目的 總結(jié)功能性組織工程肌腱（functional tissue engineered tendons，F(xiàn)TETs）的研究和應(yīng)用。 方法 查閱近年來國(guó)內(nèi)外有關(guān)FTETs 研究的相關(guān)文獻(xiàn)，并進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果 功能性組織工程（functionaltissue engineering，F(xiàn)TE）作為一種新方法，強(qiáng)調(diào)了機(jī)械應(yīng)力對(duì)于成功構(gòu)建組織工程復(fù)合物的重要性以及對(duì)體內(nèi)組織重塑的影響。在組織工程肌腱的研究中引入FTE 方法，通過測(cè)量正常肌腱組織的體內(nèi)載荷，利用這些信息指導(dǎo)設(shè)計(jì)能承受體內(nèi)載荷的合適的組織工程肌腱復(fù)合物，可望解決修復(fù)肌腱缺損的組織工程肌腱生物力學(xué)功能不能滿足體內(nèi)力學(xué)環(huán)境需要的問題。 結(jié)論 FTETs 對(duì)于治療肌腱缺損具有廣闊的應(yīng)用前景。
目的 探討SD 大鼠骨骼肌脫細(xì)胞的優(yōu)化處理方法。 方法 SD 大鼠16 只，雌雄不限，體重180 ～ 200 g。取其中10 只大鼠36 條骨骼肌肌束，隨機(jī)分為3 組，正常組（A 組，n=4）：不作脫細(xì)胞處理；時(shí)間組（T 組）及濃度組（C 組）按照低滲- 去垢劑方法進(jìn)行脫細(xì)胞處理（n=16），其中T 組十二烷基磺酸鈉（sodium dodecyl sulfate，SDS）濃度均為1.0%，根據(jù)處理時(shí)間不同（24、48、72、96 h），分為T1、T2、T3、T4 組（n=4）；C 組處理時(shí)間均為48 h，根據(jù)SDS濃度不同（0.5%、1.0%、1.5%、2.0%）分為C1、C2、C3、C4 組（n=4）。取各組材料行HE 染色觀察及羥脯氨酸含量檢測(cè)，并根據(jù)結(jié)果篩選最優(yōu)脫細(xì)胞處理?xiàng)l件。另取6 只SD 大鼠14 條完整肌束，隨機(jī)取7 條按照最優(yōu)條件進(jìn)行脫細(xì)胞處理（實(shí)驗(yàn)組），余7 條作為正常對(duì)照（對(duì)照組），對(duì)肌束行大體觀察、Masson 染色及生物力學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果 HE 染色顯示T1、T2、C1、C2、C3 組肌纖維與A 組無差異；C4 組肌纖維部分脫除；T3 組肌纖維完全脫除且基膜結(jié)構(gòu)保留完整；T4 組肌纖維完全脫除但基膜結(jié)構(gòu)部分被破壞。羥脯氨酸含量檢測(cè)：A 組與C1、C2、C3、T1 及T2 組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；A 組與C4、T3 和T4 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；C4 組與T3、T4 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；T3 組和T4 組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。根據(jù)HE 染色及羥脯氨酸含量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果篩選出最優(yōu)脫細(xì)胞處理?xiàng)l件為4℃、1.0% SDS、72 h。大體觀察：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較肌束顏色變淺，呈半透明狀，且結(jié)構(gòu)相對(duì)較松散。Masson 染色觀察：實(shí)驗(yàn)組膠原纖維連續(xù)性良好，較對(duì)照組結(jié)構(gòu)疏松。生物力學(xué)測(cè)試：實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組最大破壞載荷分別為（1.38 ± 0.35） N及（1.98 ± 0.77）N，最大拉伸位移分別為（3.19 ± 3.23）mm 及（3.56 ± 2.17）mm，兩組以上指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 應(yīng)用1.0% SDS，于4℃條件下對(duì)大鼠骨骼肌經(jīng)震蕩處理72 h 可得到完全去除肌纖維且ECM 保留完好的脫細(xì)胞基質(zhì)。
對(duì)組織工程化肌腱領(lǐng)域中目前研究的主要成果進(jìn)行綜述，著重闡述了肌腱細(xì)胞外基質(zhì)替代物、肌腱細(xì)胞生物學(xué)性質(zhì)及肌腱細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)材料復(fù)合研究中的主要問題。認(rèn)為，研制適于肌腱細(xì)胞生長(zhǎng)、粘附和發(fā)揮功能的細(xì)胞外基質(zhì)材料；建立生長(zhǎng)、增殖可調(diào)控的肌腱細(xì)胞系；在模擬體內(nèi)力學(xué)條件下，進(jìn)行肌腱細(xì)胞三維培養(yǎng)，將是研究具有特定修復(fù)功能的組織工程化肌腱的重要問題。
目的綜述肩袖損傷修復(fù)的界面組織工程研究進(jìn)展。方法查閱近年國(guó)內(nèi)外有關(guān)肩袖損傷修復(fù)的界面組織工程相關(guān)研究文獻(xiàn)，并進(jìn)行總結(jié)分析。結(jié)果界面組織工程研究是通過多種方法重建復(fù)雜的、層次分明的界面組織，修復(fù)或再生受損的不同組織連接部位。肩袖損傷界面組織工程主要包括種子細(xì)胞、生長(zhǎng)因子、生物材料、氧濃度和力學(xué)刺激等方面。結(jié)論肩袖損傷愈合和再生的最佳策略不僅需要使用具有梯度變化的生物材料，還需要種子細(xì)胞、生長(zhǎng)因子和特定培養(yǎng)條件（例如氧濃度和力學(xué)刺激）的結(jié)合，然而相應(yīng)治療手段的臨床轉(zhuǎn)化仍然是一個(gè)非常緩慢的過程。
目的 總結(jié)巨大肩袖撕裂的治療及研究進(jìn)展。 方法 查閱巨大肩袖撕裂臨床治療及實(shí)驗(yàn)研究的相關(guān)文獻(xiàn)，并進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果 巨大肩袖撕裂的治療方法主要有非手術(shù)治療、清創(chuàng)減壓術(shù)、直接修復(fù)術(shù)、肌腱轉(zhuǎn)移術(shù)以及各種材料修復(fù)，其療效各異。近年來，出現(xiàn)了許多有關(guān)巨大肩袖撕裂治療的實(shí)驗(yàn)研究，如基因治療、細(xì)胞治療和組織工程技術(shù)，有望為臨床醫(yī)生提供新的治療策略。 結(jié)論 巨大肩袖撕裂的治療對(duì)臨床醫(yī)生是一個(gè)挑戰(zhàn)，治療方案的選擇需要從多方面考慮；傳統(tǒng)手術(shù)方法修復(fù)斷裂肩袖效果有限，巨大肩袖撕裂的研究和治療技術(shù)尚需進(jìn)行深入研究。
目的 探討玻璃化凍存組織工程肌腱植入大鼠體內(nèi)修復(fù)跟腱缺損后不同時(shí)期，大鼠的免疫排斥反應(yīng)及對(duì)肝、腎、心血管功能的影響。 方法 抽取1 周齡SD 大鼠尾腱，采用組織塊法培養(yǎng)肌腱細(xì)胞。取第2 ～ 4 代肌腱細(xì)胞，以5 × 106 個(gè)/mL 細(xì)胞密度接種至長(zhǎng)1.5 cm 生物衍生肌腱材料，復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建組織工程肌腱。采用21%DMSO 作為玻璃化凍存保護(hù)液，Eurocollins solution 作為4℃條件下預(yù)冷液和洗脫液的基礎(chǔ)液體，按自制的玻璃化凍存方法凍存。健康SD大鼠72 只，雌雄不限，體重210 ～ 230 g。隨機(jī)分成A（n=32）、B（n=32）、C（n=8）3 組。A、B 組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于跟腱中段制備長(zhǎng)約0.5 cm 肌腱缺損模型，分別將玻璃化凍存后及未凍存的組織工程肌腱移植修復(fù)缺損肌腱；C 組大鼠未手術(shù)，為正常對(duì)照。術(shù)后2、4、6、8 周，行大體觀察、肝、腎及心血管功能檢測(cè)；術(shù)后2、4、6 周行血清免疫學(xué)檢測(cè)。 結(jié) 果 A、B 組植入部位均未見組織壞死、積液及化膿感染；術(shù)后2 周，A、B 組均出現(xiàn)粘連現(xiàn)象，4 ～ 6 周逐漸好轉(zhuǎn)，8 周未見明顯粘連，新生組織連續(xù)性完整，肌腱橋接部已愈合，與正常肌腱類似。術(shù)后2、4、6 周，血清中IgG 和IgM 含量A、B、C 組組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。肝功能檢測(cè)：A 組術(shù)后4 周，B 組術(shù)后4、6 周，谷草轉(zhuǎn)氨酶均低于C 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；其余各時(shí)間點(diǎn)A、B 組谷草轉(zhuǎn)氨酶與C 組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。各時(shí)間點(diǎn)A、B 組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、ALP、直接膽紅素和總膽紅素與C 組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。腎功能檢測(cè)：術(shù)后2 周，A 組血清白蛋白和B 組肌酐明顯下降，與C 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；術(shù)后4、6、8 周，A、B 組各指標(biāo)濃度與C 組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。心血管功能檢測(cè)：A 組各時(shí)間點(diǎn)血糖、甘油三酯、膽固醇與C 組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；B 組術(shù)后8 周甘油三酯與C 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 玻璃化凍存的組織工程肌腱植入大鼠體內(nèi)修復(fù)跟腱缺損，未引起明顯免疫排斥反應(yīng)，對(duì)肝、腎及心血管功能無明顯影響。
目的 檢測(cè)體外構(gòu)建的組織工程骨移植后兔外周血T細(xì)胞亞群的變化，對(duì)移植組織進(jìn)行組織學(xué)觀察，探討以生物衍生材料作為骨組織工程支架材料的可行性。 方法 組織工程骨以兔骨膜來源的成骨細(xì)胞為種子細(xì)胞，經(jīng)抗原自消化、部分脫鈣、凍干后的異體骨為支架材料于體外構(gòu)建。將健康新西蘭白兔48只制成1 cm長(zhǎng)橈骨缺損模型后，隨機(jī)分成A～D 4組，每組12只，分別用部分脫鈣凍干骨（partial demineralized freezedried bone,PDFDB）、組織工程骨、自體骨、同種異體骨植入兔橈骨節(jié)段性缺損。術(shù)后1、2、4周取材,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)4種材料移植早期兔外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化；通過常規(guī)組織學(xué)檢測(cè)觀察2、4、8、12周時(shí)4種材料的成骨作用。 結(jié)果 B組術(shù)后2周材料孔隙內(nèi)有成骨細(xì)胞和成軟骨細(xì)胞，可見骨、軟骨混合性新生物形成，周邊分布有破骨細(xì)胞，部分網(wǎng)架呈蠶食狀被破壞吸收。術(shù)后4周，形成的新生骨過渡為編織骨。A、B組材料植入后1、2周外周血CD4+和CD8+ T細(xì)胞較術(shù)前明顯升高(P＜0.05)；術(shù)后4周CD4+ T細(xì)胞較術(shù)前輕度偏高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。C組術(shù)后CD4+和CD8+ T細(xì)胞升高不明顯(P＞0.05)。D組術(shù)后1、2、4周外周血CD4+和CD8+ T細(xì)胞較術(shù)前及其他各組同期均明顯增高(P＜0.05)。 結(jié)論 PDFDB為支架材料構(gòu)建的細(xì)胞材料復(fù)合物移植后外周血T淋巴細(xì)胞增高，但不影響其良好的修復(fù)骨缺損能力，生物衍生骨可作為支架材料應(yīng)用于骨組織工程研究。
目的 比較培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨和半月板軟骨細(xì)胞的生物學(xué)特性，探討培養(yǎng)軟骨作為半月板移植替代物的可能性。方法 分別自3周齡大耳白兔關(guān)節(jié)軟骨和半月板分離軟骨細(xì)胞，行單層傳代培養(yǎng)和離心管培養(yǎng)。將離心管培養(yǎng)形成的軟骨和6周齡兔半月板行組織學(xué)和透射電鏡觀察，比較關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和半月板纖維軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)第2、4代關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和半月板纖維軟骨細(xì)胞周期。結(jié)果 第4代關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞呈去分化，似成纖維細(xì)胞。離心管關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)能形成軟骨，半月板纖維軟骨細(xì)胞不能形成軟骨。培養(yǎng)軟骨和半月板的組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)差異顯著，培養(yǎng)軟骨中軟骨細(xì)胞5%呈現(xiàn)凋亡。第2、4代關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中亞二倍體細(xì)胞比例明顯多于第2、4代半月板纖維軟骨細(xì)胞（Plt;0.05）。結(jié)論 半月板來源的軟骨細(xì)胞經(jīng)離心管培養(yǎng)不能形成軟骨組織，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞離心培養(yǎng)形成軟骨不能作為半月板的移植物，關(guān)節(jié)軟骨和半月板軟骨組織存在明顯的區(qū)別。
目的 探討離心管培養(yǎng)軟骨作為移植材料的可能性。方法 3周齡兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞經(jīng)離心管培養(yǎng) 2周形成軟骨 ,另取 6周齡兔肱骨頭關(guān)節(jié)軟骨、脛骨近端生長(zhǎng)板和半月板 ,并對(duì) 4種軟骨進(jìn)行透射電鏡觀察 ,比較其軟骨細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)。結(jié)果 離心管培養(yǎng)軟骨具有獨(dú)特的超微結(jié)構(gòu) ,與關(guān)節(jié)軟骨和生長(zhǎng)板有一定的相似性 ,而與半月板有明顯區(qū)別。4種軟骨都形成了各自不同的細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)特征 ,離心管培養(yǎng)軟骨呈現(xiàn)典型軟骨細(xì)胞凋亡 ,生長(zhǎng)板表現(xiàn)“黑暗”軟骨細(xì)胞 ,關(guān)節(jié)軟骨和半月板未見細(xì)胞凋亡。結(jié)論 離心管培養(yǎng)軟骨具有獨(dú)特的超微結(jié)構(gòu) ,可作為關(guān)節(jié)軟骨和生長(zhǎng)板的移植物。
目的研究反復(fù)凍融結(jié)合核酸酶處理小牛肌腱脫細(xì)胞效果以及對(duì)肌腱組織形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生化成分和力學(xué)特性的影響。 方法取新鮮1日齡西門塔爾小牛跟腱48根，隨機(jī)分為3組（n=16）：A組為正常對(duì)照組，B組采用液氮冷凍/37℃復(fù)溫反復(fù)凍融5次，C組在反復(fù)凍融基礎(chǔ)上結(jié)合核酸酶處理24 h。每組取2根跟腱用于掃描電鏡觀察，3根用于、組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色觀察，3根用于DNA殘留量檢測(cè)，8根用于生物力學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果掃描電鏡觀察示A、B組膠原纖維排列致密有序，形態(tài)完整，未見斷裂；C組膠原纖維排列松散，幾乎無斷裂。阿利新藍(lán)、天狼星紅染色及免疫組織化學(xué)染色示C組糖胺聚糖、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、纖維連接蛋白大部分被保留；HE染色和DAPI染色示A、B組膠原纖維間可見較多完整的細(xì)胞核，而C組膠原纖維之間未見完整細(xì)胞核，但腱內(nèi)膜上仍有部分細(xì)胞核殘留。A、B、C組的DNA殘留量分別為（0.24 ± 0.12）、（0.16 ± 0.07）、（0.05 ± 0.02）μg/mg，C組顯著低于A、B組（P lt; 0.05）；A、B組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 生物力學(xué)檢測(cè)顯示，A、B、C組間拉伸強(qiáng)度、斷裂應(yīng)變、剛度和彈性模量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論反復(fù)凍融結(jié)合核酸酶處理小牛肌腱，可有效去除細(xì)胞成分，同時(shí)基本保留肌腱原始膠原纖維結(jié)構(gòu)、形態(tài)、大部分細(xì)胞外基質(zhì)成分和力學(xué)特性。