【摘 要】 目的 探討人羊水來(lái)源c-kit+ 間充質(zhì)干細(xì)胞（c-kit+ human amniotic fluid-derived mesenchymal stemcells，c-kit+ HAFMSCs）的生物學(xué)特征及心肌誘導(dǎo)分化能力。 方法 通過(guò)產(chǎn)前診斷或自愿引產(chǎn)獲取50 份孕中期羊水標(biāo)本，經(jīng)流式細(xì)胞儀分選c-kit+ HAFMSCs，MTT 法觀察細(xì)胞增殖情況，并通過(guò)流式細(xì)胞儀、細(xì)胞免疫化學(xué)染色觀察行細(xì)胞表型鑒定。在體外經(jīng)成骨及成脂誘導(dǎo)分化，于誘導(dǎo)培養(yǎng)后21 d 采用von Kossa 染色觀察鈣沉積顆粒，油紅O 染色觀察脂滴形成情況。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)細(xì)胞經(jīng)5 氮-2’ 脫氧胞苷心肌誘導(dǎo)前后，NKx2.5、Tbx5、GATA-4、α-MHC 4 種心肌特異性基因表達(dá)情況。 結(jié)果 經(jīng)流式細(xì)胞儀分選，人孕中期羊水中c-kit+ HAFMSCs 含量約為貼壁細(xì)胞的3.07% ± 1.03%；體外增殖迅速，表達(dá)MSCs 表面標(biāo)志CD29、CD44、CD73、CD90、CD105，不表達(dá)造血干細(xì)胞表面標(biāo)志CD34、CD45；表達(dá)人類(lèi)白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-ABC，不表達(dá)HLA-DR。細(xì)胞免疫化學(xué)染色示CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、Oct-4 染色呈陽(yáng)性，CD34、CD45 染色呈陰性。MTT 檢測(cè)示第5、10、15 代c-kit+ HAFMSCs 具有相似的生長(zhǎng)曲線。成骨和成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)后21 d，細(xì)胞內(nèi)有鈣鹽沉積和脂滴形成。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)示，心肌誘導(dǎo)后14 d， NKx2.5、Tbx5、GATA-4、α-MHC 4 種心肌特異性基因表達(dá)均較誘導(dǎo)前明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 通過(guò)流式細(xì)胞儀分選的c-kit+ HAFMSCs 在體外可以誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞，可能成為心肌再生性治療的種子細(xì)胞。
目的 檢測(cè)c-kit 在人自體移植中厚皮片中與正常皮膚中的表達(dá)差異，初步探討c-kit 在自體移植皮片色素沉著發(fā)生機(jī)制中的作用。 方法 取患者自愿捐贈(zèng)面頸部自體中厚皮片移植術(shù)后1 年的色素沉著皮片16 例，以自體移植皮片受區(qū)周?chē)霸﹨^(qū)皮膚作為對(duì)照。采用Envision 免疫組織化學(xué)染色方法，檢測(cè)c-kit 在各皮片的表達(dá)與分布；使用醫(yī)學(xué)圖像定量分析系統(tǒng)定量檢測(cè)各標(biāo)本中c-kit 蛋白的陽(yáng)性染色指數(shù)（positive index，PI）。 結(jié)果 c-kit 的表達(dá)定位于表皮基底部黑素細(xì)胞、角朊細(xì)胞胞漿或細(xì)胞膜表面及真皮中的腺體上皮細(xì)胞。c-kit 在大部分自體中厚移植皮片中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，在表皮基底層處形成棕褐色條帶；在受區(qū)周?chē)Ｆつw及原供區(qū)周?chē)つw中有局灶性陽(yáng)性表達(dá)。c-kit 在自體移植中厚皮片、受區(qū)周?chē)霸﹨^(qū)周?chē)Ｆつw中的PI 值分別為131 216 ± 19 130、92 958 ± 16 208、91 306 ± 8 135，自體移植中厚皮片c-kit 表達(dá)與周?chē)つw比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 c-kit 在自體中厚移植皮片中的表達(dá)較自體正常皮膚中顯著增高，在自體移植皮片過(guò)度色素沉著中起重要調(diào)控作用。
目的 探討豚鼠膽囊膽固醇結(jié)石形成過(guò)程中c-kit及scf mRNA及蛋白的表達(dá)變化情況。方法 將20只豚鼠隨機(jī)分為2組，分別給予普通飼料及致石飼料，致石周期為6周。RT-PCR檢測(cè)膽囊組織中c-kit及scf mRNA的表達(dá)情況，Western blot檢測(cè)c-kit及scf蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 RT-PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，致石組豚鼠膽囊c-kit mRNA （t=6.985， P＜0.01）和scf mRNA （t=6.028，P＜0.01）的表達(dá)量下降。Western blot結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，致石組豚鼠膽囊c-kit （t=10.256，P＜0.01）及scf蛋白（t=9.586，P＜0.01）表達(dá)量下降。結(jié)論 飲食誘導(dǎo)的豚鼠膽囊膽固醇結(jié)石形成過(guò)程中，豚鼠膽囊c-kit和scf mRNA及蛋白表達(dá)水平均下降。c-kit/scf通路抑制可能參與膽囊膽固醇結(jié)石的形成。
目的總結(jié)胃腸道間質(zhì)瘤（GIST）的發(fā)病機(jī)制及流行病學(xué)特點(diǎn)，探討其診斷及治療并分析其預(yù)后。 方法復(fù)習(xí)與GIST的發(fā)病機(jī)制、流行病學(xué)、診斷、治療及預(yù)后方面有關(guān)的文獻(xiàn)并對(duì)其進(jìn)行綜述。 結(jié)果GIST為非上皮源性腫瘤，起源于Cajal間葉細(xì)胞，是消化道最常見(jiàn)的間葉性腫瘤，約占消化道腫瘤的1%～3%，中位發(fā)病年齡為40～60歲，胃為最好發(fā)部位。目前認(rèn)為，GIST的發(fā)病機(jī)制與原癌基因c-kit或血小板源性生長(zhǎng)因子受體α（PDGFRα）基因突變有密切關(guān)系，但PDGFRα和c-kit基因突變不會(huì)同時(shí)出現(xiàn)在同一患者中。GIST的臨床表現(xiàn)缺乏特異性，臨床診斷主要依靠?jī)?nèi)鏡及影像學(xué)技術(shù)，最終確診依靠病理學(xué)檢查。目前對(duì)GIST的治療以手術(shù)與分子靶向藥物治療為主，其預(yù)后與腫瘤危險(xiǎn)度分級(jí)及治療干預(yù)密切相關(guān)。 結(jié)論GIST是具有惡性潛能的腫瘤，其危險(xiǎn)度分級(jí)是指導(dǎo)臨床治療及預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)，GIST的預(yù)防、診斷、治療及復(fù)發(fā)的預(yù)防有待進(jìn)一步研究。