目的 檢測經(jīng)液氮保存的人同種帶支架瓣膜的細胞活性和流體力學(xué)性能。 方法 制作同種帶支架瓣膜經(jīng)液氮保存3個月后,利用流式細胞儀技術(shù)定量檢測瓣葉細胞活性(實驗組,n=6),采集新鮮同種瓣膜作為對照(對照組,n=6)。利用國產(chǎn)脈動流實驗裝置,分別測試實驗組21#、23#、25#同種帶支架瓣膜的流體力學(xué)性能,測試各流量下的跨瓣壓差、有效瓣口面積和回流百分比;并使用相應(yīng)型號的國產(chǎn)Perfect牛心包生物瓣膜進行對比研究。 結(jié)果 實驗組內(nèi)皮細胞死亡率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(10.24%±1.71% vs. 9.09%±2.72%,P= 0.441);實驗組平滑肌細胞死亡率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(8.76%±1.82% vs. 7.84%±0.59%,P= 0.178);實驗組總細胞死亡率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(8.79%±1.44% vs. 7.40%±0.49%,P=0.072)。兩種21#、23#、25#人工生物瓣膜的跨瓣壓差對流量具有非常大的依賴性,隨著流量的增大而增大。同種帶支架瓣膜的跨瓣壓差較Perfect牛心包生物瓣膜的大。兩種各型號瓣膜的回流百分比均隨測試流量的增大而略有減小,同樣,同種帶支架瓣膜的回流百分比較Perfect牛心包生物瓣膜的大。兩種各型號瓣膜的有效瓣口面積均有隨流量增加而增大的趨勢,同種帶支架瓣膜的有效瓣口面積較Perfect牛心包生物瓣膜的略小。 結(jié)論 經(jīng)液氮保存同種帶支架瓣膜的細胞活性保存良好,流體力學(xué)性能較滿意。
目的報告液氮深低溫下保存同種帶瓣血管的制作方法、組織活性及臨床應(yīng)用效果。方法制作同種瓣24個、抗生素滅菌、梯度降溫后置于液氮中保存,并測定冷凍保存后同種瓣的組織活性。同種瓣臨床應(yīng)用5例,其中法洛四聯(lián)癥、肺動脈閉鎖2例,先天性主動脈瓣狹窄1例,法洛四聯(lián)癥術(shù)后發(fā)生室間隔缺損殘余漏伴肺動脈瓣重度關(guān)閉不全1例,Bentall術(shù)后發(fā)生感染性心內(nèi)膜炎1例。結(jié)果抗生素滅菌、液氮深低溫技術(shù)保存同種瓣具有良好的組織活性,糖代謝測定24h葡萄糖消耗大于16mg/dl,組織培養(yǎng)見成纖維細胞生長良好。臨床移植5例均成功,術(shù)后隨訪3~8個月,同種瓣無狹窄或關(guān)閉不全。結(jié)論液氮深低溫保存同種瓣安全可靠,臨床應(yīng)用早期效果良好。
目的 報告50個同種帶瓣大動脈的取材、滅菌及液氮保存方法。方法 供者為年齡20~39歲的腦死亡患者,均在死亡后2小時取材。修剪后48個同種帶瓣大動脈用抗生素滅菌24小時放入含8%二甲基亞砜的RPMI 1640液中液氮保存。結(jié)果 抗生素滅菌后48個同種帶瓣大動脈細菌和霉菌培養(yǎng)均為陰性。解凍11個有10個用于臨床,解凍后的同種帶瓣大動脈可基本保持正常功能,其細菌和霉菌培養(yǎng)均為陰性。結(jié)論 無菌取材加抗生素滅菌效果可靠,經(jīng)液氮保存的同種帶瓣大動脈解凍后可滿足臨床應(yīng)用的要求。
目的 探討手術(shù)切除聯(lián)合液氮冷凍治療結(jié)膜鱗狀細胞癌的臨床效果。 方法 分析1998年-2008年收治的21例眼瞼結(jié)膜鱗癌患者的臨床資料。對腫瘤局限在眼球結(jié)膜和部分穹窿結(jié)膜受侵犯者行單純手術(shù)切除聯(lián)合液氮冷凍治療;部分或全部結(jié)膜及眼瞼受侵犯者行局部腫瘤切除聯(lián)合眼瞼重建及液氮冷凍治療;眼瞼和球結(jié)膜廣泛受累,無法進行眼瞼重建者行眼眶內(nèi)容物剜除術(shù)。 結(jié)果 21例中,7例行單純腫瘤切除合并冷凍治療,其中5例痊愈,2例復(fù)發(fā);10例行局部腫瘤切除并進行眼瞼重建,其中7例痊愈,3例復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)病例作眶內(nèi)容摘除;4例腫瘤侵犯范圍較寬而無法保留眼球者行眼眶內(nèi)容物摘除。術(shù)手3例死于肝肺轉(zhuǎn)移。 結(jié)論 眼瞼結(jié)膜鱗狀細胞瘤的外科手術(shù)切除是唯一有效的方法,眼瞼重建視腫瘤侵犯范圍而定,冷凍治療作為輔助治療可提高疾病的治愈率。
本文研究了牛心包液氮冷凍并減薄后的性能變化,并與豬心包進行了對比。采用蘇木精-伊紅(HE)染色的方法進行組織學(xué)微結(jié)構(gòu)觀察,并通過拉伸試驗評價了冷凍和減薄對心包力學(xué)性能的影響,組織學(xué)觀察和力學(xué)性能評價均采用豬心包作為對照。結(jié)果表明牛心包在液氮冷凍后性能未見區(qū)別;冷凍減薄后,割線模量和極限強度與豬心包基本相當,彈性模量略高于豬心包。研究表明,牛心包減薄容易獲得理想的厚度和預(yù)期的性能,其可作為經(jīng)導(dǎo)管瓣膜瓣葉材料的一種選擇。