目的 研究新生豚鼠心肌缺血 -再灌注時興奮性鳥核苷耦聯(lián)蛋白 α亞基 (Gsα)和抑制性蛋白 α亞基 (Giα)含量的變化以及 St. Thomas 號液和冷血心臟停搏液對這種變化的不同影響?！》椒ā?30只新生豚鼠隨機分為 3組 ,建立離體心臟左心做功模型 ,組 (n=10 ) :低溫對照 ;組 (n=10 ) :St.Thomas 號液灌注 ;組 (n=10 ) :冷血心臟停搏液灌注。采用 Western印跡雜交法研究 Gsα和 Giα蛋白含量的變化。 結果 缺血前 3組的 Gsα和 Giα蛋白含量差別均無統(tǒng)計學意義。缺血后 ,組 和組 Gsα蛋白水平顯著低于缺血前 (Plt;0 .0 1) ,組 較缺血前無明顯降低 (Pgt;0 .0 5 )。再灌注后 ,組 Gsα蛋白與缺血前水平相近 (Pgt;0 .0 5 ) ,且明顯高于組 和組 (Plt;0 .0 1)。缺血后和再灌注后 ,組 的 Giα蛋白含量與缺血前比較差別無統(tǒng)計學意義 (Pgt;0 .0 5 ) ,明顯低于組 和組 (Plt;0 .0 1) ;組 和組 仍明顯高于缺血前 (Plt;0 .0 1)。 結論 更多新生豚鼠心肌 2 0℃缺血 -再灌注時 Gsα蛋白含量明顯降低 ,而 Giα蛋白含量顯著升高。 St. Thomas 號液不能改變這種變化 ,而冷血心臟停搏液可使新生豚鼠心肌再灌注后的 Gsα和 Giα蛋白含量恢復至缺血前水平。Gsα和 Giα蛋白的平衡遭受破壞可能是未成熟心肌缺血 -再灌注損傷發(fā)生
目的探討細胞骨架重塑對體外大鼠跟腱來源肌腱干細胞（tendon stem cells,TSCs）成脂分化的影響。 方法取3周齡雄性SD大鼠跟腱組織，采用酶消化法分離、培養(yǎng)TSCs，取第3代細胞用于實驗。將細胞分別以細胞松弛素D（cytochalasin D,CYD）終濃度為0、50、100、500、1 000 ng/mL的含15%FBS的DMEM培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下觀察細胞存活及形態(tài)變化，纖維肌動蛋白（fibros actin,F-actin）染色觀察細胞骨架，Western blot檢測F-actin/球狀肌動蛋白（globular actin,G-actin）比值，根據(jù)結果選擇CYD有效使用濃度進行后續(xù)實驗。取TSCs分別采用成脂誘導培養(yǎng)基（誘導組）、含CYD的成脂誘導培養(yǎng)基（CYD+誘導組）以及普通培養(yǎng)基（普通組）、含CYD的普通培養(yǎng)基（CYD+普通組）培養(yǎng)3、7 d，收集各組細胞行實時熒光定量PCR檢測成脂分化相關特異標志性基因表達，包括過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ）、脂蛋白酯酶（1ipoprotein lipase,LPL）、脂肪酸結合蛋白(aP2)，Western blot檢測PPARγ、aP2蛋白表達。 結果CYD濃度為100 ng/mL時既能有效干擾TSCs細胞骨架F-actin的聚合，又不影響TSCs的存活，選擇該濃度進行后續(xù)實驗。實時熒光定量PCR及Western blot檢測示，3、7 d時CYD+誘導組PPARγ、LPL和aP2基因及PPARγ、aP2蛋白表達均顯著高于誘導組，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。3、7 d時CYD+普通組PPARγ、LPL和aP2基因表達也顯著高于普通組，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結論細胞骨架重塑是TSCs成脂分化的一個先決條件，抑制F-actin聚合可促進TSCs的成脂分化，對肌腱病的發(fā)病機制研究具有重要意義。
目的 探討東亞人群中MDM2 SNP309與胃癌風險的關系。方法 計算機檢索MEDLINE、EMbase和CBM數(shù)據(jù)庫，檢索時限均為1990.1.1至2012.12.23，搜集研究東亞人群中MDM2 SNP309與胃癌風險的病例-對照研究。由兩位研究者獨立進行文獻篩選、資料提取和納入研究的方法學質(zhì)量評價后，采用RevMan 5.0軟件進行Meta分析。結果 共納入5個病例-對照研究，包括1 621例胃癌患者，2 639例對照。Meta分析結果顯示：與野生型純合子（309TT）基因型個體相比，變異純合子（309GG）基因型個體與胃癌風險增高相關［OR=1.54，95%CI（1.04，2.29），P=0.02］，然而雜合子（309TG）基因型個體與胃癌風險增高相關性無統(tǒng)計學意義［OR=1.03，95%CI（0.75，1.42），P=0.006］。在隱形遺傳模式中（GG vs. TG/TT）胃癌風險增高且有統(tǒng)計學意義［OR=1.49，95%CI（1.20，1.84），P=0.07］，但在顯性遺傳模式中（GG/TG vs. TT）這種風險增高無統(tǒng)計學意義［OR=1.18，95%CI（0.84，1.65），P=0.001］。結論 在東亞人群中，MDM2 309GG基因型個體可能存在較高的胃癌風險。
目的：了解大鼠腦出血后血腫周圍組織細胞凋亡與神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）的表達及大鼠神經(jīng)功能缺損程度的關系。方法：用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、NSE免疫組織化學染色及TUNEL分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時血腫周圍NSE及TUNEL的表達。用Longa評分法評價大鼠神經(jīng)功能缺損程度。結果：大鼠在膠原酶注入6 h后形成穩(wěn)定的血腫，在造模24～48 h神經(jīng)功能缺損程度最重；6 h即見到TUNEL陽性細胞的表達，在48 h最明顯；NSE從神經(jīng)元中漏出彌散到細胞間隙也在48 h達高峰。結論：腦出血血腫周圍凋亡與神經(jīng)功能缺損及NSE的變化有關，凋亡可能在腦出血的神經(jīng)損傷中起重要的作用。
摘要:目的:動態(tài)觀察大鼠腦出血后血腫周圍組織補體激活與細胞凋亡的規(guī)律。方法:用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、免疫組織化學染色及原位末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP 缺口末端標記法(TUNEL)分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時血腫周圍補體C3、促凋亡基因(Bax)、抑凋亡基因(Bclxl)及TUNEL的表達。結果補體C3的表達峰值在24~48 h;TUNEL、Bax蛋白表達術后12h增加,48~72 h達高峰,而Bclxl蛋白表達高峰在48h。結論:大鼠腦出血后血腫周圍組織補體C3的表達增加與細胞凋亡的演變趨勢一致,C3與凋亡有相關。Abstract: Objective: To study the complement activation and apoptosis regular genes changes in the tissues of the perihematoma of intracerebral hemorrhage (ICH) in rats. Methods: Intracerebral hemorrhage was induced in rats by injection of bacterial collagenase into the caudate nucleus. Histopathological changes were studied in 6 h,12 h, 24 h, 2 d, 3 d, 5 d, 7 d after the injection. The immunohistochemistry and TUNEL analysis were performed. The expression of complement factor C3, the TUNELpositive cells, the proapoptotic gene expression (Bax) and the antiapoptotic gene (Bclxl) were examined. Results: The expression of C3 increased to its maximum between 2448 h. The TUNELpositive cells and Bax protein expression increased gradually and reached the peak level between 4872 h. The Bclxl protein reached the peak level at 48 h. The correlation analysis showed that the quantity of C3 was positively related to that of the TUNELpositive cells, but the bax protein was not related to Bclxl protein. Conclusion: The expression of complement factor C3 may contributes to the nerve injury after cerebral hemorrhage and relate to the apotosis in the tissues surrounding the hametoma in rats.
摘要:目的:探討卡配因抑制劑3（MDL28170）對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)神經(jīng)細胞凋亡的影響。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治療組于缺養(yǎng)缺血后即刻、2 h、4 h腹腔內(nèi)注射MDL28170,對照組及手術組同時予生理鹽水。缺氧缺血后24 h用免疫組化方法觀察大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3 蛋白表達、TUNEL法檢測細胞凋亡,觀察組織病理改變并計算海馬神經(jīng)元死亡數(shù),透射電鏡觀察細胞超微結構。結果:缺氧缺血后24 h缺血側大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3和TUNEL陽性細胞數(shù)較對照組明顯增加,透射電鏡證實有凋亡細胞;MDL28170可減少陽性細胞數(shù)量,抑制神經(jīng)元死亡,差異有顯著性(Plt;0.05)。結論:MDL28170可通過抑制神經(jīng)凋亡而對新生大鼠HIBD具有一定保護作用。Abstract: Objective: To investigate the effect of (Calpain inhibitor3) MDL28170 on neural apoptosis in a neonatal model of hypoxicischemic brain damage (HIBD). Methods: A neonatal model of HIBD was established, 7dayold SD rats were divided into three groups. The treatment group received MDL28170(ip) at 0 h,2 h,4 h after HI, whereas the other two groups were administered normal saline simultaneously. The expression of caspase3 (by immunohistochemistry), neural apoptosis (by TUNEL) in cortex and hippocampus ipsilateral to the insult were observed 24 h after HI; hippocampal CA1 neural loss and electromicroscopic changes were assessed at the same time. Results: Apoptotic body was observed by electromicroscopy. Caspase3 positive cells and apoptotic cells increased significantly in the ipsilateral cortex and hippocampal CA1 region compared to the control, and MDL28170 reduced the number of positive cells, attenuated CA1 neural loss with significance (Plt;0.05). Conclusion: It is suggested that MDL28170 may protect the brain of neonatal rats after HIBD by suppressing neural apoptosis.
目的：建立存活時間較長的急性重癥肝炎小鼠模型。方法：將50只BALB/c小鼠平均分成5組，其中A、B、C、D 4組為實驗組，E組為對照組；實驗組分別給予D氨基半乳糖（D-GalN）和脂多糖（LPS），劑量分別為800 mg/kg和10 μg/kg、500 mg/kg和10 μg/kg、500 mg/kg和5 μg/kg、300 mg/kg和5 μg/kg，用生理鹽水稀釋至1 mL，行腹腔注射；對照組E腹腔注射生理鹽水2 mL。以12 h死亡率、24 h死亡率及肝組織學改變?yōu)橛^察指標。結果：A、B、C、D及E組小鼠12 h死亡率分別為80%%、30%、10%、0和0；24 h死亡率分別為90%、60%、30%、0和0；A和B組小鼠肝組織學均呈急性重癥肝炎表現(xiàn)，C組中有5只小鼠肝組織學符合重癥肝炎的表現(xiàn)，而該組其余小鼠及D組所有肝組織學雖有炎癥改變，但達不到重癥肝炎的程度，E組肝組織學表現(xiàn)正常。結論：LPS 10 μg/kg聯(lián)合D- GalN 500 mg/kg可成功建立12 h存活率較高的急性重癥肝炎小鼠模型。
目的：建立能表達乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，為研究HBV核酸疫苗的體內(nèi)CTL應答及免疫治療作用提供簡便易行的研究模型。 方法：以免疫印跡法驗證SP2/0-S2S細胞中有HBV preS2S抗原的穩(wěn)定表達，將SP2/0-S2S細胞種植到BALB/c小鼠脅部皮下（荷瘤），觀察能否生長成瘤，以及成瘤的時間、腫瘤大小和荷瘤后小鼠的生存時間；以免疫組織化學法檢測小鼠腫瘤組織HBV preS2S抗原的表達。以不表達preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV細胞荷瘤小鼠作為陰性對照。結果：荷瘤后3天～1周，SP2/0-S2S細胞可在小鼠皮下形成實體腫瘤，成瘤率為100%，腫瘤細胞中有preS2S抗原表達，荷瘤后小鼠的平均生存時間為16±1天；與不表達preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV細胞荷瘤小鼠相比，成瘤率、成瘤時間、腫瘤大小及生存時間差異。結論：建立了能表達HBV preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用于HBV核酸疫苗的體內(nèi)CTL應答及免疫治療作用的實驗研究。同時也建立了不表達preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用作陰性對照。
目的 研究胃袖帶切除術（sleeve gastrectomy，SG）對GK大鼠2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）的治療作用及其可能機理。方法 將13只12周齡的GK大鼠隨機分為2組：SG組7只和假手術組（SO組） 6只，分別行SG術和假手術。于術前及術后1、4、10和26周測量2組大鼠的體質(zhì)量、24h進食量、空腹血糖值、血清胰高血糖素樣肽-1 （glucagon-like peptide-1，GLP-1）和血清生長激素釋放肽（Ghrelin）濃度；于術后10周檢測2組大鼠的糞便能量含量，并進行口服葡萄糖耐量實驗（OGTT）和胰島素耐受性實驗（ITT）。結果 ①體質(zhì)量：各時點2組大鼠的體質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與術前比較，術后1周2組大鼠的體質(zhì)量均降低（P＜0.01），術后10和26周的體質(zhì)量均增加（P＜0.01）。②24h進食量：與SO組比較，術后4和10周SG組大鼠的24h進食量均較低（P＜0.05）。與術前比較，SG組大鼠術后1、4及10周的進食量均較低（P＜0.05），SO組大鼠術后1周的進食量低于術前（P＜0.05）。③空腹血糖值：與SO組比較，術后各時點SG組大鼠的空腹血糖值均較低（P＜0.01）。與術前比較，SG組大鼠術后各時點的空腹血糖值均較低（P＜0.01），而SO組大鼠僅術后1周明顯低于術前（P＜0.01）。④血清GLP-1水平：與SO組比較，術后4、10及26周SG組大鼠的血清GLP-1水平均較高（P＜0.05）。與術前比較，術后4、10及26周SG組大鼠的血清GLP-1水平較高（P＜0.05），而術后SO組大鼠的血清GLP-1水平無明顯變化（P＞0.05）。⑤血清Ghrelin水平：與SO組比較，術后各時點SG組大鼠的血清Ghrelin水平均較低（P＜0.01）。與術前比較，術后各時點SG組大鼠的血清Ghrelin水平均較低（P＜0.001），而SO組大鼠的血清Ghrelin水平無明顯變化（P＞0.05）。⑥曲線下面積（AUC）：SG組大鼠的AUC （OGTT和ITT）均較SO組低（P＜0.01）。結論 SG術可以明顯降低GK大鼠的空腹血糖值，改善葡萄糖耐量及增強胰島素敏感性，該作用可能是GLP-1、Grelin等多種胃腸道激素共同作用的結果。SG術可能是潛在的非肥胖型T2DM的治療方法。
目的 通過建立不同體積供肝的大鼠肝移植模型，探索邊緣性體積供肝大小的適宜范圍，為研究小肝綜合征的發(fā)病機理及防治措施提供一種易于復制的小動物模型。方法 將192只大鼠隨機分為全肝移植組、半肝移植組、小體積供肝移植組及超小體積供肝移植組，每組48只，分別建立全肝、半肝、小體積供肝和超小體積供肝的大鼠肝移植模型。移植術后，4組各抽取24只大鼠用于觀察存活率；抽取12只大鼠于移植術前，移植術后5、15、30、45及60min測定門靜脈壓力；另12只大鼠于術后24h測定谷丙轉氨酶（ALT）水平。結果 全肝移植組的7d累積生存率為100% （24/24），半肝移植組為87.5% （21/24），小體積供肝移植組為37.5%（9/24），超小體積供肝移植組均于術后48h內(nèi)死亡。全肝移植組術中開放門靜脈后，60min內(nèi)其門靜脈壓力穩(wěn)定；半肝移植組大鼠在開放門靜脈后，其門脈壓力雖有小幅升高，但仍保持相對穩(wěn)定；而小體積供肝移植組和超小體積供肝移植組開放門靜脈后，其門靜脈壓力均顯著升高，15min時均達到高峰，之后該2組的門靜脈壓力開始回落，至45～60min時逐漸穩(wěn)定。供肝的體積大小與開放門靜脈后5 （r=-0.942）、15 （r=-0.947）、30 （r=-0.900）、45 （r=-0.825）和60min （r=-0.705）時的門靜脈壓力均呈負相關關系（P＜0.001）。肝移植術后24 h，全肝移植組和半肝移植組ALT水平均低于小體積供肝移植組及超小體積供肝移植組（P＜0.05），且小體積供肝移植組ALT水平低于超小體積供肝移植組（P＜0.05）。供肝體積的大小與大鼠移植術后的ALT水平呈負相關關系（r=-0.685，P＜0.001）。結論 大鼠部分肝移植模型中，供肝與受體標準肝臟體積比（GV/SLV）的安全界限為50%，GV/SLV為30%～35%的供肝可視為邊緣性體積供肝，小于30%的供肝可視為超小體積供肝。