目的 探討瘢痕疙瘩家系標(biāo)本中Fas基因 (外顯子7~9)有無突變以及Fas基因突變?cè)隈:鄹泶裥纬芍械囊饬x。方法 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來自南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院整形外科2005年收集的A、B兩個(gè)瘢痕疙瘩家系。采用PCR及基因測(cè)序技術(shù),分別以A家系2例男性患者的瘢痕疙瘩組織為研究對(duì)象, 以其周圍正常皮膚及外周靜脈血作為自身對(duì)照,其配偶的外周靜脈血作為正常對(duì)照,并以B家系2例患者(母親與兒子)的外周靜脈血作為不同家系之間的對(duì)照,共檢測(cè)10份標(biāo)本中Fas基因外顯子7~9基因序列。結(jié)果 10份瘢痕疙瘩家系標(biāo)本Fas基因的7、8外顯子均未發(fā)生突變,2例瘢痕疙瘩組織標(biāo)本均在外顯子9編碼區(qū)的11 bp和53 bp兩個(gè)位點(diǎn)上存在單個(gè)堿基基因突變或多態(tài)性改變。結(jié)論 瘢痕疙瘩Fas基因死亡域外顯子9區(qū)段的基因結(jié)構(gòu)異常,極有可能與Fas蛋白的功能改變有關(guān),從而導(dǎo)致局部瘢痕疙瘩形成。
目的 應(yīng)用成功制備的攜帶人Fas基因的兩種重組腺病毒,感染瘢痕疙瘩(keroid,K)成纖維細(xì)胞(fibroblasts, FB),使其穩(wěn)定高效地表達(dá)以替換原有無功能的Fas蛋白,并恢復(fù)正常的重建后Fas信號(hào)傳導(dǎo)通道。 方法 腺病毒感染KFB后,檢測(cè)及比較兩種腺病毒轉(zhuǎn)染前后,KFB內(nèi)Fas蛋白的表達(dá)變化、蛋白功能以及細(xì)胞增殖凋亡狀況。 結(jié)果 腺病毒感染后的KFB均能穩(wěn)定提高Fas蛋白的表達(dá),并且在Fas單克隆抗體的誘導(dǎo)下可以發(fā)生明顯的細(xì)胞凋亡。 結(jié)論 ①構(gòu)建的兩種重組腺病毒AdFas在體外實(shí)驗(yàn)中能有效地提高KFB蛋白的表達(dá),并可以重建原來阻斷的死亡信號(hào)傳導(dǎo)通道;②細(xì)菌內(nèi)重組腺病毒體外治療效果更佳;③再次估證了Fas基因突變與K之間的聯(lián)系,為K基因治療展示了一條新途徑。
目的 探討103鈀(Pd)放射性支架釋放的γ射線對(duì)Fas基因表達(dá)的影響以及與膽管癌細(xì)胞凋亡的關(guān)系及意義方法 建立人膽管癌裸鼠移植瘤模型; 將建模成功的裸鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組置入37 MBq 103Pd膽道放射性支架,對(duì)照組置入普通金屬支架; 支架置入后10 d計(jì)算腫瘤體積; 應(yīng)用TUNEL法檢測(cè)膽管癌細(xì)胞凋亡的情況; 免疫組化染色方法檢測(cè)膽管癌細(xì)胞中Fas基因表達(dá)的情況。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組腫瘤體積較對(duì)照組增長(zhǎng)明顯緩慢(Plt;0.05); 膽管癌細(xì)胞的Fas基因表達(dá)陽性率較對(duì)照組明顯增高(Plt;0.05),且膽管癌細(xì)胞出現(xiàn)明顯凋亡,細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組(Plt;0.01)。結(jié)論 103Pd放射性支架可誘導(dǎo)人膽管癌裸鼠移植瘤中膽管癌細(xì)胞凋亡,明顯抑制膽管癌細(xì)胞生長(zhǎng),其可能通過增強(qiáng)Fas基因表達(dá)促進(jìn)膽管癌細(xì)胞凋亡,可能是103Pd放射性支架治療膽管癌的重要機(jī)理之一,進(jìn)一步為臨床應(yīng)用103Pd放射性支架治療膽管癌提供了理論依據(jù)。
目的 探討103鈀(103Pd)放射性支架釋放的γ射線對(duì)Fas表達(dá)的影響以及與膽管癌細(xì)胞凋亡的關(guān)系及意義。方法 培養(yǎng)瓶中膽管癌細(xì)胞消化后形成細(xì)胞懸液,采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)細(xì)胞,按1×105/ml的濃度分裝到2 ml塑料凍存管中。分別設(shè)置普通支架組及103Pd支架組,應(yīng)用TUNEL法和免疫組化染色方法檢測(cè)γ射線誘導(dǎo)膽管癌細(xì)胞凋亡的情況和Fas表達(dá)的情況。結(jié)果 103Pd支架組膽管癌細(xì)胞的Fas表達(dá)較普通支架組明顯增高(P<0.05),且膽管癌細(xì)胞出現(xiàn)明顯細(xì)胞凋亡,凋亡細(xì)胞數(shù)明顯高于普通支架組(P<0.01)。結(jié)論 Fas表達(dá)水平與膽管癌細(xì)胞凋亡的發(fā)生有關(guān),103Pd放射性支架可能通過增強(qiáng)Fas表達(dá),促進(jìn)膽管癌細(xì)胞凋亡,從而為臨床應(yīng)用103Pd放射性支架治療膽管癌提供理論依據(jù)。