目的 探討不同劑量X線照射對人結直腸癌Caco2細胞系中microRNA-221 （miR-221）和張力蛋白在10號染色體上同源缺失的磷酸酶（PTEN）表達的影響。方法 常規(guī)培養(yǎng)Caco2細胞系并分為5組，分別給予不同劑量（0、2、4、6及8 Gy） 的X射線照射，24 h后提取細胞總RNA和蛋白質(zhì)，應用real-time RT-PCR方法檢測Caco2細胞中miR-221和PTEN mRNA的表達水平，用Western-blot法檢測PTEN蛋白的表達水平。結果 Caco2細胞系在不同劑量的X線照射下，其miR-221表達水平隨著照射劑量的增加而增高，呈劑量依賴性（P＜0.01）；PTEN mRNA的表達水平無明顯變化（P＞0.05），但PTEN蛋白表達水平則隨X線照射劑量的增加而逐漸降低，亦呈劑量依賴效應（P＜0.01）。結論 X線照射劑量可影響結直腸癌Caco2細胞中miR-221和PTEN蛋白的表達。
目的研究大鼠坐骨神經(jīng)損傷后近、遠側斷端組織中微小 RNA-221（microRNA-221，miR-221）以及磷酸酶與張力蛋白同源物（phosphatase and tension protein homologue，PTEN）的表達情況，及其與周圍神經(jīng)損傷修復的相關性，以期為臨床診治周圍神經(jīng)損傷提供新靶點。方法取 SPF 級雄性 SD 大鼠 96 只建立坐骨神經(jīng)損傷模型，分別于術后 0（術后即刻）、1、4、7 d 處死 24 只大鼠，無菌條件下取坐骨神經(jīng)近、遠側斷端組織。實時熒光定量 PCR 檢測 miR-221 表達，Western blot、免疫熒光染色檢測 PTEN 蛋白表達，采用雙熒光素酶報告基因驗證 miR-221 與 PTEN 的調(diào)控關系；同時結合透射電鏡觀察神經(jīng)組織超微結構。結果實時熒光定量 PCR、Western blot 及免疫熒光染色檢測示，術后大鼠坐骨神經(jīng)近、遠側斷端組織中 miR-221 相對表達量均逐漸增加，PTEN 蛋白相對表達量均逐漸減少，術后各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。術后 1、4、7 d 近側斷端 miR-221 相對表達量均顯著高于遠側斷端，PTEN 蛋白相對表達量均顯著低于遠側斷端，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。雙熒光素酶報告基因示 PTEN 為 miR-221 作用靶點。透射電鏡觀察示隨術后時間延長，雪旺細胞增殖及軸突、髓鞘潰變逐漸增加；術后 1 d 近、遠側斷端無明顯差異，4、7 d 時近側斷端雪旺細胞增殖較遠側斷端增多，軸突、髓鞘潰變程度降低。結論大鼠坐骨神經(jīng)損傷后，miR-221 表達上調(diào)，靶向調(diào)控 PTEN 表達降低，進而產(chǎn)生近、遠側斷端 miR-221 及 PTEN 表達差異，這一現(xiàn)象可能對促進周圍神經(jīng)損傷后修復發(fā)揮一定作用。