目的 探索轉(zhuǎn)染hVEGF165 基因、人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(human stromal cell-derived factor 1α,hSDF- 1α)基因的大鼠成肌細(xì)胞在體外mRNA 和蛋白表達(dá),為進(jìn)一步檢測這兩種基因?qū)ρ苌傻膮f(xié)同效應(yīng)奠定基礎(chǔ)。 方法 取新生1 日齡雄性SD 大鼠,采用胰蛋白酶消化法體外分離培養(yǎng)、純化成肌細(xì)胞,并采用結(jié)蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定。將質(zhì)粒增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)-hVEGF165 和EGFP-hSDF-1α 轉(zhuǎn)染第3 代成肌細(xì)胞(轉(zhuǎn)染組),以未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的細(xì)胞作為對照組。體外培養(yǎng)后各時間點(diǎn)行RT-PCR、Western blot、ELISA 法檢測兩種質(zhì)粒mRNA 及蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)鑒定確定為成肌細(xì)胞。熒光顯微鏡觀察示成功轉(zhuǎn)染hSDF- 1α和hVEGF165 進(jìn)入成肌細(xì)胞,可見綠色熒光表達(dá)。RT-PCR 檢測示轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染后2、4、6、8 d 均可見hVEGF165 和hSDF- 1αmRNA 的表達(dá),Western blot 檢測示轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染后2、4、6、8 d 成肌細(xì)胞內(nèi)均有hVEGF165 和hSDF-1α 蛋白表達(dá),對照組均無相關(guān)表達(dá)。ELISA 檢測示對照組hSDF-1α 和hVEGF165 均穩(wěn)定表達(dá),呈較低水平。轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染2 d 時hSDF-1α 和hVEGF165 表達(dá)均達(dá)較高水平,之后呈逐漸下降趨勢;轉(zhuǎn)染后各時間點(diǎn)間hSDF-1α 和hVEGF165 表達(dá)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染后各時間點(diǎn)與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 轉(zhuǎn)染hSDF-1α 和hVEGF165 進(jìn)入大鼠成肌細(xì)胞后在體外均有表達(dá),為下一步研究體內(nèi)是否表達(dá)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
目的 系統(tǒng)評價鎳鈦拉簧和彈力橡皮鏈關(guān)閉拔牙間隙的有效性和安全性。方法 計算機(jī)檢索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、CBM、CNKI和VIP,檢索時限截至2012年2月,查找以上述兩種方式關(guān)閉拔牙間隙的RCT。由兩位研究者按照納入與排除標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立篩選文獻(xiàn)、提取資料并評價納入研究的方法學(xué)質(zhì)量后,采用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。結(jié)果 共納入4個RCT,122例患者。Meta分析結(jié)果顯示:鎳鈦拉簧和彈力橡皮鏈在關(guān)閉拔牙間隙速度上差異有統(tǒng)計學(xué)意義[MD=0.30,95%CI(0.17,0.44),Plt;0.000 1];亞組分析提示,無論是方法學(xué)質(zhì)量較高亞組[MD=0.20,95%CI(0.07,0.34),P=0.003]還是方法學(xué)質(zhì)量較低亞組[MD=0.40,95%CI(0.30,0.50),Plt;0.000 01],兩組在關(guān)閉拔牙間隙速度方面差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 當(dāng)前臨床證據(jù)表明,鎳鈦拉簧在關(guān)閉拔牙間隙速度方面優(yōu)于彈力橡皮鏈,但其遠(yuǎn)期效果尚需更大樣本的隨機(jī)對照試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。