【摘要】目的采用單管PCR擴(kuò)增(ST Amp)方法建立高效的人類白細(xì)胞抗原-DRB1（HLA-DRB1）基因測(cè)序分型(SBT)技術(shù)并探討其應(yīng)用價(jià)值。方法合成7個(gè)5′端特異性擴(kuò)增引物和1個(gè)3′端共用引物，將上述引物混合在一起組成單個(gè)PCR反應(yīng)用于HLA-DRB1的DNA測(cè)序分型分析。 結(jié)果所有樣本都能成功分型，分型結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好。結(jié)論ST Amp法改進(jìn)了測(cè)序分型技術(shù)，具有高分辨率、高特異性和高效率的特點(diǎn)，值得推廣應(yīng)用。
【摘要】目的分析不同部位、分期的結(jié)直腸癌及正常黏膜組織中人乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus,HPV)16型 E7的表達(dá)狀況。方法應(yīng)用PCR及免疫組化方法檢測(cè)82例手術(shù)切除的結(jié)直腸癌新鮮標(biāo)本及距腫瘤近端10 cm以遠(yuǎn)的正常黏膜組織中HPV16 E7 DNA及蛋白的表達(dá)。結(jié)果結(jié)直腸癌組織HPV16 E7 DNA表達(dá)陽性率為51.22%(42/82),明顯高于正常黏膜組織的4.88%(4/82),P＜0.01; 直腸癌組織中HPV16 E7 DNA表達(dá)陽性率為64.10%(25/39),明顯高于升結(jié)腸癌的18.18%(2/11), P＜0.05; HPV16 E7 DNA表達(dá)陽性率與Dukes分期有關(guān)(P＜0.01),與癌組織分化程度無關(guān)。免疫組化染色顯示,HPV16 E7蛋白主要為細(xì)胞核表達(dá)，胞漿也可見少量表達(dá)，進(jìn)一步確認(rèn)了HPV16的感染，且HPV16 E7蛋白與HPV16 E7基因的表達(dá)具有相關(guān)性,免疫組化敏感性較PCR方法為低。結(jié)論結(jié)直腸癌組織HPV16 E7 DNA及蛋白的表達(dá)陽性率明顯高于正常黏膜組織，提示部分結(jié)直腸癌存在HPV16感染。癌灶部位距肛門越近，感染率越高； Dukes分期越晚感染率越高。