目的 通過研究p53、K-ras及APC在大腸癌組織及糞便中的突變情況，探討糞便多基因聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行大腸癌二級(jí)篩查的可行性。方法 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性（PCR-SSCP）分析及硝酸銀染色法，檢測(cè)40例大腸癌患者的腫瘤組織與糞便及40例正常人腸黏膜組織與糞便中p53、K-ras及APC 3種基因的突變情況，并比較多個(gè)基因聯(lián)合檢測(cè)與單基因檢測(cè)基因突變率的靈敏性之間的差異。結(jié)果?、?0例大腸癌組織中p53、K-ras及APC基因突變率分別為57.50%、50.00%及60.00%，糞便中相應(yīng)的基因突變率分別為42.86%、40.00%及51.43%，糞便基因突變與組織中相應(yīng)基因突變的符合率分別為65.22%、70.00%及75.00%。40例正常腸黏膜組織及糞便中3種基因均未檢出突變； ②3種基因聯(lián)合檢測(cè)的突變率明顯高于單基因檢測(cè)（P＜0.05）； ③糞便基因聯(lián)合檢測(cè)與糞便隱血試驗(yàn)比較，靈敏性之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但前者的特異性明顯高于后者(P＜0.05)。結(jié)論 糞便基因聯(lián)合檢測(cè)診斷大腸癌的靈敏性及特異性均較高，有望作為一種無創(chuàng)、特異、有效的篩查手段，與糞便隱血試驗(yàn)結(jié)合序貫進(jìn)行大腸癌的篩查。
目的 探討磷酸化的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(p-roTOR)在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC) 中的表達(dá)及其對(duì)預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。方法 運(yùn)用免疫組織化學(xué)EnVision法檢測(cè)59例NSCLC肺癌組織和10例非肺癌組織(3例肺結(jié)核和7例炎性假瘤)中p-mTOR蛋白的表達(dá)。結(jié)果 p-mTOR在肺 良性疾病組均為陰性，在NSCLC組織中表達(dá)的陽性率為40.7％，顯著高于肺良性疾病組（χ2=6.237，P=0.013）；p-mTOR在NSCLC組織中的表達(dá)與性別、年齡和pTNM分期有關(guān)，而與其他臨床 病理參數(shù)(腫瘤大小、病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況)無明顯相關(guān)性。Kaplan-Meire生存分析顯示， p-mTOR與生存期無明顯相關(guān)(Log rank檢驗(yàn)P=0.055)。結(jié)論 檢測(cè)p-mTOR有助于肺部良惡性疾病的鑒別，單獨(dú)p-mTOR不能作為判斷NSCLC預(yù)后的參考指標(biāo)。
目的 探討小鼠感染肺炎衣原體后肺組織TOLL 樣受體( TLR) 2 的基因表達(dá)變化及其信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制。方法 TLR4 基因缺失小鼠( C3H/HeJ) 96 只, 隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、SB203580 組和PDTC 組, 每組24 只。每組分別按1、4、7、14 d 各分4 個(gè)小組, 每小組6 只。對(duì)照組鼻內(nèi)接種二磷酸蔗糖( 2sp) 緩沖液, 模型組和干預(yù)組均給予約4. 0 ×106 IFU/mL( 0. 04 mL) 的肺炎衣原體鼻內(nèi)接種,SB203580 組和PDTC 組在接種完肺炎衣原體后分別立即腹腔注射相應(yīng)的p38 蛋白激酶( p38MAPK)抑制劑SB203580 ( 100 mg/ kg ) 或核因子κB ( NF-κB) 抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸( PDTC)( 50 mg/kg) 。分別于接種后第1、4、7 及14 d 處死小鼠, RT-PCR 法檢測(cè)肺組織TLR2 mRNA 的表達(dá),ELISA 法測(cè)定肺組織勻漿腫瘤壞死因子α( TNF-α) 的含量, 同時(shí)觀察肺組織病理變化。結(jié)果 小鼠感染肺炎衣原體后肺組織TLR2 mRNA 表達(dá)迅速升高, 以第4 d 和第7 d 明顯, 14 d 以后開始下降。PDTC 早期干預(yù)可在一定程度上抑制肺臟組織TLR2 mRNA 表達(dá), 并在感染高峰期抑制明顯。SB203580 對(duì)小鼠肺組織TLR2 mRNA 表達(dá)也有明顯抑制。感染肺炎衣原體后, 肺組織TNF-α表達(dá)水平顯著高于正常組, SB203580 和PDTC 對(duì)小鼠肺組織TNF-α表達(dá)均有抑制作用, SB203580 對(duì)TNF-α的抑制作用強(qiáng)于PDTC。結(jié)果 小鼠感染肺炎衣原體后, 可引起TLR2 表達(dá)的增加。對(duì)p38MAPK 和 NF-κB 的干預(yù)均影響TLR2 的表達(dá)以及炎癥介質(zhì)的釋放, 提示肺炎衣原體可能是通過TLR2 /MAPK 和TLR2 /NF-κB 通路導(dǎo)致肺部炎癥反應(yīng)。
目的 觀察給予己酮可可堿( PTX) 預(yù)處理對(duì)失血性休克致急性肺損傷( ALI) 小鼠的影響, 初步探討PTX 的作用機(jī)制。方法 小鼠分為對(duì)照組、失血性休克組及PTX 組。通過肺組織HE染色觀察病理改變, 同時(shí)檢測(cè)肺干濕比( W/D) 和髓過氧化物酶( MPO) 活性。通過ELISA 方法檢測(cè)肺組織腫瘤壞死因子α( TNF-α) 和IL-1β變化, 通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)( RT-PCR) 檢測(cè)肺組織Toll 樣受體4( TLR4) mRNA 的表達(dá), 通過Western blot 檢測(cè)肺組織TLR4 蛋白的變化。結(jié)果 失血性休克誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生ALI, 肺W/D 和MPO 活性明顯增加, TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA 和TLR4 蛋白表達(dá)也增高, 與對(duì)照組有顯著性差異( P lt; 0. 01) 。PTX 預(yù)處理能減輕失血性休克所致ALI, 降低肺W/D 和MPO 活性, 同時(shí)導(dǎo)致TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA 和TLR4 蛋白表達(dá)下降。結(jié)論 PTX 預(yù)處理對(duì)失血性休克所致ALI 起保護(hù)作用, 可能與通過下調(diào)TLR4 抑制促炎癥因子表達(dá)有關(guān)。
目的 探討噻托溴銨吸入劑對(duì)穩(wěn)定期D 組慢性阻塞性肺疾病( COPD) 患者臨床癥狀及肺功能的改善作用。方法 62 例穩(wěn)定期D 組COPD 患者隨機(jī)分為治療組32 例, 給予噻托溴銨吸入劑( 18 μg, 吸入,1 次/d) 聯(lián)合沙美特羅/ 丙酸氟替卡松吸入劑( 50 μg/500 μg, 吸入, 2 次/d) 治療; 對(duì)照組30 例, 給予沙美特羅/ 丙酸氟替卡松( 50 μg /500 μg, 吸入, 2 次/d) 治療。觀察患者治療前、治療后8、24、48 周運(yùn)動(dòng)耐量、呼吸困難評(píng)分的變化及治療前、治療后1、8、24、48 周后肺功能變化。結(jié)果 治療8 周、24 周、48 周后兩組6 min 步行距離( 6MWD) 值均較治療前明顯增加, 呼吸困難評(píng)分( MRC)均較治療前顯著下降( P lt;0. 05) , 而治療組中各項(xiàng)指標(biāo)改善顯著優(yōu)于對(duì)照組( P lt; 0. 05) 。治療1 周、8 周后兩組FVC、FEV1 和FEV1% pred 值均較治療前明顯增加( P lt; 0. 05) , 治療組指標(biāo)改善顯著優(yōu)于對(duì)照組( P lt;0. 05) 。24 周、48 周治療組上述指標(biāo)仍顯著高于治療前( P lt;0. 05) , 而對(duì)照組與治療前比較無顯著差異, 治療組與對(duì)照組比較有顯著性差異。結(jié)論 噻托溴銨與沙美特羅/ 氟替卡松聯(lián)合吸入治療穩(wěn)定期D 組COPD 患者, 優(yōu)于沙美特羅/ 丙酸氟替卡松單藥吸入治療。
目的 觀察抗凝血酶Ⅲ對(duì)油酸誘導(dǎo)急性肺損傷大鼠的肺保護(hù)作用, 并探討相關(guān)機(jī)制。方法 60 只清潔級(jí)雄性SD 大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組、急性肺損傷組、抗凝血酶Ⅲ 治療組、抗凝血酶Ⅲ聯(lián)合肝素治療組和肝素治療組。油酸( 0. 2 mL/kg) 靜脈注射建立急性肺損傷大鼠模型。改良Smith 肺損傷病理評(píng)分法評(píng)價(jià)肺損傷程度, 發(fā)色底物法測(cè)定血漿中抗凝血酶Ⅲ的活性, 比重法測(cè)定肺組織血管外肺水( EVLW) 和肺組織濕/ 干重比( W/D) , 單核素示蹤技術(shù)測(cè)定肺微血管白蛋白通透性( Palb ) , 酶聯(lián)免疫吸附法( ELISA) 測(cè)定血清中腫瘤壞死因子α( TNF-α) 、白細(xì)胞介素6( IL-6)和血管假性血友病因子( vWF) 含量, 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)肺組織細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶( ERK) 1/2、P38絲裂原活化蛋白激酶( P38 MAPK) 和c-jun氨基端激酶( JNK) 磷酸化蛋白表達(dá)。結(jié)果 ( 1) 正常對(duì)照組Smith肺損傷病理評(píng)分為( 0. 67 ±0. 52) 分, 顯著低于急性肺損傷組( 11. 76 ±2. 23) 、抗凝血酶Ⅲ治療組( 10. 98 ±3. 42) 、抗凝血酶Ⅲ 聯(lián)合肝素治療組( 12. 07 ±1. 83) 和肝素治療組( 12. 54 ±3. 78)( P 均lt;0. 01) 。急性肺損傷組Smith 肺損傷病理評(píng)分與各治療組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P gt;0. 05) 。( 2) 各組間血漿抗凝血酶Ⅲ的活性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P 均gt;0. 05) 。( 3) 急性肺損傷組Palb 為0. 50 ±0. 07, 顯著高于正常對(duì)照組( 0. 20 ±0. 02, P lt;0. 01) , 與抗凝血酶Ⅲ治療組( 0. 47 ±0. 12) 、抗凝血酶Ⅲ聯(lián)合肝素治療組( 0. 46 ±0. 08) 和肝素治療組( 0. 48 ±0. 06) 相比, 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P gt; 均0. 05) 。( 4) 急性肺損傷組EVLW 為( 1. 14 ±0. 12) mL/kg, 顯著高于正常對(duì)照組[ ( 0. 69 ±0. 04) mL/kg, P lt;0. 01] , 與抗凝血酶Ⅲ治療組[ ( 1. 12 ±0. 21) mL/kg] 、抗凝血酶Ⅲ聯(lián)合肝素治療組[ ( 1. 08 ±0. 13) mL/kg]和肝素治療組[ ( 1. 14 ±0. 20) mL/kg] 相比, 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P 均gt; 0. 05) 。( 5) 急性肺損傷組TNF-α和IL-6 的含量分別為( 1. 613 ±0. 238) μg/L 和( 0. 685 ±0. 129) ng/mL, 顯著高于正常對(duì)照組[ ( 0. 506 ±0. 093) μg/L 和( 0. 233 ±0. 047) ng/mL, P 均lt; 0. 01] 、抗凝血酶Ⅲ 治療組[ ( 0. 972 ±0. 287) μg/L和( 0. 476 ±0. 097) ng/mL, P 均lt;0. 01] 和肝素治療組[ ( 0. 952 ±0. 122) μg/L 和( 0. 465 ±0. 103) ng/mL, P 均lt;0. 01] 。( 6) 急性肺損傷組血漿中vWF 的含量為( 32. 48 ±4. 84) U/L, 顯著高于正常對(duì)照組[ ( 14. 05 ±3. 02) U/L, P lt;0. 01] , 與抗凝血酶Ⅲ治療組[ ( 31. 50 ±9. 19) U/L] 、抗凝血酶Ⅲ聯(lián)合肝素治療組[ ( 32. 26 ±5. 42) U/L] 和肝素治療組[ ( 31. 83 ±8. 23) U/L] 相比, 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P 均gt;0. 05) 。( 7) 急性肺損傷組肺組織ERK1/2、P38 MAPK 的磷酸化表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組, 與抗凝血酶Ⅲ治療組、抗凝血酶Ⅲ合并肝素治療組和肝素治療組相比無明顯差異。各組間JNKMAPK磷酸化表達(dá)無明顯差異。結(jié)論 抗凝血酶Ⅲ雖降低血漿中TNF-α及IL-6 表達(dá), 但對(duì)ERK1/2和P38 MAPK 磷酸化表達(dá)無明顯的影響, 未能明顯減輕肺水腫和降低肺微血管白蛋白通透性, 對(duì)油酸誘導(dǎo)急性肺損傷大鼠無明顯的肺保護(hù)作用。
本文報(bào)道了3例在東部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院接受新輔助免疫治療聯(lián)合體部立體定向放療的Ⅲ/N2期非小細(xì)胞肺癌患者的臨床結(jié)局，其中男2例、女1例，平均年齡65.7歲。患者在接受體部立體定向放療1周后接受了2劑程序性細(xì)胞死亡蛋白-1抑制劑特瑞普利單抗治療，并計(jì)劃在第2次給藥后4～6周進(jìn)行手術(shù)。1例患者達(dá)到完全病理學(xué)緩解，1例患者達(dá)到主要病理學(xué)緩解，1例患者殘留20%腫瘤，未達(dá)到主要病理學(xué)緩解。特瑞普利單抗聯(lián)合體部立體定向放療作為新輔助治療副作用少，且治療沒有造成手術(shù)延誤。
目的 探討核因子κB 圈套寡核苷酸( NF-κB decoy ODN) 轉(zhuǎn)染對(duì)小鼠成熟樹突狀細(xì)胞( DCs) 生物學(xué)特性的影響。方法 體外誘導(dǎo)Balb/c 小鼠骨髓細(xì)胞生成未成熟DCs( imDCs) , 經(jīng)抗原 OVA 以及LPS孵育后成為OVA 沖擊的骨髓來源成熟DCs( mDCs) , 流式細(xì)胞儀檢測(cè)DCs 表面分子CD11c 以及MHC-Ⅱ的表達(dá)予以鑒定; 將NF-κB decoy ODN 體外轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源成熟DCs, 同時(shí)設(shè)立陰性對(duì)照組( 轉(zhuǎn)染NF-κB“變異”O(jiān)DN) 以及未轉(zhuǎn)染組, EMSA 檢測(cè)轉(zhuǎn)染后NF-κB 的活性變化; 流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組DCs 表面共刺激分子( CD40、CD80、CD86) 的表達(dá); 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)觀察各組DCs 對(duì)OVA 致敏的T淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果 成功培養(yǎng)出骨髓來源成熟DCs; NF-κB decoy ODN 轉(zhuǎn)染DCs 的NF-κB活性明顯降低( P lt;0. 05) , DCs 表面CD40、CD80 共刺激分子的表達(dá)與陰性對(duì)照組、未轉(zhuǎn)染組比較無明顯改變( P gt; 0. 05) , 而CD86 的表達(dá)與其他各組比較明顯降低( P lt;0. 05) ; 在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中,NF-κB decoy ODN轉(zhuǎn)染DCs 對(duì)T細(xì)胞的增殖有抑制作用( P lt; 0.05) , 而陰性對(duì)照組與未轉(zhuǎn)染組的DCs具有強(qiáng)烈的激發(fā)T細(xì)胞增殖的能力( P lt; 0. 05) 。結(jié)論 NF-κB decoy ODN 轉(zhuǎn)染DCs 可能通過CD86 的表達(dá)降低顯著抑制抗原特異性T細(xì)胞活化, 該改良的DCs 有可能用于哮喘的免疫治療。