目的:研究小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞株SCCⅦ體外放射敏感性,并探討其與細(xì)胞周期阻滯的可能關(guān)系。方法:利用細(xì)胞克隆形成試驗及MTT法檢測SCCⅦ細(xì)胞受X射線照射后細(xì)胞存活能力及細(xì)胞生長趨勢的變化,通過流式細(xì)胞學(xué)檢測X射線照射后細(xì)胞周期分布的變化。結(jié)果:相同劑量照射后的SCCⅦ細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)高于Hela細(xì)胞(Plt;0.05);4 Gy照射后的SCCⅦ細(xì)胞在96 h內(nèi)細(xì)胞生長速度仍高于Hela細(xì)胞(Plt;0.05);4 Gy照射后SCCⅦ細(xì)胞G1期和G2期細(xì)胞比例明顯升高(Plt;0.05)。結(jié)論:SCCⅦ細(xì)胞對放射線不敏感性,放射線導(dǎo)致的細(xì)胞周期阻滯是SCCⅦ細(xì)胞放射抵抗的可能原因之一
目的 探討用小RNA 干擾抑制Ku80 基因表達(dá)以提高A549 肺癌細(xì)胞的放射敏感性。方法 設(shè)計并化學(xué)合成Ku80 siRNA, 轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的A549 肺癌細(xì)胞。利用RT-PCR 和Western blot分別從mRNA 和蛋白質(zhì)水平對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞Ku80 基因表達(dá)情況進(jìn)行測定, 同時上述轉(zhuǎn)染的細(xì)胞分別照射2、4、6、8 及10 Gy, 利用克隆形成實驗測定放射敏感性的變化。結(jié)果 RT-PCR 檢測顯示在A549 肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染Ku80 siRNA 后24、48 和72 h 三個時間點Ku80 mRNA 含量減少, Western blot 分析顯示在轉(zhuǎn)染48 和72 h 兩個時間點Ku80 蛋白含量減少, 與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異( P lt;0. 05) 。克隆形成實驗提示A549 肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染Ku80 siRNA 后放射敏感性增強(qiáng)。結(jié)論 Ku80 siRNA 轉(zhuǎn)染A549 肺癌細(xì)胞后能夠有效抑制Ku80 基因表達(dá), 提高其放射敏感性。
對人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系HXO-Rb44放射敏感性研究,發(fā)現(xiàn)經(jīng)3Gygamma;射線照射后,細(xì)胞生長明顯受抑制。集落形成法與MTT法都顯示該細(xì)胞系有較好的放射敏感性。乏氧可使該細(xì)胞系放射抗性增加,亞致死性損傷修復(fù)能力減弱,氧增比(OER)為2.77~3.01。 (中華眼底病雜志,1994,10:217-219)
目的 探討不同劑量X線照射對人結(jié)直腸癌Caco2細(xì)胞系中microRNA-221 (miR-221)和張力蛋白在10號染色體上同源缺失的磷酸酶(PTEN)表達(dá)的影響。方法 常規(guī)培養(yǎng)Caco2細(xì)胞系并分為5組,分別給予不同劑量(0、2、4、6及8 Gy) 的X射線照射,24 h后提取細(xì)胞總RNA和蛋白質(zhì),應(yīng)用real-time RT-PCR方法檢測Caco2細(xì)胞中miR-221和PTEN mRNA的表達(dá)水平,用Western-blot法檢測PTEN蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 Caco2細(xì)胞系在不同劑量的X線照射下,其miR-221表達(dá)水平隨著照射劑量的增加而增高,呈劑量依賴性(P<0.01);PTEN mRNA的表達(dá)水平無明顯變化(P>0.05),但PTEN蛋白表達(dá)水平則隨X線照射劑量的增加而逐漸降低,亦呈劑量依賴效應(yīng)(P<0.01)。結(jié)論 X線照射劑量可影響結(jié)直腸癌Caco2細(xì)胞中miR-221和PTEN蛋白的表達(dá)。
目的探討苦參堿對葡萄膜黑色素瘤細(xì)胞增殖、凋亡及放射敏感性的影響。方法實驗研究。體外實驗:對數(shù)生長期人脈絡(luò)膜黑色素瘤MuM2B細(xì)胞隨機(jī)分為對照組和苦參堿0.25、0.50、1.00、2.00 g/L組。透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。噻唑藍(lán)比色法檢測細(xì)胞增殖;實時定量聚合酶鏈反應(yīng)、蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞周期蛋白D(CyclinD)、B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)mRNA和蛋白相對表達(dá)量。體內(nèi)實驗:BALB/C小鼠于前肢背部皮下注射MuM2B細(xì)胞懸液制備移植瘤模型。建模成功后隨機(jī)分為空白組和不同濃度苦參堿處理組。空白組小鼠瘤周皮下注射磷酸鹽緩沖液;不同濃度苦參堿處理組小鼠瘤周皮下分別注射15、25、50、100 mg/kg苦參堿,連續(xù)7 d。末次給藥后稱取瘤體重量并測量其體積。多組間比較采用單因素方差分析;組間兩兩比較采用t檢驗。結(jié)果對照組細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常,分布均勻,未見或少見核固縮;不同濃度苦參堿組隨濃度升高,細(xì)胞核固縮逐漸增多,細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)明顯變化。與對照組比較,苦參堿0.50、1.00、2.00 g/L組細(xì)胞存活率隨苦參堿濃度升高及作用時間延長,細(xì)胞存活率逐漸降低,細(xì)胞內(nèi)CyclinD、Bcl-2 mRNA和蛋白相對表達(dá)量逐漸降低,Bax mRNA和蛋白相對表達(dá)量逐漸升高;同一放射劑量X線照射下,苦參堿0.50、1.00、2.00 g/L組細(xì)胞存活率逐漸降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與空白組比較,不同劑量苦參堿組小鼠腫瘤重量顯著降低,體積顯著縮小,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論苦參堿通過下調(diào)CyclinD、Bcl-2表達(dá),上調(diào)Bax表達(dá),促進(jìn)人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞增殖,并可提高細(xì)胞放射敏感性。