為(1.15 ± 0.85)°。A 組骨盆在冠狀面的傾斜角度與 B 組、健側(cè)比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05); B 組與健側(cè)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。骨盆在冠狀面的傾斜角度與FOR成正相關(guān)(r =0.534, P=0.003),回歸方程為: y= — 2.551 + 2.781x。? 結(jié)論 重建股骨偏心距是避免人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后臀中肌無(wú)力及改善步態(tài)的重要因素。
目的 總結(jié)人工全膝關(guān)節(jié)置換(total knee arthroplasty,TKA)中,糾正髕股關(guān)節(jié)軌跡運(yùn)行不良的方法。 方法 2000 年1 月- 2007 年5 月,對(duì)48 例49 膝TKA 中出現(xiàn)髕股關(guān)節(jié)軌跡運(yùn)行不良患者采用平衡髕骨內(nèi)外側(cè)支持帶張力、適當(dāng)調(diào)整脛骨假體位置或重建髕韌帶止點(diǎn)的方法進(jìn)行糾正?;颊呔鶠榕裕荒挲g53 ~ 76 歲,平均66.8 歲。病程6 ~ 23 年,平均16.2 年。其中骨性關(guān)節(jié)炎37 例38 膝,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎11 例11 膝?;枷ゾ胁煌潭认ネ夥兔劰峭庑巍Oネ夥菫?3 ~ 42°,平均33°;Q 角為16 ~ 23°,平均19°。23 例有8 ~ 35° 屈曲畸形,平均22°。術(shù)前膝關(guān)節(jié)KSS 評(píng)分21 ~ 51 分,平均32 分;KSS 功能評(píng)分29 ~ 45 分,平均33 分。 結(jié)果 術(shù)中髕股關(guān)節(jié)運(yùn)行軌跡恢復(fù)正常,髕骨未再出現(xiàn)向外脫位傾向。術(shù)后切口均Ⅰ期愈合,無(wú)相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生。所有患者術(shù)后均獲隨訪,隨訪時(shí)間7 ~ 82 個(gè)月,中位隨訪時(shí)間52 個(gè)月。膝關(guān)節(jié)外翻畸形均獲得矯正,3 例殘留5° 左右的屈曲畸形,重建的髕韌帶未出現(xiàn)撕裂或斷裂現(xiàn)象。術(shù)后膝關(guān)節(jié)KSS 評(píng)分為76 ~ 89 分,平均82 分;KSS 功能評(píng)分為81 ~ 90 分,平均85 分。術(shù)后至隨訪期末X 線片均顯示人工關(guān)節(jié)位置正常。 結(jié)論 TKA 中出現(xiàn)髕股關(guān)節(jié)軌跡運(yùn)行不良時(shí),平衡髕骨內(nèi)外側(cè)支持帶張力、適當(dāng)調(diào)整脛骨假體位置或重建髕韌帶止點(diǎn)是糾正這一現(xiàn)象的有效方法,對(duì)膝關(guān)節(jié)的功能康復(fù)無(wú)不利影響。
目的探討變異髖臼的人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)(total hip arthroplasty,THA)中髖臼假體選擇性上移放置的方法及療效。 方法2005年1月-2010年12月,收治26例(26髖)擬行THA的變異髖臼患者。男5例,女21例;年齡35~67歲,平均52.3歲。左髖11例,右髖15例。其中發(fā)育性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良22例,股骨頭缺血性壞死3例,創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎1例。術(shù)前Harris評(píng)分為(45.85±10.04)分。常規(guī)行骨盆正位、患側(cè)股骨正側(cè)位X線片、骨盆CT平掃及三維重建檢查,采用TraumaCad軟件進(jìn)行術(shù)前設(shè)計(jì)。THA術(shù)中在盡量接近真臼位置且避免大量結(jié)構(gòu)性植骨前提下,根據(jù)具體情況適當(dāng)上移旋轉(zhuǎn)中心,使髖臼假體能獲得70%以上骨性包容,旋轉(zhuǎn)中心上移不超過(guò)15 mm。 結(jié)果11例患側(cè)旋轉(zhuǎn)中心基本與健側(cè)一致(5 mm以內(nèi));余15例行旋轉(zhuǎn)中心上移,其中上移5~10 mm 8例,10~15 mm 7例。術(shù)中無(wú)骨折及神經(jīng)損傷;術(shù)后患者切口均Ⅰ期愈合,無(wú)感染、下肢深靜脈血栓形成等并發(fā)癥發(fā)生。1例術(shù)后3 d發(fā)生關(guān)節(jié)脫位,經(jīng)手法復(fù)位保守治療后無(wú)再脫位?;颊呔@隨訪,隨訪時(shí)間15~71個(gè)月,平均34個(gè)月。末次隨訪時(shí),Harris 評(píng)分達(dá)(91.42±3.59)分,較術(shù)前顯著提高(t=20.099,P=0.000);其中旋轉(zhuǎn)中心基本與健側(cè)一致、上移5~10 mm、10~15 mm者Harris評(píng)分分別為(92.09±4.04)、(91.25±2.82)和(90.57±3.95)分,各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.377,P=0.690)。X線片復(fù)查示,隨訪期間假體均無(wú)松動(dòng)、下沉。 結(jié)論變異髖臼THA中以髖臼假體旋轉(zhuǎn)中心盡可能放置在接近真臼位置前提下,適當(dāng)上移(≤15 mm)假體以獲得至少70%骨性包容和良好自身穩(wěn)定性,可獲得滿意中期療效,遠(yuǎn)期療效有待進(jìn)一步隨訪觀察。
目的探討氨甲環(huán)酸(tranexamic acid,TXA)對(duì)初次同期雙側(cè)人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)(simultaneous bilateral total hip arthroplasty,SBTHA)圍術(shù)期輸血率、顯性失血量及術(shù)后并發(fā)癥的影響。方法回顧性分析 2010 年 1 月—2018 年 12 月 72 例行初次 SBTHA 患者的臨床資料。其中,48 例于術(shù)前 5~10 min 靜脈滴注 TXA(15 mg/kg)(試驗(yàn)組),24 例未使用 TXA(對(duì)照組)。兩組患者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、疾病類型、美國(guó)麻醉醫(yī)師協(xié)會(huì)(ASA)分級(jí)、合并內(nèi)科疾病以及術(shù)前住院時(shí)間、血紅蛋白、紅細(xì)胞比容、血小板計(jì)數(shù)、凝血功能指標(biāo)比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。記錄并比較兩組手術(shù)時(shí)間、術(shù)中失血量以及術(shù)后輸血率、引流量、顯性失血量、并發(fā)癥發(fā)生情況及住院時(shí)間。結(jié)果試驗(yàn)組手術(shù)時(shí)間中位數(shù)為 208.0 min,對(duì)照組為 202.5 min,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=?1.046,P=0.295)。術(shù)后試驗(yàn)組輸血 26 例(54.2%)、對(duì)照組 21 例(87.5%),兩組輸血率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.843,P=0.005);但兩組輸注的懸浮紅細(xì)胞以及血漿量比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。試驗(yàn)組術(shù)中失血量中位數(shù)為 550 mL、對(duì)照組為 600 mL,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=?1.378,P=0.168)。試驗(yàn)組術(shù)后引流量為(542±269)mL、顯性失血量中位數(shù)為 1 050 mL,均明顯低于對(duì)照組的(710±316)、1 270 mL(P<0.05)。術(shù)后試驗(yàn)組出現(xiàn) 1 例切口周圍皮膚張力性水皰、1 例一側(cè)下肢麻木及肌力減退、1 例腔隙性腦梗死,對(duì)照組出現(xiàn) 1 例切口周圍皮膚瘀斑、1 例雙側(cè)下肢麻木及肌力減退,并發(fā)癥發(fā)生率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。兩組術(shù)后均未出現(xiàn)肺栓塞及下肢深靜脈血栓形成。試驗(yàn)組術(shù)后住院時(shí)間及總住院時(shí)間中位數(shù)分別為 9.0、13.0 d,對(duì)照組分別為 9.0、13.0 d,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論對(duì)初次 SBTHA 患者,使用 TXA 可以降低輸血率及圍術(shù)期顯性失血量,具有良好止血作用;同時(shí)不增加切口并發(fā)癥、靜脈栓塞形成發(fā)生率及住院時(shí)間,具有一定安全性。
目的比較氨甲環(huán)酸(tranexamic acid,TXA)抗纖溶后應(yīng)用速碧林、克賽、拜瑞妥及艾樂(lè)妥對(duì)初次單側(cè)人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)(total hip arthroplasty,THA)止血效果及安全性的影響,以期探索最佳療效的抗凝藥。方法回顧分析 2014 年 1 月—2018 年 12 月收治的 184 例行初次單側(cè) THA 且手術(shù)切皮前靜脈滴注 15 mg/kg TXA,術(shù)后應(yīng)用速碧林、克賽、拜瑞妥或艾樂(lè)妥的患者臨床資料。其中速碧林組 46 例、克賽組 45 例、拜瑞妥組 47 例、艾樂(lè)妥組 46 例。4 組患者的年齡、性別、體質(zhì)量、體質(zhì)量指數(shù)、髖關(guān)節(jié)疾病類型、合并癥、麻醉方式、手術(shù)時(shí)間及術(shù)前實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)(血紅蛋白、紅細(xì)胞比容、血小板、凝血酶原時(shí)間、活化部分凝血酶原時(shí)間、血容量)等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。記錄并比較各組圍術(shù)期血液資料(總失血量、隱性失血量、顯性失血量、術(shù)后引流量、術(shù)后血紅蛋白最大丟失量及輸血率)和并發(fā)癥(切口并發(fā)癥、出血并發(fā)癥、血栓并發(fā)癥)發(fā)生情況。結(jié)果4 組患者圍術(shù)期總失血量、隱性失血量、顯性失血量、術(shù)后引流量、術(shù)后血紅蛋白最大丟失量及輸血率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。術(shù)后并發(fā)癥比較顯示,拜瑞妥組發(fā)生 1 例(2.1%)切口紅腫,其余 3 組各發(fā)生 1 例(2.2%)切口愈合不良,4 組均無(wú)切口感染、脂肪液化等并發(fā)癥發(fā)生;各組切口并發(fā)癥發(fā)生率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。速碧林組出現(xiàn) 2 例(4.3%)出血事件(1 例為右腹股溝血腫、1 例為左小腿前方出現(xiàn)皮下瘀斑),其余 3 組未發(fā)生出血事件,各組出血并發(fā)癥發(fā)生率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.612,P=0.132)。速碧林組出現(xiàn) 1 例(2.2%)下肢肌間靜脈血栓形成,其余 3 組未發(fā)生下肢肌間靜脈血栓形成,各組發(fā)生率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.789,P=0.425);4 組均無(wú)下肢深靜脈血栓形成及肺動(dòng)脈栓塞發(fā)生。結(jié)論TXA 抗纖溶后使用速碧林、克賽、拜瑞妥和艾樂(lè)妥,對(duì)初次單側(cè) THA 止血效果和并發(fā)癥發(fā)生率的影響無(wú)明顯差異。臨床上經(jīng) TXA 抗纖溶后可任意選擇 4 種抗凝藥之一來(lái)預(yù)防血栓形成,均具有一定安全性。
目的探討慢性自身免疫性疾病患者行初次人工全髖關(guān)節(jié)置換(total hip arthroplasty,THA)術(shù)后的中遠(yuǎn)期療效。 方法1990年1月-2006年6月,對(duì)42例(51髖) 慢性自身免疫性疾病患者行初次THA。男15例(18髖),女27例(33髖);年齡22~70歲,平均36.9歲。左側(cè)29髖,右側(cè)22髖。其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡11例(13髖),類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎16例(22髖),強(qiáng)直性脊柱炎15例(16髖)。髖關(guān)節(jié)置換原因:股骨頭缺血性壞死26例(34髖),髖關(guān)節(jié)僵硬15例(16髖),股骨頸骨折1例(1髖)。術(shù)前髖關(guān)節(jié)Harris評(píng)分為(32.49 ± 9.50)分;簡(jiǎn)明健康調(diào)查量表(SF-36量表)中體能方面總分(physical component summary,PCS)為(25.53 ± 4.46)分,精神方面總分(mental component summary,MCS)為(42.28 ± 6.27)分。 結(jié)果術(shù)后患者切口均Ⅰ期愈合。42例患者均獲隨訪,隨訪時(shí)間 5~21年,平均9.1年。末次隨訪時(shí)Harris評(píng)分為(89.25 ± 8.47)分; SF-36量表評(píng)分PCS為(51.35 ± 4.28)分, MCS為(55.29 ± 8.31)分;與術(shù)前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。術(shù)后并發(fā)癥包括跛行(4例)、假體脫位(2例2髖)、假體周圍骨折(1例1髖)、假體無(wú)菌性松動(dòng)(2例2髖)以及異位骨化(3例3髖)。 結(jié)論對(duì)于慢性自身免疫性疾病引起的髖關(guān)節(jié)功能喪失,采用THA治療可獲得較好療效。
目的探討微小RNA(microRNA,miRNA)在人脂肪來(lái)源干細(xì)胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs)誘導(dǎo)成軟骨分化過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律及其影響軟骨分化的可能機(jī)制。 方法取行抽脂術(shù)或其他腹部手術(shù)患者自愿捐贈(zèng)的脂肪組織,分離、培養(yǎng)hADSCs并鑒定。取第3代細(xì)胞成軟骨分化,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),于誘導(dǎo)21 d行阿爾新藍(lán)染色觀察軟骨形成情況,誘導(dǎo)0、7、14、21 d行ELISA檢測(cè)成軟骨相關(guān)蛋白Ⅱ型膠原蛋白(collagen type Ⅱ,Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)、Col10a1以及硫酸軟骨素表達(dá)。采用基因芯片技術(shù)篩選hADSCs成軟骨誘導(dǎo)前及誘導(dǎo)后21 d差異性表達(dá)miRNA,并預(yù)測(cè)篩選出的miRNA靶基因。 結(jié)果實(shí)驗(yàn)成功培養(yǎng)hADSCs,經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后,隨時(shí)間延長(zhǎng)可形成軟骨球;21 d阿爾新藍(lán)染色呈陽(yáng)性;hADSCs成軟骨誘導(dǎo)后7、14、21d,Col2a1、Aggrecan、Col10a1及硫酸軟骨素表達(dá)水平均較成軟骨誘導(dǎo)前hADSCs顯著增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。基因芯片技術(shù)共篩選出11個(gè)差異性表達(dá)miRNA,其中7個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào),4個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào)。篩選出的成軟骨相關(guān)miRNAs預(yù)測(cè)靶基因可能參與了干細(xì)胞成軟骨分化、增殖、凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控,以及介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)級(jí)聯(lián)反應(yīng)和自我更新等。 結(jié)論實(shí)驗(yàn)篩選出11個(gè)成軟骨分化差異性表達(dá)超過(guò)2倍的miRNAs,并對(duì)其靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè),加深了對(duì)hADSCs成軟骨分化機(jī)制的理解,為定向控制hADSCs成軟骨分化及篩選組織工程改良種子細(xì)胞提供了理論依據(jù)。