目的 探討 CD19+IL-10+ B 細(xì)胞及其亞群在結(jié)直腸癌患者外周血及其癌組織中的表達(dá)差異及臨床意義。方法 納入在西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 2017 年 11 月至 2018 年 11 月期間確診為結(jié)直腸癌并行手術(shù)患者共 38 例，用流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)直腸癌患者外周血、癌組織及其相應(yīng)癌旁組織中 CD19+IL-10+ B 細(xì)胞及其3 種亞群 CD19+IL-10+CD24hiCD38hi B 細(xì)胞、CD19+IL-10+CD24intCD38int B 細(xì)胞及 CD19+IL-10+CD24hiCD38– B 細(xì)胞占 CD19+ B 細(xì)胞的百分比；另外納入同時間段在西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院健康體檢者共 37 例，僅抽取外周血同法分離細(xì)胞。比較 CD19+IL-10+ B 細(xì)胞及其亞群含量在結(jié)直腸癌和健康對照者外周血中以及在結(jié)直腸癌患者癌組織及其相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)差異，并分析其與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 ① 結(jié)直腸癌患者外周血中 CD19+IL-10+ B 細(xì)胞和 CD19+IL-10+CD24hiCD38hi B 細(xì)胞含量明顯高于健康對照組（分別為：t=9.09，P<0.01；t=9.36，P<0.01），CD19+IL-10+CD24hiCD38– B 細(xì)胞含量明顯低于健康對照組（t=6.15，P<0.01），而 CD19+IL-10+CD24intCD38int B 細(xì)胞含量在 2 組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.78，P=0.08）。② CD19+IL-10+ B 細(xì)胞和 CD19+IL-10+CD24hiCD38hiB 細(xì)胞含量在結(jié)直腸癌患者的癌組織中明顯高于在其相應(yīng)的癌旁組織中（分別為：t=11.67，P<0.01；t=19.64，P<0.01），而 CD19+IL-10+CD24intCD38int B 細(xì)胞和 CD19+IL-10+CD24hiCD38– B 細(xì)胞含量在二者間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（分別為：t=1.72，P=0.09；t=1.57，P=0.12）。③ CD19+IL-10+ B 細(xì)胞及其亞群 CD19+IL-10+CD24hiCD38hi B 細(xì)胞含量在Ⅲ+Ⅳ期結(jié)直腸癌患者外周血中明顯高于Ⅰ+Ⅱ期者（t=5.39，P<0.01；t=3.13，P<0.01），而其他均未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 CD19+IL-10+ B 細(xì)胞在結(jié)直腸癌患者的外周血和癌組織以及中晚期結(jié)直腸癌患者的外周血中均明顯增高，且其以 CD19+IL-10+CD24hiCD38hi B 細(xì)胞亞群升高為主，結(jié)果提示，CD19+IL-10+ B 細(xì)胞及其亞群 CD19+IL-10+CD24hiCD38hi B 細(xì)胞可能與結(jié)直腸癌的發(fā)生及進(jìn)展有關(guān)。
目的 比較乳酸乳球菌及植物乳桿菌對塵螨致變應(yīng)性氣道炎癥小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用,對其脾細(xì)胞MAPK 通路的影響及可能機(jī)制。方法 將實驗小鼠分對照組( N組) 、塵螨組( 單純塵螨致敏激發(fā), M組) 、塵螨+ 乳酸乳球菌組及塵螨+ 植物乳桿菌組[ 塵螨致敏激發(fā)同時分別用乳酸乳球菌灌胃( L組) , 植物乳桿菌灌胃( P 組) ] , 末次激發(fā)后3 d 行肺組織病理學(xué)檢查, ELISA 法檢測脾細(xì)胞培養(yǎng)上清IL-10 水平, 流式細(xì)胞術(shù)檢測CD3 + CD4 + 脾細(xì)胞分泌IL-4 / IFNγ水平,Western blot 法檢測脾細(xì)胞中總的及磷酸化P38、ERK 和JNK 蛋白水平。結(jié)果 口服乳酸菌明顯減輕塵螨致敏激發(fā)導(dǎo)致的嗜酸細(xì)胞性氣道炎癥, 以喂服乳酸乳球菌更顯著。L 組及M組脾細(xì)胞培養(yǎng)上清IL-10 的生成顯著增加( P lt;0. 05) , 并以L組更明顯, 且其IL-10 的釋放率亦明顯高于其余三組( P lt;0. 05) ; 流式細(xì)胞術(shù)顯示L組和P組分泌IL-4 的CD4 + 細(xì)胞減少的同時, 總CD4 + 細(xì)胞比例反而增高, 以L 組為明顯。M組與P組磷酸化P38 表達(dá)水平較N組顯著增高, L 組與N組比較基本無變化, 各組間的磷酸化ERK 及JNK 無明顯差異。結(jié)論 口服乳酸乳球菌可改善塵螨所致小鼠嗜酸粒細(xì)胞性氣道炎癥, 其免疫調(diào)節(jié)可能與誘導(dǎo)CD4 + 調(diào)節(jié)T細(xì)胞, 分泌抑制性細(xì)胞因子IL-10, 下調(diào)P38 MAPK 通路活性, 從而下調(diào)Th2炎癥相關(guān)。
目的探討 IL-10 基因修飾的 BMSCs 對大鼠腦缺血再灌注損傷（ischemia reperfusion injury，IRI）炎性因子及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法取 SD 大鼠骨髓，采用貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng) BMSCs，經(jīng)免疫組織化學(xué)染色鑒定后，取第 3 代 BMSCs 以重組腺病毒（recombinant adenovirus，Ad）介導(dǎo) IL-10 基因轉(zhuǎn)染（AdIL-10-BMSCs）。取 40 只清潔級成年 SD 雄性大鼠，采用線栓法制備大腦中動脈阻塞模型后隨機(jī)分為 4 組，每組 10 只。模型制備后 3 h 于各組大鼠尾靜脈注射 1 mL 含 10%FBS 的 L-DMEM 培養(yǎng)液（A 組）、61.78 ng IL-10（B 組）、1 mL BMSCs 懸液（細(xì)胞濃度為 2×106 個/mL，C 組）、1 mL AdIL-10-BMSCs 懸液（細(xì)胞濃度 2×106 個/mL，D 組）。C、D 組細(xì)胞移植前采用 BrdU 標(biāo)記。7 d 后大鼠經(jīng)頸總動脈灌注處死取腦組織，免疫染色法檢測小膠質(zhì)細(xì)胞（OX42）表達(dá)，ELISA 法測定 TNF-α、IL-1β含量，TUNEL 法檢測神經(jīng)細(xì)胞凋亡；取 C、D 組組織行 BrdU 免疫熒光染色觀察。結(jié)果C、D 組腦組織中均見呈綠色熒光的 Brdu 陽性細(xì)胞，主要分布于梗死區(qū)周圍的紋狀體、大腦皮質(zhì)、皮質(zhì)下等。免疫組織化學(xué)染色示，B、C、D 組 OX42 陽性細(xì)胞數(shù)明顯少于 A 組，D 組少于 B、C 組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。ELISA 檢測示 D 組大鼠腦組織中 TNF-α、IL-1β含量較其余 3 組明顯降低（P<0.05）。TUNEL 法檢測各組凋亡細(xì)胞（TUNEL 陽性細(xì)胞）主要見于梗死灶周圍的紋狀體及額頂皮質(zhì)下腦組織（相當(dāng)于缺血半暗帶），D 組與 A、B、C 組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論AdIL-10-BMSCs 能通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞分泌促炎性因子 TNF-α、IL-1β，抑制梗死灶周圍腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡，對大鼠腦 IRI 起保護(hù)作用。