目的 觀察逆轉(zhuǎn)錄病毒及睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)誘導的成人視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）細胞轉(zhuǎn)分化過程中的形態(tài)特征與標志物變化。 方法 成人RPE細胞經(jīng)攜帶綠色熒光蛋白(GFP)基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后，進一步用脂質(zhì)體介導CNTF 表達質(zhì)粒進行轉(zhuǎn)染.倒置熒光顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化,酶聯(lián)免疫吸附實驗、免疫組織化學染色及Western blotting方法檢測細胞產(chǎn)生和分泌CNTF的能力、CNTF受體(CNTFR)、多種神經(jīng)細胞標志物及信號傳導分子一類蛋白酪氨酸激酶（JAK）的表達水平。 結(jié)果 體外培養(yǎng)的成人RPE細胞經(jīng)GFP逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后，RPE細胞的形態(tài)無明顯變化，但開始表達神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞的某些標志物，如神經(jīng)絲蛋白(NF)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)；經(jīng)CNTF表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，持續(xù)高水平表達CNTF的RPE細胞出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細胞分化,CNTFR的表達量雖無明顯變化，但其分布發(fā)生改變，主要分布在細胞膜上; 此外，信號傳導分子JAK表達明顯上調(diào)。 結(jié)論 體外培養(yǎng)的成人RPE細胞在逆轉(zhuǎn)錄病毒及CNTF的影響下可出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細胞形態(tài)分化，轉(zhuǎn)分化與CNTF-CNTFR-JAK信號傳導通路有關。 (中華眼底病雜志，2006，22：400-403）
目的 建立胚胎及成人視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞體外培養(yǎng)系統(tǒng)，為視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞的基礎研究與藥物開發(fā)提供實驗模型。 方法 10～13周齡胎兒及20～40歲成人視網(wǎng)膜神經(jīng)層用不同的酶進行消化，分散的細胞接種于預先經(jīng)過包被的細胞培養(yǎng)盤內(nèi)，加入或不加入表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)、成纖維細胞生長因子(fibroblast growth factor, FGF)、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brainderived neurotrophic factor, BDNF)、神經(jīng)營養(yǎng)素4(neurotrophic-4，NT-4)等培養(yǎng)。通過BrdU摻入、免疫組織化學及免疫熒光等方法檢測培養(yǎng)細胞增殖并辨別細胞成分。 結(jié)果 胚胎及成人視網(wǎng)膜細胞可在體外連續(xù)培養(yǎng)100及180 d以上。加入EGF、FGF、BDNF或NT-4可明顯促進胚胎與成人視網(wǎng)膜神經(jīng)元存活，胎兒視網(wǎng)膜細胞增殖。與對照組相比，處理組神經(jīng)元或神經(jīng)節(jié)細胞的百分率較高。 結(jié)論 胚胎及成人視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞培養(yǎng)技術(shù)為視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞基礎研究及藥物開發(fā)提供了一種十分有價值的手段，加入外源性的生長因子可促進培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞存活、增殖與分化。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 279-282)
目的系統(tǒng)評價靜脈注射免疫球蛋白（IVIG）治療中國重癥手足口病患兒的療效。 方法計算機檢索CNKI、CBM、WanFang Data、PubMed和The Cochrane Library（2015年第2期）數(shù)據(jù)庫，搜集在常規(guī)治療的基礎上給予IVIG治療（IVIG組）與單純常規(guī)治療（對照組）比較治療中國重癥手足口病患兒的相關隨機對照試驗（RCT），檢索時限均從建庫至2015年3月。由2位評價員獨立篩選文獻、提取資料并評價納入研究的偏倚風險后，采用RevMan 5.3和Stata 9.0軟件進行Meta分析。 結(jié)果共納入23個RCT，包括2271例患兒。Meta分析結(jié)果顯示：IVIG組的總有效率明顯高于對照組［RR=1.18，95%CI（1.11，1.26），P＜0.00001］，患兒的退熱時間［MD=-1.47，95%CI（-1.80，-1.15），P＜0.00001］、皮疹消退時間［MD=-1.61，95%CI（-2.51，-0.71），P=0.0005］、神經(jīng)癥狀緩解時間［MD=-2.14，95%CI（-3.02，-1.25），P＜0.00001］、口腔潰瘍消退時間［MD=-1.36, 95%CI（-2.27，-0.44），P=0.004］和平均住院時間［MD=-2.46，95%CI（-3.29，-1.63），P＜0.00001］均明顯短于對照組，且差異均有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論在常規(guī)治療的基礎上給予IVIG治療較單用常規(guī)治療可以提高中國重癥手足口病患兒治療的療效。但受納入研究質(zhì)量的限制，本研究結(jié)論尚需開展更多高質(zhì)量的RCT進行驗證。
目的 探討西地那非聯(lián)合波生坦治療結(jié)締組織病相關中重度肺動脈高壓（CTD-MS-PAH）的臨床療效及安全性。 方法 收集 2013 年 1 月至 2017 年 1 月在湖北醫(yī)藥學院附屬人民醫(yī)院及太和醫(yī)院就診的 CTD-MS-PAH 患者 76 例，分層隨機分為 A 組（41 例）和 B 組（35 例）。A 組給予西地那非片 25 mg，3 次/d；B 組給予西地那非片 25 mg 聯(lián)合波生坦片 62.5 mg，均為 2 次/d。治療 12 周后，將兩組患者治療前后的 6 分鐘步行距離（6MWD）、Borg 呼吸困難指數(shù)評分、肺動脈收縮壓（PASP）、右心室前后徑（RVD）、血清腦鈉肽（BNP）、動脈氧分壓（PaO2）、血壓、心率、肝腎功指標進行比較。 結(jié)果 與治療前比較，治療后 A、B 兩組患者 6MWD 延長，Borg 呼吸困難指數(shù)評分降低，PASP、RVD、BNP 下降，PaO2 升高（均 P<0.05），但 B 組指標改善程度更優(yōu)（均P<0.05），差異均有統(tǒng)計學意義。A、B 兩組治療前后的血壓、心率、肝腎功能均無顯著差異（均P>0.05）。 結(jié)論 西地那非聯(lián)合波生坦能顯著降低肺動脈壓，有效改善 CTD-MS-PAH 患者的心肺功能，且具有較好的安全性。
目的 研究HERG在CD1小鼠膽囊組織及膽囊Cajal間質(zhì)細胞（interstitial cells of Cajal,ICC）中的表達及其意義。 方法 采用免疫組化方法及Western blot法檢測CD1小鼠膽囊組織中HERG蛋白的表達； RT-PCR法檢測膽囊組織中HERG mRNA的表達； 雙重免疫熒光標記法檢測急性分離膽囊ICC中HERG蛋白的表達。結(jié)果 免疫組化結(jié)果顯示，HERG在CD1小鼠膽囊組織的細胞漿中呈黃色或棕黃色陽性反應，主要表達于膽囊黏膜層； RT-PCR法檢測結(jié)果顯示，CD1小鼠膽囊組織中HERG mRNA陽性表達； Western blot檢測結(jié)果顯示，CD1小鼠膽囊組織中HERG蛋白陽性表達； 雙重免疫熒光標記法檢測結(jié)果顯示，CD1小鼠膽囊ICC 中 HERG蛋白陽性表達。結(jié)論 CD1小鼠膽囊組織以及膽囊ICC中均存在HERG的表達，HERG可能與ICC起搏功能有關。
視網(wǎng)膜色素變性（RP）是一組視網(wǎng)膜光感受器異常導致的遺傳性致盲眼底疾病。RP在遺傳和臨床表型上具有高度異質(zhì)性，可分為單純型RP和綜合征型RP。主要遺傳方式為常染色體顯性、常染色隱性及伴X連鎖遺傳。隨著基因測序技術(shù)的普及和臨床應用，越來越多的致病基因被發(fā)現(xiàn)，這些基因主要在光感受器細胞及視網(wǎng)膜色素上皮細胞表達。深入正確認識RP致病基因，不僅為RP診斷和遺傳咨詢提供理論基礎，還可為RP基因治療提供指導。