【摘 要】 目的 探討毛乳頭細(xì)胞對(duì)表皮干細(xì)胞與同種異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)構(gòu)建的組織工程皮膚血管化的影響。 方法 取門診包皮環(huán)切術(shù)患者皮膚，用于表皮細(xì)胞培養(yǎng)；取孕19、20 周引產(chǎn)胎兒頭部皮膚，用于毛乳頭細(xì)胞培養(yǎng)；患者及家屬均知情同意。以中性蛋白酶聯(lián)合胰蛋白酶消化、分離表皮細(xì)胞，Ⅳ型膠原黏附法分選表皮干細(xì)胞；以Ⅰ型膠原酶消化法分離毛乳頭，常規(guī)成纖維細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)。以同種異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)為支架，在真皮基質(zhì)的真皮乳頭側(cè)種植毛乳頭細(xì)胞，基底膜側(cè)種植表皮干細(xì)胞構(gòu)建實(shí)驗(yàn)組組織工程皮膚替代物；對(duì)照組組織工程皮膚替代物不種植毛乳頭細(xì)胞。取6 ～ 8 周齡BALB/C-nu 裸鼠60 只，隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組（n=30）；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背部制造1 cm × 1 cm 大小全層皮膚缺損模型，將兩組組織工程皮膚替代物移植修復(fù)創(chuàng)面，2 周后觀察移植皮膚成活率。術(shù)后2、4 周，取移植皮膚替代物標(biāo)本，行HE 及免疫組織化學(xué)染色，觀察移植皮膚替代物CD31 表達(dá)水平，并計(jì)算兩組標(biāo)本血管密度。 結(jié)果 Ⅳ型膠原分選后表皮細(xì)胞同時(shí)表達(dá)角蛋白19、β1 整合素，提示為表皮干細(xì)胞。由毛乳頭培養(yǎng)出的細(xì)胞表達(dá)α 平滑肌肌動(dòng)蛋白，提示為毛乳頭細(xì)胞。動(dòng)物移植術(shù)后2 周，實(shí)驗(yàn)組移植皮膚成活率為93.3%（28/30），對(duì)照組為80.0%（24/30），比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.31，P=0.00）。HE 染色觀察示實(shí)驗(yàn)組表皮層達(dá)12 層，表皮細(xì)胞體積較大；對(duì)照組表皮層達(dá)4 ～ 6 層，表皮細(xì)胞體積較小。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后2、4 周，血管密度分別為（38.56 ± 2.49）個(gè)/mm2 和（49.12 ± 2.39）個(gè)/mm2，對(duì)照組分別為（25.16 ± 3.73） 個(gè) / mm2 和（36.26 ± 3.24） 個(gè) / mm2，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。 結(jié)論 毛乳頭細(xì)胞可促進(jìn)移植皮膚替代物血管形成，利于表皮層重建，提高組織工程皮膚移植成活率。