【摘要】目的以CEA mRNA為標(biāo)記物，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)直腸癌在直腸系膜的播散范圍，以探討直腸癌根治術(shù)直腸系膜的合理切除范圍。 方法40例直腸癌全系膜切除的手術(shù)標(biāo)本，取不同距離的直腸系膜以CEA mRNA為標(biāo)記物，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)其有無(wú)癌轉(zhuǎn)移。 結(jié)果在40例病例中發(fā)現(xiàn)直腸系膜有癌播散者9例（22.5%），播散最遠(yuǎn)距離在腫瘤下緣下4 cm。直腸癌在直腸系膜的播散與Dukes分期、腫瘤浸潤(rùn)腸壁深度、腫瘤分化程度及腫瘤分型相關(guān)（P＜0.05），與腫瘤大小及CEA水平無(wú)明顯相關(guān)性(Pgt;0.05)。 結(jié)論直腸癌根治術(shù)中距腫瘤下緣5 cm范圍是直腸系膜的安全切緣。
目的 用反轉(zhuǎn)錄PCR法，調(diào)取膽囊癌細(xì)胞內(nèi)的端粒酶RNA(hTR)基因，并針對(duì)其序列設(shè)計(jì)錘頭狀核酶切割基因序列，并將其構(gòu)建入真核表達(dá)載體pTriEx4內(nèi)。方法 根據(jù)hTR cDNA序列，設(shè)計(jì)引物，經(jīng)RT-PCR法從體外培養(yǎng)的膽囊癌細(xì)胞內(nèi)調(diào)取hTR模板區(qū)基因，根據(jù)其測(cè)序結(jié)果，合成錘頭狀核酶基因，與經(jīng)相應(yīng)酶切的真核表達(dá)載體連接，酶切鑒定重組體的正確性。結(jié)果經(jīng)RT-PCR從細(xì)胞內(nèi)調(diào)出68 bp序列，與hTR cDNA比較，與模板區(qū)域堿基序列一致。核酶基因重組子經(jīng)酶切鑒定序列正確。結(jié)論 RT-PCR法可調(diào)出膽囊癌hTR基因有效片段； 成功構(gòu)建了針對(duì)hTR模板區(qū)的核酶基因的真核表達(dá)載體，為膽囊癌的基因治療奠定了基礎(chǔ)。