【摘 要】 目的 以PLGA 和膠原海綿為載體，分別復(fù)合rhBMP-2，比較兩者修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 將PLGA和膠原海綿制成直徑4 mm、厚3 mm的圓柱形，分別與0.5 mg rhBMP-2 復(fù)合。2 月齡新西蘭兔24 只，雌雄不拘，體重1.8 ～ 2.3 kg，平均2.0 kg。于24 只兔雙側(cè)股骨髁部制造直徑4 mm 的缺損，其中18 只動(dòng)物右側(cè)缺損處植入PLGA/rhBMP-2 復(fù)合物（實(shí)驗(yàn)1 組），左側(cè)缺損處植入膠原海綿/rhBMP-2 復(fù)合物（實(shí)驗(yàn)2 組） ；余6 只動(dòng)物（12 個(gè)膝關(guān)節(jié)）缺損不作任何處理，作為空白對(duì)照組。術(shù)后4、12 和24 周取材，行大體及組織學(xué)觀察，并根據(jù)關(guān)節(jié)軟骨半定量評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)評(píng)分。 結(jié)果 大體及組織學(xué)觀察：4 周，實(shí)驗(yàn)1 組缺損內(nèi)被半透明組織填充；實(shí)驗(yàn)2 組缺損未被新生組織填滿，兩組形成的軟骨組織與周圍界限明顯, 軟骨細(xì)胞分布較均一，排列無(wú)方向性；對(duì)照組中形成少量纖維組織。12 周，實(shí)驗(yàn)1 組缺損內(nèi)完全充填白色半透明新生軟骨組織，與正常軟骨界限不清；實(shí)驗(yàn)2 組缺損內(nèi)形成白色半透明軟骨組織，與周圍正常軟骨界限仍可辨認(rèn)；兩組新生軟骨厚度逐漸接近正常軟骨厚度，表面細(xì)胞平行排列，深層細(xì)胞排列較紊亂，基質(zhì)異染，軟骨下骨及潮線恢復(fù)，與正常軟骨連接良好；對(duì)照組缺損邊緣及底部形成少量軟骨細(xì)胞，分布不均勻，底部纖維組織不連續(xù)。24 周，實(shí)驗(yàn)1 組缺損內(nèi)形成半透明新生軟骨組織，與正常軟骨界限消失；實(shí)驗(yàn)2 組形成的新生軟骨組織顏色、質(zhì)地與12 周接近；兩組新生軟骨與正常軟骨厚度相近，表面平整，細(xì)胞排列均一，但較紊亂，基質(zhì)異染，軟骨下骨及潮線恢復(fù)，與正常軟骨連接良好；對(duì)照組缺損底部形成一層纖維組織，不連續(xù)。組織學(xué)評(píng)分：實(shí)驗(yàn)1 組、實(shí)驗(yàn)2 組與對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）；兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組12、24 周與4 周比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），但12 周和24 周比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；同一時(shí)間點(diǎn)兩實(shí)驗(yàn)組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 PLGA 和膠原海綿與rhBMP-2 復(fù)合均可修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損。
目的 以聚乳酸／聚羥基乙酸（poly-lactide-co-glycolide，PLGA）為載體，探討重組人骨形成蛋白2（recombinant human bone morphogenetic protein 2, rhBMP-2）在關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)方面的作用及可行性。方法 將PLGA制成直徑4 mm，厚3 mm的圓柱形，與rhBMP-2復(fù)合（0.5 mg/塊），制備PLGA-rhBMP-2復(fù)合物。選取2月齡新西蘭兔，抽取骨髓行原代及傳代培養(yǎng)，調(diào)整細(xì)胞密度為2×10.7/ml，與PLGA共培養(yǎng)24 h，制備PLGA細(xì)胞復(fù)合物。另取2月齡新西蘭兔72只，于雙側(cè)髕股關(guān)節(jié)股骨髁部制備直徑4 mm、深達(dá)髓腔的缺損。其中36只兔右側(cè)缺損處植入PLGA-rhBMP-2復(fù)合物，為實(shí)驗(yàn)組；左側(cè)植入PLGA，為單純載體組；另36只兔左側(cè)缺損不作任何處理，為空白對(duì)照組，右側(cè)缺損處植入PLGA-細(xì)胞復(fù)合物，作為細(xì)胞組。術(shù)后4、8、12、24、36和48周取材，行大體、組織學(xué)觀察以及組織學(xué)評(píng)分。結(jié)果術(shù)后動(dòng)物均存活。術(shù)后4周，實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組缺損內(nèi)被半透明組織填充，觸之柔軟，表面較光滑，軟骨細(xì)胞周圍基質(zhì)異染弱，新生軟骨厚度較正常軟骨厚；空白對(duì)照組和單純載體組未見明顯組織形成。8周，實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組內(nèi)新生組織呈白色，半透明，質(zhì)較韌，表面平整，與周圍正常軟骨界限模糊；新生軟骨細(xì)胞分布均一，但仍較正常軟骨厚，PLGA已大部分降解，僅遺留少量顆粒；單純載體組和空白對(duì)照組缺損明顯，底部形成少量白色膜狀組織。12、24周，實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組缺損內(nèi)完全充填白色半透明新生軟骨組織，質(zhì)韌，表面平整，與正常軟骨界限消失，厚度接近正常軟骨，與正常軟骨連接良好，表面細(xì)胞平行排列，深層有縱向排列的傾向，呈團(tuán)狀，陷窩形成，但有別于正常軟骨細(xì)胞；單純載體組和空白對(duì)照組缺損邊緣及底部形成少量軟骨細(xì)胞，大部分為纖維組織。 36、48周，實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組新生軟骨組織色稍發(fā)白，表面連續(xù)，欠平整，與正常軟骨界限消失，未見滑膜增生; 新生軟骨厚度較正常軟骨薄，軟骨細(xì)胞周圍基質(zhì)異染較弱；單純載體組及空白對(duì)照組缺損仍存在，但較以前縮小，基底形成纖維組織，髁部可見部分軟骨面不平整、剝脫，部分軟骨下骨外露，滑膜增厚。組織學(xué)評(píng)分，實(shí)驗(yàn)組和細(xì)胞組術(shù)后12、24周分別與4、 8和48周比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組、細(xì)胞組分別與單純載體組和空白對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），實(shí)驗(yàn)組與細(xì)胞組在各時(shí)間點(diǎn)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 PLGA-rhBMP-2復(fù)合物在降解過(guò)程中釋放出rhBMP-2，rhBMP-2作用于缺損局部的骨髓基質(zhì)細(xì)胞，誘導(dǎo)其向軟骨細(xì)胞分化，從而修復(fù)軟骨缺損；此方法簡(jiǎn)便易行，有實(shí)用價(jià)值，有望成為治療軟骨缺損的一種新方法。