目的 對微小RNAs（microRNAs，miRNAs）在成骨過程中的調(diào)控作用及作用機(jī)制的研究現(xiàn)狀、存在的爭議以及研究方向作一綜述。 方法 廣泛查閱近年來有關(guān)成骨過程中miRNAs 的調(diào)控作用及作用機(jī)制的文獻(xiàn)，進(jìn)行總結(jié)與分析。 結(jié)果 miRNAs 是近來成骨研究的熱點(diǎn)，越來越多資料顯示其在骨化過程中發(fā)揮重要作用，但確切機(jī)制尚未清楚。 結(jié)論 通過應(yīng)用miRNAs 技術(shù)促進(jìn)成骨細(xì)胞分化，具有巨大的應(yīng)用前景，同時(shí)將可能獲取成骨細(xì)胞分化中的miRNAs 調(diào)控機(jī)制，也有利于建立成骨效果比較的研究模型。
目的 探討組織工程雙相陶瓷樣生物骨（biphasic ceramic-like biologic bone，BCBB）修復(fù)節(jié)段性骨缺損的成骨作用。 方法 取2 周齡日本大耳白兔股骨、脛骨骨髓，分離培養(yǎng)第3 代BMSCs，將密度為1 × 107 個(gè)/mL 細(xì)胞懸液20 μL 接種至15 mm × 5 mm × 5 mm BCBB 骨塊，復(fù)合培養(yǎng)8 d 構(gòu)建組織工程BCBB。另取成年日本大耳白兔48 只，雌雄不限，體重2.5 ～ 3.0 kg，隨機(jī)分成A、B、C、D 4 組（n=12），制備兔雙側(cè)橈骨1.5 cm 骨缺損模型。各組骨缺損處分別植入不同材料，A 組：植入復(fù)合有BMSCs 的組織工程BCBB；B 組：單純植入BCBB；C 組：植入自體髂骨；D 組：不植入任何材料，作為空白對照。術(shù)后4、8、12、24 周取材，經(jīng)大體觀察、X 線片和組織學(xué)檢測，評價(jià)組織工程BCBB 的成骨作用。 結(jié)果 X 線片觀察：A、B 組術(shù)后4 周，材料密度較宿主骨高，材料與宿主骨分界清楚；8 周A、B 組材料與宿主骨分界模糊；12 周A 組材料邊緣部分密度接近橈骨，中份有部分高密度影，B 組大部分材料呈高密度影；24 周A 組髓腔再通，少量未吸收的材料密度增高，B 組材料仍有部分高密度影；C 組術(shù)后4 周植骨與宿主骨分界模糊，8 周形成髓腔，12 周完成髓腔改建，24 周植骨部位密度與宿主骨一致，未見殘余高密度影；D 組各時(shí)間點(diǎn)均未見骨連接或髓腔再通。X 線片評分：A 組術(shù)后12、24 周均優(yōu)于B 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；但A、B 組各時(shí)間點(diǎn)均低于C 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05）。組織學(xué)觀察：A 組材料內(nèi)有新骨形成及新骨貼附材料生長，而B 組見新骨貼附材料生長，隨時(shí)間推移材料逐漸降解吸收，新骨形成增多。A 組術(shù)后12、24 周新骨形成面積大于B 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），但A、B 組在各時(shí)間點(diǎn)均少于C 組（P lt; 0.05）。 結(jié)論 組織工程BCBB 成骨能力強(qiáng)于單純BCBB，BCBB 可用作骨組織工程的支架材料。
目的 檢測體外構(gòu)建的組織工程骨移植后兔外周血T細(xì)胞亞群的變化，對移植組織進(jìn)行組織學(xué)觀察，探討以生物衍生材料作為骨組織工程支架材料的可行性。 方法 組織工程骨以兔骨膜來源的成骨細(xì)胞為種子細(xì)胞，經(jīng)抗原自消化、部分脫鈣、凍干后的異體骨為支架材料于體外構(gòu)建。將健康新西蘭白兔48只制成1 cm長橈骨缺損模型后，隨機(jī)分成A～D 4組，每組12只，分別用部分脫鈣凍干骨（partial demineralized freezedried bone,PDFDB）、組織工程骨、自體骨、同種異體骨植入兔橈骨節(jié)段性缺損。術(shù)后1、2、4周取材,用流式細(xì)胞儀檢測4種材料移植早期兔外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化；通過常規(guī)組織學(xué)檢測觀察2、4、8、12周時(shí)4種材料的成骨作用。 結(jié)果 B組術(shù)后2周材料孔隙內(nèi)有成骨細(xì)胞和成軟骨細(xì)胞，可見骨、軟骨混合性新生物形成，周邊分布有破骨細(xì)胞，部分網(wǎng)架呈蠶食狀被破壞吸收。術(shù)后4周，形成的新生骨過渡為編織骨。A、B組材料植入后1、2周外周血CD4+和CD8+ T細(xì)胞較術(shù)前明顯升高(P＜0.05)；術(shù)后4周CD4+ T細(xì)胞較術(shù)前輕度偏高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。C組術(shù)后CD4+和CD8+ T細(xì)胞升高不明顯(P＞0.05)。D組術(shù)后1、2、4周外周血CD4+和CD8+ T細(xì)胞較術(shù)前及其他各組同期均明顯增高(P＜0.05)。 結(jié)論 PDFDB為支架材料構(gòu)建的細(xì)胞材料復(fù)合物移植后外周血T淋巴細(xì)胞增高，但不影響其良好的修復(fù)骨缺損能力，生物衍生骨可作為支架材料應(yīng)用于骨組織工程研究。
目的 評價(jià)3種生物骨衍生材料修復(fù)節(jié)段性骨缺損的成骨作用。方法 將60只健康日本大耳白兔雙側(cè)橈骨中段制成10 mm節(jié)段性骨缺損，并隨機(jī)分為A、B、C、D和E組，每組12只，其中A組植入復(fù)合型完全脫蛋白骨（compositefully deproteinised bone,CFDB）、B組植入部分脫蛋白骨(partially deproteinised bone,PDPB)、C組植入部分脫鈣骨(partially decalcified bone,PDCB)修復(fù)兔橈骨節(jié)段性缺損，D組自體髂骨移植，E組以空白缺損為對照，于術(shù)后4、8、12及24周取材，通過X線攝片和不脫鈣硬組織切片檢測，評價(jià)3種材料的成骨作用。結(jié)果 X線攝片觀察：A、B與C組4周時(shí)材料密度較高；8周時(shí)材料與宿主骨交界處模糊；12周時(shí)材料邊緣部分區(qū)域密度接近宿主骨；24周時(shí)B組髓腔再通，C組缺損區(qū)域密度大部分接近宿主骨，有少許高密度影，A組缺損區(qū)域有較多高密度影。X線片評分4周和8周時(shí)各材料組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)；12周時(shí)B組和C組高于A組(P＜0.05)；24周時(shí)D組＞B組＞C組＞A組(P＜0.05)。經(jīng)組織學(xué)形態(tài)觀察可見4周和8周時(shí)新骨貼附材料生長；以后新骨增多；材料隨著時(shí)間的推移逐漸降解吸收；24周時(shí)成骨量D組gt;B組gt;C組gt;A組(P＜0.05)。結(jié)論 PDPB修復(fù)節(jié)段性骨缺損的效果佳, PDCB效果次之，CFDB效果欠佳。但3種生物骨衍生材料均較自體骨效果差。
為尋找理想的骨移植替代材料，將市售新鮮豬肋骨經(jīng)物理、化學(xué)方法處理后，制得類似人骨的具有天然網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng)的陶瓷樣異種骨（ＣＸＢ）。用ＣＸＢ與兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外混合培養(yǎng)；用ＣＸＢ與自體紅骨髓（ＢＭ）復(fù)合移植于兔的骶棘肌內(nèi)，經(jīng)相差顯微鏡、組織學(xué)和掃描電鏡觀察。結(jié)果表明，ＣＸＢ對兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生長、附著及增殖無不良影響，顯示了良好的組織相容性。ＣＸＢ加ＢＭ植入肌內(nèi)后第２周開始成骨，并隨時(shí)間而增加。至２４周時(shí)有明顯的新骨形成，其新骨生成過程與羥基磷灰石（ＨＡ）加ＢＭ復(fù)合移植相似，但其降解快，形成典型的松質(zhì)骨結(jié)構(gòu)早，而單純植入ＣＸＢ則無新骨形成。探討了復(fù)合移植的成骨機(jī)理及臨床意義。
為研究骨髓基質(zhì)細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下的成骨能力，將家兔骨髓細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)。其中的造血細(xì)胞成分在一周內(nèi)死亡或隨換液而被清除。傳代后改用含10-8 mol/L地塞米松和10 mmol/L β甘油磷酸鈉的條件培養(yǎng)液，經(jīng)活體相差顯微觀察、四環(huán)素?zé)晒鈽?biāo)記、組織化學(xué)染色、透射電鏡、掃描電鏡和X線能譜等方法進(jìn)行觀測。結(jié)果顯示，傳代細(xì)胞培養(yǎng)15天融合成單層后分泌活動增強(qiáng)，培養(yǎng)20天后細(xì)胞形成多層結(jié)構(gòu)，并聚集成多個(gè)散在的不透光結(jié)節(jié)。這些細(xì)胞的ALP染色呈強(qiáng)陽性，結(jié)節(jié)的四環(huán)素?zé)晒鈽?biāo)記、鈣鹽染色均呈強(qiáng)陽性，X線能譜分析顯示結(jié)節(jié)的主要組成元素為鈣和磷。確認(rèn)培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞具有與成骨細(xì)胞相似的形態(tài)特征和生物學(xué)特性，并能在體外形成鈣化的新骨組織。
目的觀察注射型可吸收氨基酸聚合物/硫酸鈣復(fù)合材料動物體內(nèi)的促成骨作用，評估其修復(fù)骨缺損的能力。 方法選取48只新西蘭大白兔，雌雄各半，體質(zhì)量2.0～2.5 kg。選擇兔單側(cè)股骨髁處鉆孔制備骨缺損模型，將材料植入骨缺損處，以空白組作為對照，分別在術(shù)后4、8、12、16周處死動物取材，行X線攝片、硬組織切片組織學(xué)檢查等，觀察材料降解、吸收及成骨情況。 結(jié)果實(shí)驗(yàn)組骨缺損孔道術(shù)后4周時(shí)X線片不顯影，無明顯骨痂生長；組織學(xué)可見材料開始降解，內(nèi)部新生幼稚骨小梁。8周時(shí)X線片有少量骨痂生長；組織學(xué)可見材料繼續(xù)降解，缺損內(nèi)可見繼續(xù)增多的排列不規(guī)則的新生骨小梁。12周時(shí)骨痂明顯有生長，骨缺損區(qū)殘留較小低密度影；組織學(xué)示材料大部分降解，部分區(qū)域編織骨開始轉(zhuǎn)化為板層骨。16周時(shí)新骨長入，恢復(fù)正常松質(zhì)骨密度；組織學(xué)可見材料基本完全降解，被新生骨替代，大部分新生骨已具有正常骨小梁結(jié)構(gòu)?？瞻讓φ战M骨缺損孔道術(shù)后12周內(nèi)無明顯變化，術(shù)后16周時(shí)部分骨缺損孔道變小，邊緣可見部分修復(fù)。 結(jié)論注射型可吸收氨基酸聚合物/硫酸鈣復(fù)合材料在體內(nèi)能夠完全降解、吸收，具有良好的成骨活性，有望成為理想的骨修復(fù)材料。
目的 對硫酸乙酰肝素（heparan sulfate，HS）在骨形成和骨重建方面的作用進(jìn)行討論，綜述其成骨機(jī)制的最新研究進(jìn)展。 方法 查閱國內(nèi)外有關(guān) HS 體外作用于成骨細(xì)胞系、HS 和 HS 復(fù)合支架材料作用于骨缺損動物模型以及 HS 蛋白聚糖影響骨骼發(fā)育的研究文獻(xiàn)，并進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果 HS 長鏈通過非共價(jià)結(jié)合方式和參與骨折愈合的生長因子結(jié)合，尤其是肝素結(jié)合性生長因子（如 FGFs、BMP、TGF-β）等，保護(hù)這些生長因子免受蛋白酶降解，并可直接參與生長因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和骨細(xì)胞功能調(diào)節(jié)。HS 調(diào)控成骨作用機(jī)制主要包括：刺激干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化、提高成骨細(xì)胞分化能力、促進(jìn)骨基質(zhì)形成、維持骨基質(zhì)穩(wěn)定和加速骨基質(zhì)礦化。 結(jié)論 HS 的成骨作用顯著，隨著對其安全性的不斷探索完善，HS 可能成為臨床治療骨缺損延遲愈合和不愈合的有效手段，并有望為骨組織工程技術(shù)提供更多選擇。