【摘 要】 目的 測量三足負(fù)重酒精滅活性股骨頭壞死犬模型的股骨頭松質(zhì)骨的礦物質(zhì)密度和骨小梁的三維結(jié)構(gòu)變化,初步探討局部注射酒精和負(fù)重對股骨頭力學(xué)強(qiáng)度的影響。 方法 取健康成年Beagle 犬24 只,體重18 ~ 23 kg。隨機(jī)取12 只犬建立三足負(fù)重犬動物模型,余12 只不作任何處理,為四足犬。所有動物隨機(jī)取一側(cè)后肢為實驗側(cè),于股骨頭內(nèi)局部注射無水酒精,建立股骨頭壞死犬動物模型;對側(cè)為對照側(cè),股骨頭內(nèi)注入等量生理鹽水。將三足和四足犬對照側(cè)作為對照組,三足犬實驗側(cè)為三足犬組,四足犬實驗側(cè)作為四足犬組。于髖部注射酒精后1、3、6 及12 周處死動物,取雙后肢股骨頭行Micro-CT 掃描。以股骨頭內(nèi)鉆孔針道為中心,自針道邊緣由中心向外各選取相互連接的直徑為1 mm 的圓柱形區(qū)域,依次命名為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ區(qū)。對各區(qū)的骨礦密度(bone mineral density,BMD)、骨體積分?jǐn)?shù)(bonevolume fraction,BVF)、骨礦容量(bone mineral content,BMC)、骨表面積與骨骼體積比(bone surface to bone volume ratio,BS/BV)、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(structure model index,SMI)、骨小梁厚度(trabecular plate thickness,Tb.Th)、骨小梁數(shù)目(trabecular plate number,Tb.N)、骨小梁間隙(trabecular spacing,Tb.Sp)進(jìn)行測量和比較;對股骨頭軟骨下骨區(qū)行三維重建,觀察其三維結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果 注射酒精后1 周各組各項參數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。3 周,三足犬和四足犬組Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ區(qū)的BMC、BMD、BVF 及BS/BV 自針道向外逐漸遞增,各區(qū)間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。6 周,三足犬組和四足犬組Ⅰ、Ⅱ區(qū)的BMC、BMD、BVF 和Tb.N 較Ⅲ區(qū)明顯下降,Tb.Sp 較Ⅲ區(qū)增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。12 周,對照組、三足犬組和四足犬組3 區(qū)的各項參數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。注射酒精后3 周,BMC、BMD 和BVF 在三足犬組和四足犬組開始下降,與1 周比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05);6 周,下降最明顯,BMC 與1、3 周比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05),BMD 與BVF 差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05),12 周與6 周比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。三足犬組股骨頭內(nèi)注射酒精后,隨時間延長,骨小梁結(jié)構(gòu)逐漸變細(xì)、密度降低、間隙增寬、12 周時可觀察到局部骨小梁的連續(xù)性破壞和骨小梁的斷裂。 結(jié)論 局部注射酒精致犬股骨頭壞死后,壞死骨質(zhì)的吸收將導(dǎo)致骨小梁力學(xué)強(qiáng)度的下降。持續(xù)的生物應(yīng)力將阻礙壞死后的修復(fù)反應(yīng),使壞死骨小梁的力學(xué)強(qiáng)度更為降低,是致壞死股骨頭塌陷的重要原因。
目的分析骨質(zhì)疏松髖部骨折區(qū)骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)與影像學(xué)參數(shù)之間的相關(guān)性,為影像學(xué)間接評估髖部松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)變化提供依據(jù)。 方法以2012年6月-2013年1月收治的16例低能量創(chuàng)傷致股骨頸骨折并行人工髖關(guān)節(jié)置換的老年患者作為試驗組;以同期5例骨盆骨折青年患者作為對照組。對照組行髖部薄層CT掃描,Mimics10.01軟件分析股骨近端松質(zhì)骨體積/髓腔體積(cancellous bone volume/marrow cavity volume,CV/MV);試驗組行健側(cè)髖部薄層CT掃描及骨密度檢測,并于置換術(shù)中切取股骨頸張力側(cè)松質(zhì)骨,行Micro-CT掃描分析微結(jié)構(gòu)參數(shù),包括骨體積分?jǐn)?shù)(bone volume fraction,BV/TV)、骨小梁數(shù)量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁距離(trabecular spacing,Tb.Sp)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、連接密度(connect density,Conn.D)、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(structure model index,SMI)。分析影像學(xué)參數(shù)及骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)間的相關(guān)性。 結(jié)果試驗組骨密度值為0.491~0.698 g/ cm2,平均0.601 g/ cm2;根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的骨質(zhì)疏松診斷標(biāo)準(zhǔn),其中10例為骨質(zhì)疏松,6例為骨量減少。試驗組髖部CV/MV為0.670 1±0.102 0,顯著低于對照組的 0.885 0±0.089 1(t=—4.567,P=0.000)。試驗組CV/MV與骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)BV/TV、Tb.Th、SMI相關(guān)(P<0.05),與Tb.N、Tb.Sp、Conn.D不相關(guān)(P>0.05);BV/TV與Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp、SMI相關(guān)(P<0.05),與Conn. D不相關(guān)(P=0.075);骨密度值與各骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)之間均無相關(guān)性(P>0.05)。 結(jié)論骨質(zhì)疏松患者股骨近端CT參數(shù)CV/MV明顯降低,并且與松質(zhì)骨的BV/TV、Tb.Th、SMI存在相關(guān)性,該指標(biāo)能一定程度上反映骨微結(jié)構(gòu)變化;而股骨頸骨密度與骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)間無相關(guān)性。
目的介紹一種基于兔尺橈骨解剖學(xué)測量的骨缺損模型建立方法,為組織工程研究提供標(biāo)準(zhǔn)化模型參考。 方法取健康4月齡新西蘭大白兔15只,對其尺橈骨進(jìn)行解剖及micro-CT測量分析。另取健康4月齡新西蘭大白兔30只,隨機(jī)分為A、B、C 3組,每組10只。3組均通過手術(shù)造成雙側(cè)橈骨缺損,A組選擇橈側(cè)腕伸肌與指伸肌間隙入路,用線鋸造模,完全切除骨膜和骨間膜;B、C組基于兔尺橈骨解剖學(xué)測量分析結(jié)果,選擇橈側(cè)腕伸肌與指深屈肌間隙入路,用電鋸造模,B組完全切除骨膜和骨間膜,C組切除骨膜、保留骨間膜。分別于術(shù)后即刻及15周行大體觀察、X線片檢查、micro-CT及骨礦含量(bone mineral content,BMC)、骨密度(bone mineraldensity,BMD)定量分析;行HE染色和Masson染色觀察骨缺損區(qū)成骨情況。 結(jié)果A組實驗動物發(fā)生術(shù)中血管損傷1只、肌腱損傷2只,術(shù)后血腫及感染各1只;C組發(fā)生術(shù)后感染1只;B組無并發(fā)癥發(fā)生;A組并發(fā)癥發(fā)生率(50%)顯著高于B(0%)、C組(10%)(P<0.05)。影像學(xué)檢查示A、B組骨缺損在15周時仍未完全修復(fù),C組已有連續(xù)性骨痂形成。骨組織定量分析顯示,術(shù)后15周A、B、C組BMC和BMD組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。術(shù)后15周HE染色和Masson染色示,A組有新生骨形成,但結(jié)構(gòu)紊亂,骨質(zhì)硬化;B、C組可見有新生骨形成,骨細(xì)胞中間仍有成軟骨細(xì)胞存在。 結(jié)論選擇橈側(cè)腕伸肌與指深屈肌間隙入路制備兔橈骨缺損模型,顯露明顯,出血量少,有效降低了手術(shù)并發(fā)癥,為大段骨缺損研究提供了一種理想的造模方法;骨間膜在橈骨大段骨缺損修復(fù)過程中有一定作用,具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
目的比較鎂合金與聚乳酸-羥基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]在體內(nèi)降解情況,同時采用Micro-CT深入研究鎂合金體內(nèi)降解規(guī)律。 方法取3月齡雄性新西蘭大白兔40只,分別于右側(cè)和左側(cè)股骨髁鉆孔植入40個表面微弧氧化處理的AZ31鎂合金棒(鎂棒)和40個PLGA棒。術(shù)后4、8、12、16周各處死10只動物,取出雙側(cè)股骨髁,采用Micro-CT掃描及生成數(shù)據(jù)定量評價植入物降解情況;然后取出植入物清洗、烘干后稱重,與術(shù)前重量差值作為植入物降解量;HE染色觀察局部炎性反應(yīng)情況。并將鎂合金的失重情況與Micro-CT的評價結(jié)果進(jìn)行對比。 結(jié)果Micro-CT掃描示,PLGA棒不顯影。術(shù)后4周鎂棒幾乎無降解痕跡,有少量腐蝕點;術(shù)后8周在4周原有腐蝕點基礎(chǔ)上逐步擴(kuò)大,縱軸與橫截面交界邊緣變得模糊;至術(shù)后16周鎂棒表面腐蝕面積更大,邊緣已不連續(xù)。Micro-CT定量分析示:術(shù)后4、8周鎂棒體積分?jǐn)?shù)下降緩慢;術(shù)后12、16周較術(shù)后4、8周降低明顯,16周最低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05)。術(shù)后隨時間延長鎂礦物密度持續(xù)降低,12~16周降低速度最快,第8周后各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05);而鎂CT圖像密度隨術(shù)后時間延長變化很?。≒>0.05)。術(shù)后隨時間延長鎂棒表面積與體積比持續(xù)增加,術(shù)后12、16周明顯高于4、8周,且16周高于12周(P < 0.05)。術(shù)后隨時間延長,鎂棒表面腐蝕點越來越多,導(dǎo)致橫截面半徑減小,即平均骨小梁厚度逐漸降低,8周后各時間點間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05)。失重法檢測示:術(shù)后隨時間延長,兩種材料降解量均逐漸增加(P < 0.05);術(shù)后8、12周,鎂棒降解量均顯著低于PLGA棒(P < 0.05),但術(shù)后16周時鎂棒降解量已超過PLGA棒。將各時間點鎂棒質(zhì)量分?jǐn)?shù)與Micro-CT方法得出的體積分?jǐn)?shù)進(jìn)行比較,結(jié)果顯示兩個指標(biāo)的變化趨勢相近,但各時間點鎂棒質(zhì)量分?jǐn)?shù)均低于體積分?jǐn)?shù),且在第8、12、16周差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05)。HE染色示,術(shù)后4周鎂棒周圍可見輕度炎性反應(yīng),但隨時間延長炎性反應(yīng)逐漸減輕,至16周時已未見炎性反應(yīng);而PLGA周圍一直無炎性反應(yīng)。 結(jié)論采用Micro-CT檢測鎂合金降解情況具有無創(chuàng)、可活體檢測、定量、精確的優(yōu)勢。鎂合金和PLGA在體內(nèi)均隨時間推移而逐步腐蝕,經(jīng)歷先緩慢后加速的持續(xù)降解過程;PLGA在體內(nèi)降解則更早、更快,至16周時鎂合金降解量已超過PLGA,鎂合金密度在降解過程中無明顯變化。鎂合金在金屬與原骨之間產(chǎn)生新生骨橋欠充分,仍缺乏足夠的無縫連接能力。
目的 觀察帶蒂筋膜瓣包裹國產(chǎn)多孔鉭修復(fù)兔橈骨節(jié)段性骨缺損的成骨效果。 方法 選取 6~8 月齡成年新西蘭大白兔 60 只,雌雄不限,體質(zhì)量 2.5~3.0 kg;制備兔右側(cè)橈骨中段連同骨膜 1.5 cm 骨缺損模型。實驗分為 2 組,每組 30 只。實驗組于兔右側(cè)前肢切取皮下帶蒂筋膜瓣(30 mm×20 mm)包裹多孔鉭棒植入橈骨缺損處,對照組于右側(cè)橈骨骨缺損處植入單純多孔鉭棒。于術(shù)后當(dāng)日及 4、8、16 周行 X 線片觀察,術(shù)后 4、8、16 周取材切片行 HE 染色及甲苯胺藍(lán)染色觀察,術(shù)后 16 周行三點彎曲生物力學(xué)測定標(biāo)本最大載荷力及抗彎曲強(qiáng)度,并行 Micro-CT 檢測及定量分析骨缺損處新生骨體積分?jǐn)?shù)(bone volume fraction,BV/TV),比較兩組多孔鉭棒體內(nèi)骨缺損修復(fù)能力。 結(jié)果 術(shù)后切口均Ⅰ期愈合,無切口感染發(fā)生。術(shù)后 4、8、16 周 X 線片可見兩組植入物與宿主骨界面結(jié)合越來越牢固,無明顯位移,骨折線逐漸消失。HE 染色及甲苯胺藍(lán)染色示兩組鉭-骨界面新生骨組織數(shù)量逐漸增多,并沿多孔鉭孔隙長入材料內(nèi)部,骨組織由幼稚到成熟。術(shù)后 16 周,兩組三點彎曲試驗測定結(jié)果示,實驗組最大載荷力和抗彎曲強(qiáng)度分別為(96.54±7.21)N、(91.26±1.76)MPa,均明顯大于對照組[分別為(82.65±5.65)N、(78.53±1.16)MPa](t=3.715,P=0.004;t=14.801,P=0.000)。Micro-CT 掃描觀察兩組植入物界面、表面均有大量骨組織覆蓋,內(nèi)部不同程度新生骨組織填充;實驗組新生骨 BV/TV 為 32.63%±3.56%,顯著高于對照組的 25.07%±4.34%(t=3.299,P=0.008)。 結(jié)論 帶蒂筋膜瓣包裹國產(chǎn)多孔鉭可增加局部血運,增強(qiáng)材料骨傳導(dǎo)能力,促進(jìn)節(jié)段性骨缺損修復(fù)。
目的觀察激素性和酒精性股骨頭壞死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)患者骨標(biāo)本壞死區(qū)域的病理和顯微結(jié)構(gòu)特點。方法收集 2015 年 8 月—2016 年 4 月因 ONFH 行人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)的股骨頭標(biāo)本 30 個,其中男 22 例,女 8 例;酒精性 15 例,激素性 15 例;兩組國際骨循環(huán)協(xié)會(ARCO)分期構(gòu)成比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Z=2.143,P=0.143)。取激素性與酒精性 ONFH 患者骨標(biāo)本不同區(qū)域(壞死區(qū)、硬化區(qū)、正常區(qū))骨組織,行大體觀察、HE 染色并計算空骨陷窩率。將完整股骨頭標(biāo)本行 Micro-CT 掃描,并進(jìn)行骨微結(jié)構(gòu)定量分析以下參數(shù):骨小梁相對體積(bone volume to total volume,BV/TV)、骨表面積與骨骼體積比(bone surface area to bone volume ratio,BS/BV)、骨礦密度(bone mineral density,BMD)、骨礦容量(bone mineral content,BMC)、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(structure model index,SMI)、骨小梁數(shù)目(trabecular plate number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular plate thickness,Tb.Th)、骨小梁間隙(trabecular spacing,Tb.Sp)。結(jié)果大體觀察示激素性和酒精性 ONFH 均有骨小梁連續(xù)性中斷,骨小梁吸收區(qū)域有囊變被肉芽組織取代,激素性 ONFH 肉芽組織內(nèi)有血管新生的痕跡,酒精性 ONFH 肉芽組織內(nèi)血管新生痕跡不明顯。HE 染色示激素性和酒精性 ONFH 壞死區(qū)均有骨質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂、骨髓壞死、骨陷窩空虛,其中激素性 ONFH 骨小梁結(jié)構(gòu)和連續(xù)性破壞更嚴(yán)重,酒精性 ONFH 骨小梁更粗,連續(xù)性較激素性 ONFH 好。激素性 ONFH 壞死區(qū)的空骨陷窩率明顯高于酒精性 ONFH(P<0.05),但兩種 ONFH 硬化區(qū)和正常區(qū)空骨陷窩率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。激素性與酒精性 ONFH 壞死區(qū)與硬化區(qū)之間區(qū)域在 Micro-CT 圖像中均是低密度區(qū),但前者形態(tài)不規(guī)則,對應(yīng)部位大體標(biāo)本可見富含血運的肉芽組織形成,后者對應(yīng)部位大體標(biāo)本見無血運的纖維肉芽組織形成。骨微結(jié)構(gòu)定量分析顯示,激素性 ONFH 壞死區(qū)和硬化區(qū) BV/TV、BMD、BMC、Tb.N、Tb.Th 明顯低于酒精性 ONFH,BS/BV、SMI、Tb.Sp 顯著高于酒精性 ONFH,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);兩種 ONFH 正常區(qū)上述各指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論激素性和酒精性 ONFH 標(biāo)本壞死區(qū)的骨小梁連續(xù)性均破壞。但兩種 ONFH 有不同的壞死表現(xiàn)形式,激素性 ONFH 以多發(fā)灶性溶骨性骨質(zhì)破壞為特點,酒精性 ONFH 是以凝固性骨質(zhì)壞死為特點。
目的探討改良型富血小板纖維蛋白(advanced-platelet-rich fibrin,A-PRF)與 β-磷酸三鈣(β-tricalcium phosphate,β-TCP)復(fù)合物誘導(dǎo)骨再生的效果。 方法雌性新西蘭兔 32 只,取耳中動脈血制備 A-PRF;實驗動物隨機(jī)分為 6 組,制備雙后肢股骨髁骨缺損模型 (直徑 6 mm,深 8 mm)后,A、B、C、D、E 組(n=6)分別采用不同比例(1∶1、2∶1、4∶1、1∶2、1∶4,V/V)APRF 與 β-TCP 復(fù)合物修復(fù),F(xiàn) 組(n=2)不作處理。術(shù)后 8、12 周行大體觀察、X 線片檢查、Micro-CT 觀測,其中 A~E 組于 Micro-CT 圖像測量新生骨相關(guān)指標(biāo),包括骨體積/組織體積(bone volume/ total volume,BV/TV)、骨小梁數(shù)目(trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁間隙(trabecular spacing,Tb.Sp);同時 A~E 組標(biāo)本行生物力學(xué)測試,測量壓縮強(qiáng)度和彈性模量。 結(jié)果大體及 X 線片觀察示,各組術(shù)后 12 周表面骨質(zhì)形成均優(yōu)于 8 周;同時間點 B 組骨缺損修復(fù)以及新骨形成情況均優(yōu)于其他組。Micro-CT 測量示,術(shù)后 8、12 周時,B 組新生骨小梁最多,且排列緊密,其中 BV/TV、Tb.N、Tb.Sp 優(yōu)于其他組(P<0.05)。組內(nèi)術(shù)后 12 周B 組 Tb.N 及 Tb.Th, C 組 BV/TV 及 Tb.Sp、D 組 Tb.Sp 與 8 周比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。生物力學(xué)測試示,術(shù)后 8、12 周,B 組壓縮強(qiáng)度和彈性模量最大,C 組最小,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);各組 12 周時壓縮強(qiáng)度和彈性模量均大于 8 周,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論A-PRF 與 β-TCP 復(fù)合物可修復(fù)兔股骨髁骨缺損,并且以 2∶1 (V/V)比例復(fù)合成骨效果最佳。
目的探討淫羊藿苷對激素誘導(dǎo)的兔早期激素性股骨頭壞死干預(yù)效果。方法50 只成年新西蘭兔(體質(zhì)量 2.5~3.0 kg)隨機(jī)分為對照組(n=10)、模型組(n=20)及實驗組(n=20)。模型組和實驗組采用脂多糖聯(lián)合甲潑尼龍注射制備早期激素性股骨頭壞死模型;實驗組首次注射甲潑尼龍開始每日灌服淫羊藿苷藥液 1 次,對照組及模型組灌服等量生理鹽水,連續(xù) 6 周。于 6 周后取左側(cè)股骨頭行大體觀察;Micro-CT 掃描觀察骨小梁微結(jié)構(gòu),測量骨小梁相對體積(bone volume to total volume,BV/TV)、骨小梁數(shù)量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Tn)及骨小梁分離度(trabecular separation,Tb.Sp),并構(gòu)建三維圖像觀察;HE 染色觀察骨小梁結(jié)構(gòu)、骨細(xì)胞及骨髓脂肪細(xì)胞形態(tài)變化,按照病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)檢測股骨頭壞死模型造模是否成功,計算空骨陷窩率。結(jié)果實驗期間共 7 只動物死亡,最終對照組 9 只、模型組 16 只、實驗組 18 只納入研究。大體及 Micro-CT 掃描、三維重建顯示,與對照組相比,模型組股骨頭塌陷明顯,骨小梁斷裂、排列紊亂稀疏;實驗組股骨頭表面皺褶,塌陷不明顯,骨小梁結(jié)構(gòu)輕度退變。與對照組相比,模型組和實驗組 Tb.N、Tb.Tn、BV/TV 下降、Tb.Sp 升高;與模型組相比,實驗組 Tb.N、Tb.Tn、BV/TV 升高、Tb.Sp 降低;組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。HE 染色示模型組骨小梁中骨細(xì)胞減少,空骨陷窩較多,骨小梁間脂肪細(xì)胞堆積,部分呈囊狀融合;實驗組骨小梁形態(tài)較模型組完整,骨細(xì)胞壞死及脂肪細(xì)胞肥大不明顯。按照股骨頭壞死病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn),對照組無骨壞死發(fā)生,模型組骨壞死發(fā)生率為 81.3%(13/16),實驗組為 66.7%(12/18),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.448)。模型組和實驗組發(fā)生壞死的股骨頭標(biāo)本其空骨陷窩率分別為 33.1%±1.4% 及 18.9%±0.8%,均高于對照組 12.7%±1.5%,且模型組明顯高于實驗組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論淫羊藿苷對激素誘導(dǎo)的兔早期激素性股骨頭壞死具有保護(hù)作用,可以降低骨細(xì)胞凋亡,改善骨微結(jié)構(gòu),延緩骨壞死發(fā)生。
目的通過 Micro-CT 及三維重建技術(shù)觀察天然水蛭素對大鼠缺血皮瓣血管生成的影響。方法選取 32 只成年 SD 大鼠,在其背部制備一8.0 cm×1.8 cm 大小的缺血皮瓣模型,然后隨機(jī)分為水蛭素組和對照組(n=16)。水蛭素組術(shù)后即刻和術(shù)后 3 d 內(nèi)每天皮下注射天然水蛭素 0.3 mL(含天然水蛭素 6 ATU),對照組皮下注射等量生理鹽水。術(shù)后 6 d,大體觀察皮瓣成活情況并測定皮瓣成活率,取材行 HE 染色觀察皮瓣組織學(xué)變化,行 Micro-CT 三維重建觀察并測量皮瓣血管容積、長度及數(shù)量。結(jié)果術(shù)后兩組大鼠均存活至實驗完成,無感染發(fā)生。術(shù)后 6 d,兩組皮瓣遠(yuǎn)端均發(fā)生不同程度壞死,水蛭素組皮瓣成活率為 72.11%±8.97%,顯著高于對照組的58.94%±4.02%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.280,P=0.008)。組織學(xué)觀察示水蛭素組較對照組組織結(jié)構(gòu)層次更清楚,有較多微血管生成,炎癥反應(yīng)及炎癥細(xì)胞浸潤更輕。Micro-CT 三維重建示水蛭素組皮瓣血管更多、更加密集;血管容積、長度及數(shù)量均顯著大于對照組(P<0.05)。結(jié)論天然水蛭素可減輕組織炎癥反應(yīng)、促進(jìn)缺血皮瓣血管的新生與再通,從而提高皮瓣成活率。
目的 通過分析中日友好醫(yī)院(CJFH)分型L2及L3型股骨頭壞死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)標(biāo)本的外側(cè)柱、中間柱、內(nèi)側(cè)柱在骨小梁等骨微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞凋亡表型上的異同,對ONFH“三柱結(jié)構(gòu)”進(jìn)行量化,并為股骨頸基底部旋轉(zhuǎn)截骨術(shù)治療ONFH提供研究支持。 方法以2020年4月—2021年2月16例(16髖)CJFH分型L2型及L3型ONFH患者行人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后產(chǎn)生的廢棄股骨頭標(biāo)本為研究對象。首先使用Micro-CT三維分割股骨頭“三柱結(jié)構(gòu)”,分析外側(cè)柱、中間柱、內(nèi)側(cè)柱結(jié)構(gòu)中骨體積分?jǐn)?shù)(bone volume to total volume,BV/TV)、骨表面積骨體積比(bone surface area to bone volume ratio,BS/BV)、骨小梁分離度(trabecular spacing/separation,Tb.Sp)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)和骨小梁數(shù)量(trabecular number,Tb.N)等指標(biāo),比較三柱間骨量和骨小梁結(jié)構(gòu)相關(guān)參數(shù)的異同。然后用擺鋸切割標(biāo)本制作石蠟切片,行HE染色和細(xì)胞凋亡相關(guān)因子B淋巴細(xì)胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)免疫組織化學(xué)染色,通過比較空骨陷窩率、陽性細(xì)胞率評估CJFH分型L2型及L3型ONFH標(biāo)本三柱間細(xì)胞凋亡表型的異同。 結(jié)果 CJFH分型L2型ONFH股骨頭,三柱間BV/TV、Tb.Th和Tb.N比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),內(nèi)側(cè)柱最大,外側(cè)柱最??;外側(cè)柱BS/BV和Tb.Sp顯著大于內(nèi)側(cè)柱和中間柱(P<0.05),內(nèi)側(cè)柱和中間柱比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。L3型ONFH股骨頭三柱間各骨參數(shù)指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。CJFH分型L2型和L3型ONFH股骨頭三柱間空骨陷窩率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。免疫組織化學(xué)染色出現(xiàn)大量組織切片脫片,未脫片的切片僅見少量非特異性染色,無法進(jìn)行陽性細(xì)胞率計算。 結(jié)論 CJFH分型L2型ONFH的中間柱和內(nèi)側(cè)柱較外側(cè)柱擁有更好的骨小梁結(jié)構(gòu),L3型ONFH三柱間骨小梁結(jié)構(gòu)無顯著差異。