目的：建立高效液相色譜分離檢測(cè)腦蛋白水解物注射液各種氨基酸的測(cè)定方法。方法：氨基酸含量測(cè)定采用異硫氰酸苯酯柱前衍生化；色譜柱為C18柱（VP-DOS；150 mm×46 mm）；流動(dòng)相：A為0.1 mol/L醋酸鈉溶液（冰醋酸調(diào)節(jié)pH 6.5）-乙腈（93∶7），B為水-乙腈（1∶4）；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；流速：1 mL/min；柱溫：40℃。結(jié)果：16種氨基酸在32 min內(nèi)完全分離，各種氨基酸之間沒(méi)有出現(xiàn)干擾現(xiàn)象，且多次重復(fù)測(cè)定結(jié)果誤差很小。結(jié)論：建立的高效液相色譜法準(zhǔn)確性高、重現(xiàn)性好，可以有效地控制腦蛋白水解物注射液的質(zhì)量。
目的 觀察穩(wěn)定期COPD 患者運(yùn)動(dòng)前后血漿氨基酸末端腦鈉素前體( NT-proBNP) 水平的變化, 探討其變化規(guī)律及臨床意義。方法 受試者為穩(wěn)定期COPD 患者19 例和健康對(duì)照組10 例。分別進(jìn)行遞增功率和恒功率心肺運(yùn)動(dòng)試驗(yàn), 在遞增功率運(yùn)動(dòng)前及運(yùn)動(dòng)高峰時(shí)抽取橈動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治? 在恒功率運(yùn)動(dòng)前及運(yùn)動(dòng)終止即刻抽取肘靜脈血測(cè)定血漿中NT-proBNP 的濃度。結(jié)果 穩(wěn)定期COPD 患者在運(yùn)動(dòng)高峰時(shí)的攝氧量、心率、PaO2 及恒功率運(yùn)動(dòng)時(shí)間均明顯低于對(duì)照組; 穩(wěn)定期COPD患者和對(duì)照組運(yùn)動(dòng)前后血漿NT-proBNP 水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[ ( 4803. 86 ±1027. 07) ng/L 和( 4572. 39 ±1243. 33) ng/L, P = 0. 542; ( 4303. 18 ±771. 74) ng/L 和( 4475. 71 ±1025. 50) ng/L, P =0. 676] ; 所有受試者血漿NT-proBNP 水平與各運(yùn)動(dòng)指標(biāo)均無(wú)顯著相關(guān)性。結(jié)論 運(yùn)動(dòng)對(duì)穩(wěn)定期COPD 患者血漿NT-proBNP 水平無(wú)明顯影響, 心功能障礙不是其運(yùn)動(dòng)受限的主要原因。
目的 了解術(shù)后早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持是否有助于維持心瓣膜置換術(shù)患者圍術(shù)期血漿游離氨基酸譜的平衡?！》椒ā〔捎秒S機(jī)數(shù)字表法將 4 7例心瓣膜置換術(shù)患者分為普通飲食組和能全力組 ,用柱前衍生化的反相高效液相色譜法測(cè)定其血漿中 16種游離氨基酸的含量 ,外標(biāo)法定量。 結(jié)果 普通飲食組患者術(shù)后血漿中多種游離氨基酸水平降低 ,且術(shù)后第 6天仍有 4種氨基酸含量明顯低于術(shù)前值 (Plt;0 .0 5 ) ;能全力組患者術(shù)后亦有部分血漿游離氨基酸含量降低 ,但術(shù)后第 6天均恢復(fù) (Pgt;0 .0 5 )或超過(guò)其術(shù)前值 (Plt;0 .0 5 )。術(shù)后同時(shí)間點(diǎn)能全力組患者多種血漿游離氨基酸水平高于普通飲食組患者 (Plt;0 .0 5 )。 結(jié)論 心瓣膜置換術(shù)后患者血漿中多種游離氨基酸水平明顯降低 ,術(shù)后早期能全力腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持有助于維持這些患者血漿游離氨基酸譜的平衡。
目的評(píng)價(jià)使用新型氨基酸聚合物（multi-amino-acid copolymer，MAACP）復(fù)合納米羥基磷灰石（nano-hydroxyapatite，n-HA）人工椎板在山羊頸椎椎板切除術(shù)后阻隔硬膜外瘢痕粘連、壓迫的應(yīng)用價(jià)值。 方法2歲齡雄性山羊15只，體重（30 ± 2）kg，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（n=9）和對(duì)照組（n=6）。實(shí)驗(yàn)組行C4椎板切除，MAACP/n-HA人工椎板植入；對(duì)照組僅行C4椎板切除。術(shù)后4、12、24周分別取實(shí)驗(yàn)組2、2、5只，對(duì)照組2、2、2只山羊，行大體觀察傷口感染、人工椎板有無(wú)移位碎裂、椎管形狀等，并根據(jù)大體觀察Rydell瘢痕粘連程度評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)兩組手術(shù)節(jié)段粘連程度；行X線片、CT影像學(xué)觀察，24周時(shí)測(cè)量C3、C4、C5椎管面積及椎管矢狀徑，以正常山羊（n=2）作為正常組；24周MRI觀察脊髓神經(jīng)是否受壓；然后處死取材，行組織學(xué)觀察。 結(jié)果術(shù)后所有動(dòng)物切口愈合良好，未見(jiàn)毒性及免疫排斥反應(yīng)。術(shù)后實(shí)驗(yàn)組手術(shù)節(jié)段粘連程度明顯優(yōu)于對(duì)照組（Z= —2.52，P=0.00）。術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)X線片及CT觀察示實(shí)驗(yàn)組人工椎板位置無(wú)移位，外形完整，骨性椎管逐漸得到重建；對(duì)照組C4椎板及棘突缺損，軟組織影突入椎管。術(shù)后24周，C4椎管面積和椎管矢狀徑實(shí)驗(yàn)組和正常組均顯著高于對(duì)照組（P lt; 0.05），實(shí)驗(yàn)組與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。實(shí)驗(yàn)組MRI示C4平面腦脊液信號(hào)通暢，無(wú)軟組織突入椎管，硬膜無(wú)粘連受壓；對(duì)照組椎板缺損處瘢痕組織突入椎管與硬膜粘連， 硬膜輕度受壓。組織切片HE染色及Masson三色染色示實(shí)驗(yàn)組人工椎板完整無(wú)明顯降解，人工椎板與自體骨結(jié)合界面周?chē)倭砍晒?；?duì)照組椎板缺損處纖維組織長(zhǎng)入。 結(jié)論新型MAACP/n-HA人工椎板可在體內(nèi)長(zhǎng)久維持生物力學(xué)穩(wěn)定，對(duì)周?chē)：巯蜃蛋迦睋p處生長(zhǎng)有良好機(jī)械阻隔作用。
目的 綜述人工合成可降解聚合材料在骨修復(fù)重建的研究現(xiàn)狀，展望骨替代材料和骨組織工程支架材料的發(fā)展方向。 方法 查閱近年來(lái)關(guān)于人工合成可降解聚合材料作為骨修復(fù)替代和骨組織工程支架材料的相關(guān)文獻(xiàn)，并分別進(jìn)行闡述。 結(jié)果 目前作為骨修復(fù)替代和骨組織工程支架材料研究較多的人工合成可降解聚合材料包括脂肪族聚酯、聚氨酯、聚酸酐和氨基酸聚合物。各種聚合材料都具有良好的生物安全性和組織相容性，且降解產(chǎn)物無(wú)毒。材料的機(jī)械強(qiáng)度和降解速率可根據(jù)合成的官能基團(tuán)種類、數(shù)目和合成方法進(jìn)行調(diào)節(jié)，因而可按需制備出一定強(qiáng)度和降解速率的骨修復(fù)材料。初步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示其具有良好的骨修復(fù)效果。 結(jié)論 人工合成降解性聚合材料，特別是各種共聚物材料、復(fù)合材料、負(fù)載骨生長(zhǎng)因子的材料，可能成為最具潛力、最為理想的骨修復(fù)重建生物材料。
觀察異丙酚對(duì)兔缺血再灌注損傷脊髓的保護(hù)作用以及對(duì)興奮性氨基酸（excitatory amino acid，EAA）的影響。 方法 健康新西蘭大白兔60 只，雌雄各半，體重2.0 ～ 2.5 kg。采用左腎下腹主動(dòng)脈阻斷法建立脊髓缺血再灌注損傷模型，阻斷開(kāi)始即泵入灌注液6 mL/kg（不足部分均以10% 脂肪乳補(bǔ)充），灌注速度12 mL/（ kg·h），30 min后停止灌注，開(kāi)放腹主動(dòng)脈。根據(jù)灌注液的不同，隨機(jī)分為生理鹽水組（A 組）、10% 脂肪乳組（B 組）、30 mg/kg 異丙酚組（C 組）、40 mg/kg 異丙酚組（D 組）、50 mg/kg 異丙酚組（E 組）及60 mg/kg 異丙酚組（F 組），每組10 只。分別記錄麻醉清醒即刻、再灌注后6、24 和48 h 兔神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分；于再灌注后48 h 取L4 ～ 6 節(jié)段脊髓組織計(jì)數(shù)脊髓前角正常神經(jīng)元；采用高效液相色譜法測(cè)定脊髓組織中EAA 含量。 結(jié)果 C、D、E、F 組各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分明顯優(yōu)于A、B 組（P lt;0.05），E 組評(píng)分最高（P lt; 0.05），A、B 組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。C、D、E、F 組脊髓前角正常神經(jīng)元明顯多于A、B 組（P lt; 0.05），且E 組多于C、D、F 組（P lt; 0.05）。A、B、C、D、E、F 組脊髓組織EAA 含量均明顯高于正常值，其中A、B 組最高（Plt; 0.05），但A、B 組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；E 組最低（P lt; 0.05）。谷氨酸、天門(mén)冬氨酸含量均與脊髓前角正常神經(jīng)元計(jì)數(shù)及再灌注后48 h 神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分成負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為— 0.613、— 0.536、— 0.874 及— 0.813（P lt; 0.01）。 結(jié)論 異丙酚能降低缺血再灌注脊髓組織中EAA 含量，減輕脊髓缺血再灌注損傷。
lt;brgt;目的 lt;brgt;測(cè)定家兔實(shí)驗(yàn)性急性高眼壓模型視網(wǎng)膜谷氨酸（glutamate，GLU）、天門(mén)冬氨酸（aspartate，ASP）、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）和甘氨酸（glycine，GLY）含量的動(dòng)態(tài)變化。 lt;brgt;方法 lt;brgt;40只家兔分為8組，每組5只兔，每兔隨機(jī)選一只眼作為實(shí)驗(yàn)眼。1～6組為實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)眼在120 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）高壓前房灌注持續(xù)15、30、45 min和高壓灌注持續(xù)45 min后恢復(fù)正常眼壓15、30、45 min時(shí)摘除眼球。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組僅作前房穿刺后即摘除眼球?？瞻讓?duì)照組直接處死動(dòng)物摘除眼球。利用鄰苯二甲醛柱前衍生法，高效液相色譜儀測(cè)定各組兔眼視網(wǎng)膜氨基酸的含量。 lt;brgt;結(jié)果 lt;brgt;高眼壓灌注持續(xù)15 min組，視網(wǎng)膜GLU水平較實(shí)驗(yàn)對(duì)照組顯著升高（t=5.9814，P=0.0003）；恢復(fù)正常眼壓15min組，GLU含量再次顯著升高，與實(shí)驗(yàn)對(duì)照眼比較差異顯著（t=2.5970，P=0.0318）。ASP、GABA和GLY在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)意義的變化。前房穿刺實(shí)驗(yàn)對(duì)照組與空白對(duì)照組的GLU含量比較無(wú)差別。 lt;brgt;結(jié)論 lt;brgt;急性高眼壓早期以及恢復(fù)正常眼壓早期均可導(dǎo)致視網(wǎng)膜GLU含量顯著升高。 lt;brgt;(中華眼底病雜志, 2002, 18: 146-148)
目的 了解高眼壓狀態(tài)下視網(wǎng)膜N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸受體(N-methyl-D-aspartate receptor，NMDAR)的功能亞單位NMDAR1基因mRNA表達(dá)的情況。 方法 采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng) (reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)、beta;-肌動(dòng)蛋白（beta;-actin）作內(nèi)對(duì)照對(duì)高眼壓模型眼視網(wǎng)膜內(nèi)NMDAR1基因的mRNA進(jìn)行半定量分析。16只大白兔的26只眼分成3組。實(shí)驗(yàn)組10只兔10只眼，前房穿刺生理鹽水高壓60 mm Hg（1 mm Hg=0．133 kPa）灌注，持續(xù)4 h。陽(yáng)性對(duì)照組1 0只兔10只眼，為實(shí)驗(yàn)組的對(duì)側(cè)眼，用實(shí)驗(yàn)組相同的方法以20 mm Hg的壓力前房灌注持續(xù)4 h 作陽(yáng)性對(duì)照。正常對(duì)照組6只兔6只眼，不作眼球灌注處理。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組的高眼壓灌注眼與陽(yáng)性對(duì)照眼NMDAR1的mRNA的水平無(wú)明顯差異 (Pgt;0.05)。 結(jié)論 急性高眼壓未改變兔視網(wǎng)膜NMDAR1基因的mRNA表達(dá)水平。 (中華眼底病雜志,2001,17:50-51)
目的 探討谷氨酰胺(Gln)聯(lián)合生長(zhǎng)激素(GH)對(duì)膿毒癥大鼠腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-1（IL-1）、IL-6、皮質(zhì)醇及三甲基組氨酸（3-MH）濃度和氨基酸代謝的影響。方法 79只SD大鼠,隨機(jī)取其中10只設(shè)為對(duì)照組,另69只用盲腸結(jié)扎穿孔法建立腹腔感染、頸靜脈置管腸外營(yíng)養(yǎng)(PN)模型后，將其中存活超過(guò)6 d的大鼠30只均分為3組： 膿毒癥組、Gln組和Gln+GH組。第6 d處死動(dòng)物，取門(mén)靜脈血，用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清TNF-α、IL-1、IL-6和皮質(zhì)醇濃度； 氨基酸自動(dòng)分析儀檢測(cè)血清氨基酸濃度； 取大鼠趾長(zhǎng)伸肌組織，采用高效液相色譜法檢測(cè)骨骼肌組織中3-MH濃度。結(jié)果 血清TNF-α、IL-1、IL-6及皮質(zhì)醇濃度對(duì)照組均低于膿毒癥組(P＜0.05，P＜0.01)，Gln+GH組及Gln組均低于膿毒癥組(P＜0.05, P＜0.01）,Gln+GH組亦低于Gln組。與對(duì)照組相比，膿毒癥組血清總氨基酸濃度升高（P＜0.05），尤以谷氨酸和支鏈氨基酸明顯（P＜0.05），Gln濃度明顯降低（P＜0.05）； Gln組和Gln+GH組與膿毒癥組相比，血清總氨基酸濃度降低（P＜0.05），尤以Gln+GH組降低明顯（P＜0.05），Gln濃度明顯升高（P＜0.05）。骨骼肌組織中3-MH濃度以膿毒癥組為最高，Gln組又高于Gln+GH組（P＜0.01）。結(jié)論 添加GH和Gln的PN，能降低細(xì)胞因子水平,改善氨基酸代謝。