目的 探討應用幾丁糖/ 聚乙烯醇神經導管修復獼猴周圍神經缺損的效果。 方法 成年獼猴12 只,雄性5 只,雌性7 只,體重3.26 ~ 5.35 kg。實驗動物隨機分成A、B、C 3 組,制備左側橈神經2 cm 缺損模型,分別用幾丁糖/ 聚乙烯醇神經導管移植、神經切除曠置和自體神經逆行原位移植處理。實驗動物右側為正常對照。術后8 個月,行大體觀察、組織學觀測及電生理檢測評價神經再生效果。 結果 術后8 個月,A 組再生神經通過神經導管長入神經缺損的遠側端,再生神經粘連較輕;B 組未見再生神經通過神經缺損斷端;C 組移植神經與周圍組織粘連較重。A、C 組可檢測出肌電圖表現,B 組未檢測到。A、C 組間波幅差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05),但均不及正常對照側,差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);C 組潛伏期和神經傳導速度優(yōu)于A 組,但均不及正常對照側,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。有髓神經纖維密度:A、C 組較正常對照側小,差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);A、C 組間差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。有髓神經纖維直徑和髓鞘厚度:C 組優(yōu)于A 組,但均不及正常對照側,差異均有統(tǒng)計學意義(Plt; 0.05)。 結論 幾丁糖/ 聚乙烯醇神經導管具有促進獼猴神經軸突再生的作用,有望成為自體神經替代材料應用于周圍神經缺損修復。
目的 檢測聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)/ 柞蠶絲素蛋白(wild antheraea pernyi silk fibroin,WSF)電紡膜與肌腱細胞的細胞相容性,探討其作為肌腱組織工程支架材料的可行性。 方法 以質量分數為98% 的甲酸為溶劑,配制濃度均為11% 的WSF 溶液、PVA 溶液及PVA/WSF(質量配比為9 ∶ 1)溶液,采用電紡絲技術制備WSF、PVA及PVA/WSF 電紡膜,掃描電鏡觀察電紡成絲情況。取5 只3 日齡SD 大鼠尾腱,體外分離培養(yǎng)肌腱細胞并傳至第3 代進行實驗。取濃度為1 × 106 個/ mL 肌腱細胞分別與PVA 及PVA/WSF 電紡膜復合培養(yǎng),4、12 h 采用MTT 法測量細胞黏附率。取濃度為4.5 × 103 個/mL 肌腱細胞,分別于PVA、1/2 PVA、1/4 PVA、PVA/WSF、1/2 PVA/WSF、1/4 PVA/WSF 電紡膜浸提液中培養(yǎng),MTT 法測定培養(yǎng)1、3、5、7 d 的吸光度(A)值,并進行毒性等級評價。取PVA、PVA/WSF 電紡膜分別與細胞密度為1 × 106 個/ mL 的肌腱細胞懸液100 μL 復合培養(yǎng)制備細胞- 材料復合物,7 d 后行HE 染色觀察,1、3、5、7 d行掃描電鏡觀察。 結果 WSF 甲酸溶液無法電紡成絲,PVA 和PVA/WSF 甲醛溶液均可成功電紡成絲。肌腱細胞與PVA、PVA/WSF 電紡膜復合培養(yǎng)4 h 后,其細胞黏附率分別為26.9% ± 0.4%、87.0% ± 1.0%,差異有統(tǒng)計學意義(t=100.400,P=0.000);復合培養(yǎng)12 h 后,其細胞黏附率分別為35.2% ± 0.6%、110.0% ± 1.7%,差異有統(tǒng)計學意義(t=42.500,P=0.000)。體外浸提液毒性評價結果顯示,培養(yǎng)后1、3、5、7 d 各種電紡膜間細胞A 值比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);1/2 PVA和1/4 PVA 浸提液細胞毒性等級差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。細胞- 材料復合物的組織學及掃描電鏡觀察顯示肌腱細胞均可黏附于PVA、PVA/WSF 電紡膜表面,但PVA/WSF 電紡膜上細胞較多。 結 論 PVA/WSF 電紡膜支架材料具有良好的細胞相容性,有望成為肌腱組織工程的理想支架。
通過體外細胞毒性實驗和細胞與支架材料復合培養(yǎng)實驗的研究,評價精氨酸- 甘氨酸- 天冬氨酸- 重組蛛絲蛋白(pNSR16)/ 聚乙烯醇(poly vinyl alcohol,PVA)支架材料的細胞相容性。 方法 通過溶劑澆鑄 / 粒子瀝濾的方法制備pNSR16/PVA 支架材料及其浸提液。將小鼠胚胎成纖維細胞(NIH-3T3 細胞)與浸提液培養(yǎng),采用MTT法檢測培養(yǎng)1、3、5 d 時支架材料的細胞毒性。將NIH-3T3 細胞與pNSR16/PVA 支架材料復合培養(yǎng)2、4、6 d 后行掃描電鏡、HE 染色觀察,并于復合培養(yǎng)6 d 后行免疫組織化學檢測,觀察NIH-3T3 細胞在支架材料上的黏附、生長及表達功能情況。 結果 MTT 法檢測顯示pNSR16/PVA 支架材料的細胞毒性為0 級。掃描電鏡觀察細胞在支架材料復合培養(yǎng)4 d后即可覆蓋支架材料表面,細胞呈一定方向排列。HE 染色示細胞能在支架表面黏附和生長,且隨培養(yǎng)時間的延長,細胞向支架內部遷移。免疫組織化學檢測到NIH-3T3 細胞分泌的bFGF,細胞能進行正常分化。 結論 pNSR16/PVA 支架材料具有良好的細胞相容性,有望作為一種較理想的組織工程支架材料。
目的 制備并評價羧甲基殼聚糖-HA- 聚乙烯醇[carboxymethyl-chitosan/HA/ poly(vinyl alcohol),CHP] 共混膜片的理化性質、眼內生物相容性,探討其用于青光眼濾過手術的可行性。 方法 取羧甲基殼聚糖、HA、聚乙烯醇按 5 ∶ 4 ∶ 1(M/M)共混交聯,用流延法制備CHP 共混膜片。測定膜片吸水率、溶脹比、通透性及力學性能。取新西蘭白兔結膜下組織,分離培養(yǎng)兔眼結膜下成纖維細胞,取第4 代細胞以5 × 103 個/mL 密度接種于貼附CHP 共混膜片(實驗組)及不加膜片(對照組)的細胞培養(yǎng)板中培養(yǎng),于培養(yǎng)24、48、72 h 取細胞行MTT 檢測。將6 只新西蘭白兔隨機分為2 組(n=3),將CHP 共混膜片及SK 膠分別植入兔眼前房及結膜下,作為實驗組及對照組。術后第1、3、5、9、11、20、30、45、60 天進行裂隙燈觀察,記錄雙眼反應,第15 天實驗組取角膜組織行掃描電鏡觀察,以研究共混膜片生物相容性和降解性。 結果 CHP 共混膜片吸水率為83.8% ± 1.3%,溶脹比為3.59 ± 0.50,干、濕態(tài)時抗張強度分別為(20.59 ± 1.73)、(0.51 ± 0.13)MPa,斷裂伸長率分別為10.69% ± 1.16%、53.15% ± 2.46%。CHP 共混膜片對 NaCl、L- 酪氨酸均有良好的通透性。接種后24、48、72 h 實驗組吸光度(A)值分別為 0.207 ± 0.083、0.174 ± 0.080、0.181 ± 0.048,對照組分別為0.284 ± 0.011、0.272 ± 0.083、0.307 ± 0.056,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。術后第1 天實驗組前房植入共混膜片周圍有少量絮狀物滲出;第3 天滲出物吸收;第11 天無明顯炎性反應;第60 天植入共混膜已大部分降解。術后15 d,掃描電鏡觀察示角膜內皮細胞六邊形形態(tài)完整,表面無降解顆粒附著。對照組因SK 膠質地軟,易斷裂,未能成功植入至前房。術后第1 天實驗組結膜植入處結膜局部有輕度充血,第9 天恢復正常,至第60 天無角膜水腫、前房炎性反應。對照組觀察結果與實驗組相似。 結論 CHP 共混膜片具有較好的理化性質及眼內生物相容性,在青光眼濾過手術中具有潛在應用價 值。
【摘 要】 目的 研制一種可生物降解的膠原- 殼聚糖- 聚乙烯醇[poly(vinyl alcohol),PVA] 復合人工淚小管,用于治療因淚道阻塞導致的溢淚癥。 方法 按照一定比例均勻混合膠原、殼聚糖、醫(yī)用PVA 溶液,通過反復的凍融過程使其形成彈性凝膠,再依次經過清洗、造孔、脫水、剪切后即得T1、T2 和T3 組的可降解人工淚小管。光鏡下觀察表面形貌和測量內、外直徑。掃描電鏡觀察T2 組人工淚小管凝膠態(tài)和干態(tài)的斷口形貌,以及是否存在相分離現象。通過吸水溶脹性能測試計算3 組人工淚小管的吸水率和膨脹率。采用體外降解實驗初步觀察3 組人工淚小管的降解情況。 結 果 通過物理交聯成膠的方法成功制備出內徑0.5 ~ 0.7 mm,外徑0.9 ~ 1.5 mm,長度≥ 20 mm 的膠原- 殼聚糖-PVA 復合人工淚小管。掃描電鏡觀察到液氮脆斷的人工淚小管內部成分分布均勻,內外壁表面平整,冷凍干燥的人工淚小管斷口呈凝膠態(tài)的互穿網絡結構。3 組不同成分的人工淚小管在PBS 溶液中浸泡30 min 后均快速吸水溶脹,外徑擴大100% ~ 120%,內徑擴大20% ~ 30%,并且隨膠原含量增高,溶脹速度增快,平衡溶脹率增大。3 組人工淚小管在37℃含2 mg/mL 溶菌酶的PBS 液中浸泡1 個月后,表面有部分細小絮狀物,管口開裂,管壁變薄,透明度增加。在70℃ PBS 溶液中加速降解2 d 后,該小管成白色糊狀。 結論 制備的新型可降解人工淚小管具有良好的力學性能和吸水溶脹性,便于手術操作,可支撐淚道,利于淚液的流通,防止淚小管粘連,有望成為一種治療淚道阻塞的新材料。
配制了與人體軟組織性能相近的水凝膠人造軟組織。采用由光學平臺、相機及支架、相機光源等組成的圖像采集設備,記錄嵌入在軟組織內標識物的連續(xù)位移,研究穿刺過程中軟組織的變形規(guī)律。在分析標識物在X方向和Y方向上位移的基礎上,基于反向傳播(BP)神經網絡,建立標識物在Y方向上的神經網絡模型。通過與實驗數據對比,神經網絡模型的擬合度在95%以上,有效數據的最大相對誤差控制在30%,最大絕對誤差為0.8 mm,能夠較好地定量預測穿刺過程中軟組織的變形。研究結果可有效提高軟組織針穿刺靶點精度。
本文采用靜電紡絲制備了負載王不留行黃酮苷的聚乙烯醇苯乙烯吡啶鹽(PVA-SbQ)/玉米醇溶蛋白(Zein)納米纖維,對納米纖維的表面形貌和結構進行了觀察,并對其進行了生物相容性評價。將負載王不留行黃酮苷的 PVA-SbQ/Zein 納米纖維作為實驗組,以凡士林紗布為對照組,建立小鼠皮膚損傷模型,對兩種敷料在小鼠皮膚上的修復作用進行組織切片觀察。實驗結果表明,成功制備了負載王不留行黃酮苷的納米纖維并呈現良好的形貌;負載黃酮苷的 PVA-SbQ/Zein 納米纖維對 L929 細胞無毒害作用,且黃酮苷的存在可以促進細胞黏附生長?;?PVA-SbQ/Zein/黃酮苷納米纖維膜的創(chuàng)傷愈合材料對小鼠傷口愈合的效果要優(yōu)于凡士林紗布。