華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 關(guān)鍵詞 包含"分化" 4條結(jié)果
  • 聚乳酸/聚羥基乙酸復(fù)合骨形成蛋白修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損

    目的 以聚乳酸/聚羥基乙酸(poly-lactide-co-glycolide,PLGA)為載體,探討重組人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2, rhBMP-2)在關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)方面的作用及可行性。方法 將PLGA制成直徑4 mm,厚3 mm的圓柱形,與rhBMP-2復(fù)合(0.5 mg/塊),制備PLGA-rhBMP-2復(fù)合物。選取2月齡新西蘭兔,抽取骨髓行原代及傳代培養(yǎng),調(diào)整細(xì)胞密度為2×10.7/ml,與PLGA共培養(yǎng)24 h,制備PLGA細(xì)胞復(fù)合物。另取2月齡新西蘭兔72只,于雙側(cè)髕股關(guān)節(jié)股骨髁部制備直徑4 mm、深達(dá)髓腔的缺損。其中36只兔右側(cè)缺損處植入PLGA-rhBMP-2復(fù)合物,為實(shí)驗(yàn)組;左側(cè)植入PLGA,為單純載體組;另36只兔左側(cè)缺損不作任何處理,為空白對照組,右側(cè)缺損處植入PLGA-細(xì)胞復(fù)合物,作為細(xì)胞組。術(shù)后4、8、12、24、36和48周取材,行大體、組織學(xué)觀察以及組織學(xué)評分。結(jié)果術(shù)后動物均存活。術(shù)后4周,實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組缺損內(nèi)被半透明組織填充,觸之柔軟,表面較光滑,軟骨細(xì)胞周圍基質(zhì)異染弱,新生軟骨厚度較正常軟骨厚;空白對照組和單純載體組未見明顯組織形成。8周,實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組內(nèi)新生組織呈白色,半透明,質(zhì)較韌,表面平整,與周圍正常軟骨界限模糊;新生軟骨細(xì)胞分布均一,但仍較正常軟骨厚,PLGA已大部分降解,僅遺留少量顆粒;單純載體組和空白對照組缺損明顯,底部形成少量白色膜狀組織。12、24周,實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組缺損內(nèi)完全充填白色半透明新生軟骨組織,質(zhì)韌,表面平整,與正常軟骨界限消失,厚度接近正常軟骨,與正常軟骨連接良好,表面細(xì)胞平行排列,深層有縱向排列的傾向,呈團(tuán)狀,陷窩形成,但有別于正常軟骨細(xì)胞;單純載體組和空白對照組缺損邊緣及底部形成少量軟骨細(xì)胞,大部分為纖維組織。 36、48周,實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組新生軟骨組織色稍發(fā)白,表面連續(xù),欠平整,與正常軟骨界限消失,未見滑膜增生; 新生軟骨厚度較正常軟骨薄,軟骨細(xì)胞周圍基質(zhì)異染較弱;單純載體組及空白對照組缺損仍存在,但較以前縮小,基底形成纖維組織,髁部可見部分軟骨面不平整、剝脫,部分軟骨下骨外露,滑膜增厚。組織學(xué)評分,實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組術(shù)后12、24周分別與4、 8和48周比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);各時間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組、細(xì)胞組分別與單純載體組和空白對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),實(shí)驗(yàn)組與細(xì)胞組在各時間點(diǎn)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 PLGA-rhBMP-2復(fù)合物在降解過程中釋放出rhBMP-2,rhBMP-2作用于缺損局部的骨髓基質(zhì)細(xì)胞,誘導(dǎo)其向軟骨細(xì)胞分化,從而修復(fù)軟骨缺損;此方法簡便易行,有實(shí)用價值,有望成為治療軟骨缺損的一種新方法。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:20 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 重組人骨形成蛋白2與骨誘導(dǎo)劑對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化的影響

    目的 觀察重組人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP-2)與骨誘導(dǎo)劑對SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 (mesenchymalstem cells, MSCs)的增殖與成骨作用。 方法 體外培養(yǎng)大鼠MSCs,分為實(shí)驗(yàn)組與對照組。對照組:不加rhBMP-2與骨誘導(dǎo)劑。實(shí)驗(yàn)組:骨誘導(dǎo)劑單獨(dú)作用于SD大鼠MSCs(A組);rhBMP-2分別以濃度為10(B組)、50 (C組)、100 (D組)、200 μg/L (E組)單獨(dú)作用于SD大鼠MSCs;rhBMP-2分別以濃度為10 (F組)、50 (G組)、100 (H組)、200 μg/L(I組)聯(lián)合骨誘導(dǎo)劑作用于SD大鼠MSCs。測定第3、6、9、12天的增殖狀況(MTT法)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨鈣素(osteocalcin,OC)水平。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡觀察SD大鼠MSCs原代培養(yǎng)時,細(xì)胞接種12 h后即可貼壁;48 h細(xì)胞成梭形,形似成纖維細(xì)胞;4 d時細(xì)胞為多角形、紡錘形;6 d時,成纖維細(xì)胞散在分布,少量呈集落樣生長,為漩渦狀、放射狀排列;10 d左右,細(xì)胞基本鋪滿瓶底,融合成片。傳代細(xì)胞5~7 d即可長滿瓶底。各時間點(diǎn)A~I組均能顯著促進(jìn)MSCs成骨活性(ALP和OC)的表達(dá)。B~E組同時具有促進(jìn)MSCs 增殖作用,并呈濃度依賴性;F~I組增殖及ALP、OC含量均高于A~E組,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論 rhBMP-2與骨誘導(dǎo)劑聯(lián)合作用可在促進(jìn)MSCs增殖的同時提高其成骨活性。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:22 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為皮膚附屬器細(xì)胞的初步實(shí)驗(yàn)研究

    目的 探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)分化為創(chuàng)面皮膚附屬器細(xì)胞的可能性,及其參與創(chuàng)面修復(fù)的可能機(jī)制。方法 無菌條件下取Wistar大鼠股骨骨髓細(xì)胞,密度梯度離心分離、純化MSCs,體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,用BrdU標(biāo)記細(xì)胞。另于同種雄性Wistar大鼠背部正中,制備1 cm×1 cm全厚皮膚缺損創(chuàng)面模型,將BrdU標(biāo)記的1×106/ml MSCs從陰莖靜脈輸注,術(shù)后第3天與第7天切取創(chuàng)面組織,行BrdU免疫組織化學(xué)單染色,以及BrdU和廣譜角蛋白免疫組織化學(xué)雙染色。結(jié)果 BrdU陽性細(xì)胞出現(xiàn)在創(chuàng)面皮下組織、皮脂腺、毛囊和骨髓腔中。免疫組織化學(xué)雙染色結(jié)果顯示,皮脂腺和毛囊有BrdU陽性細(xì)胞,同時表達(dá)廣譜角蛋白。結(jié)論 創(chuàng)面愈合過程中, MSCs歸巢并參與創(chuàng)面修復(fù);在實(shí)驗(yàn)性全身皮膚缺損創(chuàng)面微環(huán)境下, MSCs可分化為皮膚附屬器細(xì)胞。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:26 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 脂肪組織來源的基質(zhì)細(xì)胞研究進(jìn)展

    目的 介紹近期國內(nèi)外脂肪組織來源的基質(zhì)細(xì)胞研究進(jìn)展。方法 廣泛查閱近期有關(guān)文獻(xiàn),歸納分析此種細(xì)胞的培養(yǎng)和分化的研究狀況。結(jié)果 脂肪組織中存在一種多能的基質(zhì)細(xì)胞,體外培養(yǎng)條件下這種細(xì)胞生長狀態(tài)類似成纖維細(xì)胞,可長期增殖,細(xì)胞絕大多數(shù)為中胚層來源,混有少量的血管周細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞,在一定的誘導(dǎo)條件下能分化為脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、成肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞。結(jié)論 脂肪組織來源的基質(zhì)細(xì)胞可替代間充質(zhì)干細(xì)胞作為組織工程的另一種干細(xì)胞。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:33 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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