目的構建抑制大鼠心肌細胞kir2．1基因的真核表達質粒pEGFP6-kir2．1，觀察對大鼠心肌細胞kir2．1信使RNA（mRNA）、蛋白表達情況及搏動頻率的影響。方法選擇5個針對大鼠心肌細胞kir2．1基因的RNA干擾（RNA interference）位點，設計合成5對相應的寡核苷酸鏈，形成雙鏈后依次將其連人帶有U6啟動子的載體，得到含5個目的基因的重組質粒pEGFP6-kir2．1。轉染大鼠心肌細胞，并將其分為3組：實驗組、陰性質粒對照組和空白對照組。轉染后72h，用逆轉錄聚合酶鏈反應（RT—PCR）和蛋白印跡法（Western—blotting）檢測kir2．1mRNA和蛋白表達情況，并觀察細胞搏動頻率。結果轉染后72h，實驗組心肌細胞kir2．1mRNA和蛋白表達明顯低于兩對照組（P〈0．01），兩對照組間比較差別無統(tǒng)計學意義；實驗組搏動頻率增加，并顯著高于兩對照組（P〈0．01），兩對照組之間搏動頻率差別無統(tǒng)計學意義。結論真核表達質粒pEGFP6-kir2．1能明顯抑制大鼠kir2．1基因的表達，提高大鼠心肌細胞的自律性。
目的 綜述細胞移植構建心臟生物起搏器的研究現(xiàn)狀與存在的問題，并展望其前景。 方法 廣泛查閱近十年來有關細胞移植構建心臟生物起搏器的文獻，并進行綜述。 結果 在體實驗已證實細胞移植構建心臟生物起搏技術方法的可行性，目前多通過竇房結細胞移植和干細胞移植構建心臟生物起搏器，但存在移植的心肌細胞擴增困難，以及心臟生物起搏器構建成功率低、功能不夠穩(wěn)定等缺點。應用基因轉染技術可能是解決這些問題的途徑之一。 結 論 細胞移植構建心臟生物起搏器是可行的，有廣闊潛在的臨床應用前景，值得進一步研究。
生物起搏器是治療嚴重緩慢性心律失常的一個新策略, 而尋找合適的起搏細胞是其首要問題。本文綜述了通過轉染基因、化學誘導、共培養(yǎng)以及特定培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法將骨髓間充質干細胞、脂肪干細胞誘導為起搏樣細胞的研究進展, 分析了它們作為生物心臟起搏器種子細胞尚需解決的問題。