目的 觀察重組人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP-2)與骨誘導劑對SD大鼠骨髓間充質干細胞 (mesenchymalstem cells, MSCs)的增殖與成骨作用。 方法 體外培養(yǎng)大鼠MSCs,分為實驗組與對照組。對照組:不加rhBMP-2與骨誘導劑。實驗組:骨誘導劑單獨作用于SD大鼠MSCs(A組);rhBMP-2分別以濃度為10(B組)、50 (C組)、100 (D組)、200 μg/L (E組)單獨作用于SD大鼠MSCs;rhBMP-2分別以濃度為10 (F組)、50 (G組)、100 (H組)、200 μg/L(I組)聯(lián)合骨誘導劑作用于SD大鼠MSCs。測定第3、6、9、12天的增殖狀況(MTT法)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨鈣素(osteocalcin,OC)水平。 結果 倒置相差顯微鏡觀察SD大鼠MSCs原代培養(yǎng)時,細胞接種12 h后即可貼壁;48 h細胞成梭形,形似成纖維細胞;4 d時細胞為多角形、紡錘形;6 d時,成纖維細胞散在分布,少量呈集落樣生長,為漩渦狀、放射狀排列;10 d左右,細胞基本鋪滿瓶底,融合成片。傳代細胞5~7 d即可長滿瓶底。各時間點A~I組均能顯著促進MSCs成骨活性(ALP和OC)的表達。B~E組同時具有促進MSCs 增殖作用,并呈濃度依賴性;F~I組增殖及ALP、OC含量均高于A~E組,比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論 rhBMP-2與骨誘導劑聯(lián)合作用可在促進MSCs增殖的同時提高其成骨活性。
引用本文: 楊小榮,方煌,羅永湘. 重組人骨形成蛋白2與骨誘導劑對大鼠骨髓間充質干細胞增殖分化的影響. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(2): 140-144. doi: 復制