• 上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;

目的 觀察逆轉(zhuǎn)錄病毒及睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)誘導(dǎo)的成人視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化過程中的形態(tài)特征與標(biāo)志物變化。 方法 成人RPE細(xì)胞經(jīng)攜帶綠色熒光蛋白(GFP)基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后,進(jìn)一步用脂質(zhì)體介導(dǎo)CNTF 表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)染.倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、免疫組織化學(xué)染色及Western blotting方法檢測細(xì)胞產(chǎn)生和分泌CNTF的能力、CNTF受體(CNTFR)、多種神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物及信號傳導(dǎo)分子一類蛋白酪氨酸激酶(JAK)的表達(dá)水平。 結(jié)果 體外培養(yǎng)的成人RPE細(xì)胞經(jīng)GFP逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后,RPE細(xì)胞的形態(tài)無明顯變化,但開始表達(dá)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的某些標(biāo)志物,如神經(jīng)絲蛋白(NF)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP);經(jīng)CNTF表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后,持續(xù)高水平表達(dá)CNTF的RPE細(xì)胞出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞分化,CNTFR的表達(dá)量雖無明顯變化,但其分布發(fā)生改變,主要分布在細(xì)胞膜上; 此外,信號傳導(dǎo)分子JAK表達(dá)明顯上調(diào)。 結(jié)論 體外培養(yǎng)的成人RPE細(xì)胞在逆轉(zhuǎn)錄病毒及CNTF的影響下可出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)分化,轉(zhuǎn)分化與CNTF-CNTFR-JAK信號傳導(dǎo)通路有關(guān)。 (中華眼底病雜志,2006,22:400-403)

引用本文: 李惠明,吳繼紅,徐萍,黃倩. 逆轉(zhuǎn)錄病毒及睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子聯(lián)合誘導(dǎo)成人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化成為神經(jīng)細(xì)胞. 中華眼底病雜志, 2006, 22(6): 400-403. doi: 復(fù)制

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