目的:研究離體肝臟缺血再灌注期間絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor α,TNFα )mRNA表達(dá)的影響。方法:建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12)灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190,抑制組(n=12)灌注液中加入SB202190(濃度為3μmol/L)。分別于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10min、30min、60min及120min時(shí)獲取離體肝組織標(biāo)本。應(yīng)用Western-blot法及免疫沉淀法檢測離體肝組織中p38MAPK表達(dá)的水平及活性,RT-PCR法檢測TNF-α-mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:對照組p38MAPK活性在冷保存末及再灌注10min、30min、60min均較離體前和再灌注120min顯著升高(Plt;0.01),也顯著高于同時(shí)相點(diǎn)的抑制組(Plt;0.01);抑制組p38MAPK活性在組內(nèi)各時(shí)相點(diǎn)的變化無顯著性差異(Pgt;0.05)。兩組肝臟于離體前、冷保存末及再灌注10min及30min,肝組織中僅有少量TNF-α mRNA表達(dá),組間及組內(nèi)比較無顯著性差異(Pgt;0.05);至再灌注60min及120min,對照組TNF-α mRNA的表達(dá)水平顯著性高于組內(nèi)其它時(shí)相點(diǎn)(Plt;0.01),而抑制組雖然也顯著高于組內(nèi)其它時(shí)相點(diǎn)(Plt;0.05),但卻顯著性低于同時(shí)相點(diǎn)對照組的表達(dá)水平(Plt;0.01)。離體再灌注期間供肝組織中p38MAPK活性與供肝組織內(nèi)TNF-α mRNA的表達(dá)水平呈顯著性正相關(guān)(r=0.996,Plt;0.01)。結(jié)論:p38MAPK對TNF-α生成的調(diào)節(jié)作用層次可能在轉(zhuǎn)錄水平,提示p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對TNF-α mRNA的調(diào)節(jié)可能是導(dǎo)致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機(jī)制之一。
目的:研究離體肝臟缺血再灌注期間絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecular 1,ICAM1)mRNA表達(dá)的影響。方法:建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12):灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190,抑制組(n=12):灌注液中加入SB202190(濃度為3μmol/L)。于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10min、30min、60min及120min時(shí)獲取離體肝組織標(biāo)本。分別應(yīng)用Western-blot法及免疫沉淀法檢測離體肝組織中p38MAPK表達(dá)的水平及活性,原位雜交法檢測ICAM1 mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:與離體前相較,對照組p38MAPK活性在冷保存末及再灌注10min、30min、60min顯著性增高(Plt;0.01),而再灌注120min時(shí)活性與離體前相較無明顯差異(Pgt;0.05);抑制組p38MAPK活性在各時(shí)相點(diǎn)的變化無顯著性差異(Pgt;0.05),除離體前及再灌注120min兩組肝臟的p38MAPK活性無顯著性差異外,其余各時(shí)相點(diǎn)p38MAPK活性均顯著性低于對照組(Plt;0.01)。離體前、冷保存末及再灌注10min及30min時(shí),兩組肝組織中僅有少量ICAM1 mRNA表達(dá),組間及組內(nèi)比較無顯著性差異(Pgt;0.05);至再灌注60min及120min,對照組ICAM1 mRNA的表達(dá)水平顯著性高于組內(nèi)其它時(shí)相點(diǎn)(Plt;0.01),而抑制組雖然也顯著高于組內(nèi)其它時(shí)相點(diǎn)(Plt;0.05),但卻顯著性低于同時(shí)相點(diǎn)對照組的表達(dá)水平(Plt;0.01)。離體再灌注期間供肝組織中p38MAPK活性與供肝組織內(nèi)ICAM1 mRNA的表達(dá)水平呈顯著性正相關(guān)(r=0.985,Plt;0.01)。結(jié)論:p38MAPK對ICAM1生成的調(diào)節(jié)作用層次可能在轉(zhuǎn)錄水平,提示p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對ICAM1 mRNA的調(diào)節(jié)可能是導(dǎo)致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機(jī)制之一。
目的 研究離體肝臟缺血再灌注早期絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,p38MAPK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA和細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM1) mRNA表達(dá)的影響。方法 建立兔離體肝臟缺血再灌注模型,對照組(n=12): 灌注液中不加特異性p38MAPK抑制劑SB202190; 抑制組(n=12): 灌注液中加入SB202190(濃度3 μmol/L)。分別于肝臟離體前,冷保存末,再灌注10、30、60及120 min時(shí)獲取肝組織標(biāo)本。分別應(yīng)用Western blot法及免疫沉淀法檢測肝組織中p38MAPK蛋白的表達(dá)及活性; RT-PCR法檢測肝組織中TNF-α mRNA的表達(dá)水平,原位雜交法檢測肝組織中ICAM1 mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果 2組動(dòng)物肝組織中p38MAPK蛋白的表達(dá)水平各時(shí)相均無明顯改變(P>0.05),且2組間其表達(dá)水平的差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對照組肝組織中p38MAPK的活性在冷保存末及再灌注10、30及60 min時(shí)均較離體前和再灌注120 min時(shí)明顯升高(P<0.01),也明顯高于同時(shí)相的抑制組(P<0.01); 抑制組p38MAPK活性各時(shí)相的變化差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。離體前、冷保存末及再灌注10及30 min,2組的肝組織中均僅有少量TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA表達(dá),組間及組內(nèi)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); 至再灌注60及120 min,2組TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA的表達(dá)水平均明顯升高(P<0.05,P<0.01),但抑制組相應(yīng)時(shí)相的表達(dá)水平明顯低于對照組(P<0.01)。離體再灌注期間肝組織中p38MAPK的活性與TNF-α mRNA及ICAM1 mRNA的表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.996,P<0.01; r=0.985,P<0.01)。結(jié)論 p38MAPK可能是在轉(zhuǎn)錄水平對TNF-α和ICAM1的生成發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對TNF-α mRNA和ICAM1 mRNA的調(diào)節(jié)可能是導(dǎo)致離體肝臟缺血再灌注損傷的重要機(jī)理之一。
目的 研究老年急性膽囊炎患者的手術(shù)方式。方法 回顧性分析我院近13年間行手術(shù)治療的149例老年(年齡≥60歲)急性膽囊炎患者的臨床資料,根據(jù)手術(shù)方式分為開腹膽囊切除組(OC組,n=76)和腹腔鏡膽囊切除組(LC組,n=73例)。比較2組患者手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、術(shù)后進(jìn)食時(shí)間、腸道功能恢復(fù)時(shí)間、住院時(shí)間及并發(fā)癥情況。結(jié)果 OC組患者與LC組患者的一般情況除WBC計(jì)數(shù)和膽囊B超情況外,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); OC組術(shù)中出血量顯著高于LC組,手術(shù)時(shí)間也顯著長于LC組(P<0.01)。OC組住院時(shí)間、進(jìn)食時(shí)間及腸功能恢復(fù)時(shí)間均顯著長于LC組(P<0.01)。在并發(fā)癥發(fā)生上,OC組有36例次,LC組有11例次,2組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論 老年急性膽囊炎患者的手術(shù)治療應(yīng)遵循個(gè)體化原則,選擇OC或LC要視患者的總體情況而定,但均應(yīng)以保證患者的安全為前提。
目的 拓展微創(chuàng)技術(shù)在胰腺周圍膿腫(簡稱胰周膿腫)中的應(yīng)用,總結(jié)膽道鏡治療胰周膿腫的經(jīng)驗(yàn)和體會(huì)?!》椒ā』仡櫺苑治鑫铱?000年12月至2008年12月期間收治的36例胰周膿腫患者的臨床資料,經(jīng)超聲介入穿刺置管,逐級擴(kuò)張竇道,膽道鏡清創(chuàng),引流治療,根據(jù)胰周壞死組織特點(diǎn),充分利用膽道鏡的靈活性,全方位多角度反復(fù)鉗取、網(wǎng)取、負(fù)壓吸引、徹底清除壞死組織和膿苔?!〗Y(jié)果 全組36例施行B超介入穿刺置管引流,行單管穿刺置管3例,雙管穿刺置管7例,三管穿刺置管及以上26例; 膽道鏡清創(chuàng)次數(shù)3~14次,平均5.6次。有6例患者經(jīng)1~2次膽道鏡清創(chuàng)后全身癥狀改善,血常規(guī)和體溫恢復(fù)正常,飲食恢復(fù),可帶管出院。住院時(shí)間25~132 d,平均76 d。經(jīng)膽道鏡清創(chuàng)治愈33例, 治愈率為91.7%(33/36); 2例因胰周壞死組織范圍較大,同時(shí)伴有腹腔內(nèi)多處膿腫加行開腹清創(chuàng)引流,術(shù)后恢復(fù)較好,治愈出院; 1例因并發(fā)嚴(yán)重多器官功能衰竭死亡。本組發(fā)生出血2例,腸外瘺3例?!〗Y(jié)論 膽道鏡對胰周膿腫清創(chuàng)方法簡單、操作靈活、療效可靠,改變了胰周膿腫只能手術(shù)引流的觀點(diǎn),減少了患者的創(chuàng)傷,實(shí)現(xiàn)了“微創(chuàng)損傷控制”的理念。
目的 探討腫瘤細(xì)胞裂解物致敏的樹突狀細(xì)胞(DC)作為佐劑對結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞系的殺傷作用。方法 反復(fù)凍融法裂解培養(yǎng)的結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞,提取細(xì)胞抗原并致敏DC,然后將后者與自身T淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng),觀察其對自身T淋巴細(xì)胞增殖的影響以及活化的T淋巴細(xì)胞對LoVo細(xì)胞的殺傷作用。結(jié)果 結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞裂解物致敏的DC能明顯促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖,后者對LoVo細(xì)胞的殺傷作用明顯增強(qiáng)。結(jié)論 腫瘤細(xì)胞裂解物提取方法簡單,易于臨床實(shí)施,其作為細(xì)胞抗原致敏DC制備的腫瘤疫苗能有效活化并產(chǎn)生腫瘤特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞,將有很好的臨床應(yīng)用前景。
目的比較經(jīng)PTC或ERC兩種途徑放置膽道支架治療惡性膽管梗阻的療效。方法PTC途徑: 在超聲引導(dǎo)下選擇膽管走行與膽總管夾角較大、擴(kuò)張的左右肝內(nèi)膽管,穿刺置管引流,1周后再置入支架,共68例(其中有2例系ERC途徑失敗者)。 ERC途徑: 在十二指腸鏡下逆行插入引流管于膽總管內(nèi),經(jīng)造影顯示梗阻部位,其引導(dǎo)絲通過梗阻部位,然后沿引導(dǎo)絲置入支架,共53例。 結(jié)果經(jīng)PTC或ERC途徑放置支架成功率分別為100%(68/68)和96.2%(51/53), 2組均未發(fā)生出血及漏膽并發(fā)癥。 全部患者獲隨訪1~18個(gè)月(平均12.4個(gè)月),結(jié)果PTC組和ERC組放置支架后6個(gè)月內(nèi)死亡者分別為7和5例,18個(gè)月仍存活者分別為17和9例。 結(jié)論對失去手術(shù)機(jī)會(huì)或不能耐受手術(shù)的惡性膽管梗阻患者采取支架置入是有效解除梗阻、延長生存時(shí)間和提高生存質(zhì)量的最佳方法。 位于膽總管下端和壺腹部的梗阻首選ERC途徑放置支架; 位于肝門部及以上的梗阻應(yīng)以PTC途徑放置支架為宜。
目的 總結(jié)使用膽道球囊擴(kuò)張器防治肝膽管結(jié)石合并膽道出血術(shù)后再出血的臨床經(jīng)驗(yàn)。方法 對我院2003~2008年間將膽道球囊擴(kuò)張器預(yù)防性用于肝膽管結(jié)石術(shù)后11例膽道出血者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 11例中男7例,女4例。本院手術(shù)3例,外院轉(zhuǎn)診8例。手術(shù)止血后對疑有再出血可能的患者在膽道鏡引導(dǎo)下于肝內(nèi)膽道出血部位預(yù)置膽道球囊擴(kuò)張器備用。術(shù)后3~7 d內(nèi)有4 例再發(fā)明顯膽道出血,開放球囊擴(kuò)張器壓迫出血膽管,壓迫2 h后減壓0.5 h,如此反復(fù)交替進(jìn)行。4例均用球囊擴(kuò)張器壓迫止血成功,其中1例止血后5 d再次出血,仍用同法止血。11例患者全部存活。結(jié)論 肝膽管結(jié)石并發(fā)的肝內(nèi)膽道出血,行手術(shù)止血后可能再發(fā)出血; 于出血部位預(yù)置膽道球囊擴(kuò)張器使得術(shù)后出血的治療簡單、有效,可作為膽道再出血的防治措施之一。