目的:研究離體肝臟缺血再灌注期間絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor α,TNFα )mRNA表達的影響。方法:建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12)灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190,抑制組(n=12)灌注液中加入SB202190(濃度為3μmol/L)。分別于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10min、30min、60min及120min時獲取離體肝組織標本。應(yīng)用Western-blot法及免疫沉淀法檢測離體肝組織中p38MAPK表達的水平及活性,RT-PCR法檢測TNF-α-mRNA表達水平。結(jié)果:對照組p38MAPK活性在冷保存末及再灌注10min、30min、60min均較離體前和再灌注120min顯著升高(Plt;0.01),也顯著高于同時相點的抑制組(Plt;0.01);抑制組p38MAPK活性在組內(nèi)各時相點的變化無顯著性差異(Pgt;0.05)。兩組肝臟于離體前、冷保存末及再灌注10min及30min,肝組織中僅有少量TNF-α mRNA表達,組間及組內(nèi)比較無顯著性差異(Pgt;0.05);至再灌注60min及120min,對照組TNF-α mRNA的表達水平顯著性高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.01),而抑制組雖然也顯著高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.05),但卻顯著性低于同時相點對照組的表達水平(Plt;0.01)。離體再灌注期間供肝組織中p38MAPK活性與供肝組織內(nèi)TNF-α mRNA的表達水平呈顯著性正相關(guān)(r=0.996,Plt;0.01)。結(jié)論:p38MAPK對TNF-α生成的調(diào)節(jié)作用層次可能在轉(zhuǎn)錄水平,提示p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對TNF-α mRNA的調(diào)節(jié)可能是導(dǎo)致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機制之一。
目的:研究離體肝臟缺血再灌注期間絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對細胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecular 1,ICAM1)mRNA表達的影響。方法:建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12):灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190,抑制組(n=12):灌注液中加入SB202190(濃度為3μmol/L)。于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10min、30min、60min及120min時獲取離體肝組織標本。分別應(yīng)用Western-blot法及免疫沉淀法檢測離體肝組織中p38MAPK表達的水平及活性,原位雜交法檢測ICAM1 mRNA表達水平。結(jié)果:與離體前相較,對照組p38MAPK活性在冷保存末及再灌注10min、30min、60min顯著性增高(Plt;0.01),而再灌注120min時活性與離體前相較無明顯差異(Pgt;0.05);抑制組p38MAPK活性在各時相點的變化無顯著性差異(Pgt;0.05),除離體前及再灌注120min兩組肝臟的p38MAPK活性無顯著性差異外,其余各時相點p38MAPK活性均顯著性低于對照組(Plt;0.01)。離體前、冷保存末及再灌注10min及30min時,兩組肝組織中僅有少量ICAM1 mRNA表達,組間及組內(nèi)比較無顯著性差異(Pgt;0.05);至再灌注60min及120min,對照組ICAM1 mRNA的表達水平顯著性高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.01),而抑制組雖然也顯著高于組內(nèi)其它時相點(Plt;0.05),但卻顯著性低于同時相點對照組的表達水平(Plt;0.01)。離體再灌注期間供肝組織中p38MAPK活性與供肝組織內(nèi)ICAM1 mRNA的表達水平呈顯著性正相關(guān)(r=0.985,Plt;0.01)。結(jié)論:p38MAPK對ICAM1生成的調(diào)節(jié)作用層次可能在轉(zhuǎn)錄水平,提示p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對ICAM1 mRNA的調(diào)節(jié)可能是導(dǎo)致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機制之一。
目的 研究離體肝臟缺血再灌注早期絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA和細胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM1) mRNA表達的影響。方法 建立兔離體肝臟缺血再灌注模型，對照組（n=12）： 灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190； 抑制組（n=12）： 灌注液中加入SB202190（濃度3 μmol/L）。分別于肝臟離體前，冷保存末，再灌注10、30、60及120 min時獲取肝組織標本。分別應(yīng)用Western blot法及免疫沉淀法檢測肝組織中p38MAPK蛋白的表達及活性； RT-PCR法檢測肝組織中TNF-α mRNA的表達水平，原位雜交法檢測肝組織中ICAM1 mRNA的表達水平。結(jié)果 2組動物肝組織中p38MAPK蛋白的表達水平各時相均無明顯改變（P＞0.05），且2組間其表達水平的差異也無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。對照組肝組織中p38MAPK的活性在冷保存末及再灌注10、30及60 min時均較離體前和再灌注120 min時明顯升高(P＜0.01),也明顯高于同時相的抑制組(P＜0.01)； 抑制組p38MAPK活性各時相的變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。離體前、冷保存末及再灌注10及30 min，2組的肝組織中均僅有少量TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA表達，組間及組內(nèi)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）； 至再灌注60及120 min，2組TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA的表達水平均明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），但抑制組相應(yīng)時相的表達水平明顯低于對照組（P＜0.01）。離體再灌注期間肝組織中p38MAPK的活性與TNF-α mRNA及ICAM1 mRNA的表達水平呈正相關(guān)（r=0.996,P＜0.01； r=0.985,P＜0.01）。結(jié)論 p38MAPK可能是在轉(zhuǎn)錄水平對TNF-α和ICAM1的生成發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA的調(diào)節(jié)可能是導(dǎo)致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機理之一。
目的 研究老年急性膽囊炎患者的手術(shù)方式。方法 回顧性分析我院近13年間行手術(shù)治療的149例老年（年齡≥60歲）急性膽囊炎患者的臨床資料，根據(jù)手術(shù)方式分為開腹膽囊切除組（OC組，n＝76）和腹腔鏡膽囊切除組（LC組，n＝73例）。比較2組患者手術(shù)時間、術(shù)中出血量、術(shù)后進食時間、腸道功能恢復(fù)時間、住院時間及并發(fā)癥情況。結(jié)果 OC組患者與LC組患者的一般情況除WBC計數(shù)和膽囊B超情況外，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）； OC組術(shù)中出血量顯著高于LC組，手術(shù)時間也顯著長于LC組（P＜0.01）。OC組住院時間、進食時間及腸功能恢復(fù)時間均顯著長于LC組（P＜0.01）。在并發(fā)癥發(fā)生上，OC組有36例次，LC組有11例次，2組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論 老年急性膽囊炎患者的手術(shù)治療應(yīng)遵循個體化原則，選擇OC或LC要視患者的總體情況而定，但均應(yīng)以保證患者的安全為前提。
目的 拓展微創(chuàng)技術(shù)在胰腺周圍膿腫(簡稱胰周膿腫)中的應(yīng)用，總結(jié)膽道鏡治療胰周膿腫的經(jīng)驗和體會?！》椒ā』仡櫺苑治鑫铱?000年12月至2008年12月期間收治的36例胰周膿腫患者的臨床資料,經(jīng)超聲介入穿刺置管，逐級擴張竇道，膽道鏡清創(chuàng)，引流治療，根據(jù)胰周壞死組織特點，充分利用膽道鏡的靈活性，全方位多角度反復(fù)鉗取、網(wǎng)取、負壓吸引、徹底清除壞死組織和膿苔。 結(jié)果 全組36例施行B超介入穿刺置管引流，行單管穿刺置管3例，雙管穿刺置管7例，三管穿刺置管及以上26例; 膽道鏡清創(chuàng)次數(shù)3~14次，平均5.6次。有6例患者經(jīng)1～2次膽道鏡清創(chuàng)后全身癥狀改善，血常規(guī)和體溫恢復(fù)正常，飲食恢復(fù),可帶管出院。住院時間25～132 d，平均76 d。經(jīng)膽道鏡清創(chuàng)治愈33例, 治愈率為91.7%(33/36); 2例因胰周壞死組織范圍較大，同時伴有腹腔內(nèi)多處膿腫加行開腹清創(chuàng)引流，術(shù)后恢復(fù)較好，治愈出院; 1例因并發(fā)嚴重多器官功能衰竭死亡。本組發(fā)生出血2例,腸外瘺3例?！〗Y(jié)論 膽道鏡對胰周膿腫清創(chuàng)方法簡單、操作靈活、療效可靠，改變了胰周膿腫只能手術(shù)引流的觀點，減少了患者的創(chuàng)傷，實現(xiàn)了“微創(chuàng)損傷控制”的理念。
目的 探討腫瘤細胞裂解物致敏的樹突狀細胞（DC）作為佐劑對結(jié)腸癌LoVo細胞系的殺傷作用。方法 反復(fù)凍融法裂解培養(yǎng)的結(jié)腸癌LoVo細胞，提取細胞抗原并致敏DC，然后將后者與自身T淋巴細胞共同培養(yǎng)，觀察其對自身T淋巴細胞增殖的影響以及活化的T淋巴細胞對LoVo細胞的殺傷作用。結(jié)果 結(jié)腸癌LoVo細胞裂解物致敏的DC能明顯促進T淋巴細胞的增殖，后者對LoVo細胞的殺傷作用明顯增強。結(jié)論 腫瘤細胞裂解物提取方法簡單，易于臨床實施，其作為細胞抗原致敏DC制備的腫瘤疫苗能有效活化并產(chǎn)生腫瘤特異性細胞毒T淋巴細胞，將有很好的臨床應(yīng)用前景。
目的比較經(jīng)PTC或ERC兩種途徑放置膽道支架治療惡性膽管梗阻的療效。方法PTC途徑： 在超聲引導(dǎo)下選擇膽管走行與膽總管夾角較大、擴張的左右肝內(nèi)膽管，穿刺置管引流，1周后再置入支架，共68例（其中有2例系ERC途徑失敗者）。 ERC途徑： 在十二指腸鏡下逆行插入引流管于膽總管內(nèi)，經(jīng)造影顯示梗阻部位，其引導(dǎo)絲通過梗阻部位，然后沿引導(dǎo)絲置入支架，共53例。 結(jié)果經(jīng)PTC或ERC途徑放置支架成功率分別為100%（68/68）和96.2%(51/53)， 2組均未發(fā)生出血及漏膽并發(fā)癥。 全部患者獲隨訪1～18個月（平均12.4個月），結(jié)果PTC組和ERC組放置支架后6個月內(nèi)死亡者分別為7和5例，18個月仍存活者分別為17和9例。 結(jié)論對失去手術(shù)機會或不能耐受手術(shù)的惡性膽管梗阻患者采取支架置入是有效解除梗阻、延長生存時間和提高生存質(zhì)量的最佳方法。 位于膽總管下端和壺腹部的梗阻首選ERC途徑放置支架； 位于肝門部及以上的梗阻應(yīng)以PTC途徑放置支架為宜。
目的 總結(jié)使用膽道球囊擴張器防治肝膽管結(jié)石合并膽道出血術(shù)后再出血的臨床經(jīng)驗。方法 對我院2003～2008年間將膽道球囊擴張器預(yù)防性用于肝膽管結(jié)石術(shù)后11例膽道出血者的臨床資料進行回顧性分析。結(jié)果 11例中男7例,女4例。本院手術(shù)3例，外院轉(zhuǎn)診8例。手術(shù)止血后對疑有再出血可能的患者在膽道鏡引導(dǎo)下于肝內(nèi)膽道出血部位預(yù)置膽道球囊擴張器備用。術(shù)后3～7 d內(nèi)有4 例再發(fā)明顯膽道出血，開放球囊擴張器壓迫出血膽管，壓迫2 h后減壓0.5 h,如此反復(fù)交替進行。4例均用球囊擴張器壓迫止血成功，其中1例止血后5 d再次出血，仍用同法止血。11例患者全部存活。結(jié)論 肝膽管結(jié)石并發(fā)的肝內(nèi)膽道出血，行手術(shù)止血后可能再發(fā)出血； 于出血部位預(yù)置膽道球囊擴張器使得術(shù)后出血的治療簡單、有效，可作為膽道再出血的防治措施之一。