目的評價小承氣合劑對促進(jìn)結(jié)腸吻合術(shù)后吻合口組織愈合的作用。方法選用Wistar大鼠40只,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為實驗組(n=20)與對照組(n=20),2組均行結(jié)腸切除吻合術(shù)造模。實驗組大鼠術(shù)后早期灌服小承氣合劑,對照組大鼠同期灌服凈化自來水。分別于術(shù)后第3、7和14天每組取相同數(shù)量大鼠進(jìn)行剖腹探查,取吻合口及周圍肉芽組織,檢測羥脯氨酸含量和膠原纖維密度(Masson染色)。結(jié)果術(shù)后第3天,吻合口膠原已經(jīng)開始增生,但纖維纖細(xì),尚未形成束狀纖維束,實驗組大鼠羥脯氨酸含量及膠原纖維密度較對照組增高(Plt;0.05); 術(shù)后第7天開始出現(xiàn)明顯纖維化,但纖維束較細(xì),纖維排列紊亂,實驗組大鼠羥脯氨酸含量及膠原纖維密度明顯高于對照組(Plt;0.01)。術(shù)后第14天,吻合口組織呈現(xiàn)廣泛纖維化,且纖維束較粗,排列較整齊,2組大鼠羥脯氨酸含量及膠原纖維密度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05)。結(jié)論小承氣合劑可促進(jìn)術(shù)后胃腸吻合口愈合,可能有益于結(jié)腸吻合口漏的預(yù)防。
目的綜述生物敷料的研究進(jìn)展。 方法查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn),從生物敷料概況以及各類型生物敷料研究進(jìn)展方面進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果與傳統(tǒng)敷料相比,生物敷料可更好地促進(jìn)傷口愈合。生物敷料主要分為天然材料類、人工合成材料類和載藥類敷料,其中天然材料類敷料以海藻酸鹽敷料為主,該類敷料促進(jìn)傷口愈合已獲大量研究證實;人工合成材料類敷料包括薄膜類、液體類、水膠體類、水凝膠類及泡沫類,各具優(yōu)缺點,可根據(jù)需要選用;載藥類敷料可發(fā)揮負(fù)載藥物的作用,進(jìn)一步促進(jìn)傷口愈合,采用微囊技術(shù)構(gòu)建敷料以及選擇中藥作為負(fù)載藥物是其研究方向。 結(jié)論目前研究的生物敷料類型較多,其臨床應(yīng)用前景廣泛,但各有優(yōu)缺點,有待進(jìn)一步研究完善其功效。
【摘要】目的探討重組人表皮生長因子(rhEGF)對家兔小腸吻合口愈合的促進(jìn)作用。方法將48只實驗兔隨機(jī)均分為實驗組及對照組,均行近端小腸部分切除再吻合術(shù),實驗組動物于吻合時行rhEGF黏膜下注射。行外周血WBC計數(shù),觀察吻合口膠原纖維及羥脯氨酸的合成以及吻合口漏發(fā)生率。結(jié)果兩組術(shù)后3 d、5 d及7 d 與術(shù)前比較WBC略有升高,但差異無顯著性意義(Pgt;0.05)。實驗組吻合口漏發(fā)生率為4.3%,而對照組為16.7%。實驗組術(shù)后3 d、5 d及7 d膠原纖維面積密度較對照組明顯增多,吻合口周圍成纖維細(xì)胞明顯增多,核大、濃染且胞漿豐富。實驗組吻合口組織新生血管較多且有正常腺管結(jié)構(gòu),而對照組黏膜細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞重。羥脯氨酸生成在術(shù)后5 d及7 d實驗組與對照組相比差異有顯著性意義(P<0.05)。結(jié)論炎癥反應(yīng)存在于創(chuàng)傷修復(fù)的全過程,但EGF局部應(yīng)用對全身炎性反應(yīng)的影響不大。 rhEGF有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合、細(xì)胞向創(chuàng)面遷移的作用,使成纖維細(xì)胞增多,膠原纖維合成及轉(zhuǎn)運(yùn)加快,同時促進(jìn)創(chuàng)面新生血管產(chǎn)生,可有效促進(jìn)吻合口的愈合,防止吻合口漏的發(fā)生。
目的 觀察頸闊肌皮瓣修復(fù)頸段食管后在食管腔內(nèi)的病理變化及修復(fù)重建頸段食管的臨床療效.方法 建立頸闊肌皮瓣修復(fù)頸段食管缺損的家犬模型12只,定期活殺取材,對頸闊肌皮瓣和肌皮瓣食管吻合部進(jìn)行大體、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡和免疫組織化學(xué)觀察.測定頸闊肌皮瓣食管吻合部的抗張強(qiáng)度(WBS)、Ⅰ型前膠原(PCⅠ)及Ⅲ型前膠原(PCⅢ)含量的變化.隨訪臨床應(yīng)用頸闊肌皮瓣的33例患者,評價其臨床療效.結(jié)果 頸闊肌皮瓣在食管腔內(nèi)仍有毛發(fā)生長,上皮保持角化,肌皮瓣上皮有"皮膚型"角蛋白表達(dá),無"食管型"角蛋白表達(dá).術(shù)后1個月內(nèi)肌皮瓣食管吻合部的愈合比皮膚傷口延遲7~14天,術(shù)后6個月肌皮瓣食管吻合部有疤痕增生.肌皮瓣食管吻合部堿性成纖維細(xì)胞生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子β1開始表達(dá)的時間較正常皮膚傷口晚,表達(dá)的強(qiáng)度減弱,表達(dá)的持續(xù)時間延長.肌皮瓣食管吻合部WBS和PCⅠ含量在1個月內(nèi)明顯低于皮膚傷口,術(shù)后3個月無明顯差異,術(shù)后6個月PCⅠ含量明顯高于皮膚傷口和正常皮膚,PCⅢ含量達(dá)最大值的時間比皮膚傷口延遲.肌皮瓣在食管腔內(nèi)無潰瘍、毛發(fā)生長和癌變,頸闊肌皮瓣修復(fù)重建頸段食管術(shù)后患者吞咽功能恢復(fù)滿意.結(jié)論 術(shù)后6個月內(nèi),頸闊肌皮瓣在食管腔內(nèi)無明顯變化.肌皮瓣食管吻合部早期愈合延遲、后期疤痕增生可能是肌皮瓣修復(fù)重建食管后吻合口瘺和狹窄發(fā)生率高的重要原因.頸闊肌皮瓣是修復(fù)重建頸段食管的較好方法之一.
目的 評價犬脫細(xì)胞肌腱片(decellularized tendon slices,DTSs)對兔肩袖損傷腱-骨愈合的作用。 方法取成年比格犬跟腱經(jīng)反復(fù)凍融5次結(jié)合核酸酶處理12 h制備DTSs,體外對DTSs行組織學(xué)觀察和細(xì)胞相容性評價。取成年雄性新西蘭大白兔24只,體重2.5~3.0 kg,隨機(jī)選取一側(cè)肩關(guān)節(jié)自岡下肌腱止點處縱向作寬大于正常肌腱50%、長為8 mm的U形缺損,用犬DTSs修復(fù)岡下肌腱缺損并重建腱-骨止點(實驗組);對側(cè)肩關(guān)節(jié)不作任何處理(對照組)。術(shù)后4、8、12周取兩組標(biāo)本行組織學(xué)觀察和生物力學(xué)測試。 結(jié)果體外組織學(xué)觀察示犬DTSs膠原結(jié)構(gòu)保留完整,無細(xì)胞殘留;細(xì)胞相容性實驗示成纖維細(xì)胞與DTSs良好黏附。生物力學(xué)測試示,隨時間延長,實驗組最大載荷和剛度均呈增加趨勢,12周時顯著高于4周及8周(P lt; 0.05);除12周實驗組最大載荷與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.969,P=0.361)外,其余各時間點實驗組最大載荷及剛度均顯著小于對照組(P lt; 0.05)。組織學(xué)觀察示,對照組可見腱-骨止點的4層結(jié)構(gòu)。實驗組術(shù)后4周腱-骨界面由肉芽組織填充,少量類似Sharpey纖維連接于腱-骨間;隨時間延長肉芽組織界面消失,成纖維細(xì)胞、Sharpey纖維、新生軟骨和軟骨細(xì)胞數(shù)量增多,腱-骨界面逐漸成熟,但未見位于礦化纖維軟骨與非礦化纖維軟骨間的潮線。 結(jié)論經(jīng)反復(fù)凍融5次結(jié)合核酸酶處理12 h制備的犬DTSs 可促進(jìn)兔肩袖損傷腱-骨愈合,提高肩袖損傷修復(fù)的生物力學(xué)性能。
目的觀察射頻消融技術(shù)用于豬感染創(chuàng)面病灶清除的效果,探討其能否促進(jìn)感染創(chuàng)面愈合。方法選取8只6月齡小型豬(體重30~35 kg),于脊柱兩側(cè)采用Davis等的感染創(chuàng)面制作方法制備全層皮膚缺損感染創(chuàng)面模型(面積約6.15 cm2/孔)。將160個感染創(chuàng)面隨機(jī)分為4組,每組40個,分別用射頻消融技術(shù)(A組)、電刀(B組)、普通刀片(C組)對創(chuàng)面進(jìn)行病灶清除,對照組(D組)不作處理。各組于術(shù)后0、2、7、14 d行創(chuàng)面愈合率、組織填充率、細(xì)菌定量檢查及組織學(xué)觀察,并記錄創(chuàng)面完全愈合時間。 結(jié)果160個創(chuàng)面接種金黃色葡萄球菌稀釋液48 h后均成功制成感染性創(chuàng)面。A組射頻消融治療后的創(chuàng)面出血很少,創(chuàng)面新鮮、平整;創(chuàng)面愈合時間顯著短于其余3組,7、14 d時創(chuàng)面愈合率顯著高于其余3組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。術(shù)后2 d,A組創(chuàng)面組織填充率高于B、C、D組(P lt; 0.05);7、14 d時A、B、C組創(chuàng)面組織填充率均高于D組(P lt; 0.05)。術(shù)后0、2、7、14 d,各組創(chuàng)面每克組織細(xì)菌含量比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05),從低到高依次是A、B、C、D組。組織學(xué)觀察示,術(shù)后0 d A組創(chuàng)面平整,優(yōu)于其余3組;2 d各組創(chuàng)面均有較多滲出物,其中A組最少;7、14 d各組創(chuàng)面新生真皮內(nèi)均存在不同程度炎性細(xì)胞浸潤,D組最重、A組最輕,A組新生上皮較厚、膠原束較致密,B、C組次之,D組最差。 結(jié)論射頻消融技術(shù)能有效去除豬感染創(chuàng)面的壞死組織,創(chuàng)面細(xì)菌數(shù)量顯著減少,提高了創(chuàng)面愈合率,進(jìn)而縮短創(chuàng)面愈合時間。
目的觀察粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating factor,GM-CSF)局部應(yīng)用于草酸鉑腹腔化療下大鼠結(jié)腸吻合口愈合過程中的組織學(xué)變化,探討其作用機(jī)制。 方法10周齡清潔級雄性Wistar大鼠60只,體重(235 ± 18) g,制備結(jié)腸吻合模型,隨機(jī)分為3組(n=20)。術(shù)后1 d,A、B組腹腔對應(yīng)注射10 mL 5%葡萄糖溶液、10 mL含草酸鉑(25 mg/kg)的5%葡萄糖溶液;C組術(shù)后即刻吻合口區(qū)域注射50 μg GM-CSF,術(shù)后1 d腹腔注射10 mL含草酸鉑(25 mg/kg)的5%葡萄糖溶液。術(shù)后觀察大鼠一般情況,于2、3、5、7 d測量吻合口破裂壓,組織學(xué)觀察并計算吻合口愈合指數(shù),免疫組織化學(xué)染色檢測Ⅰ型膠原纖維陽性染色面積。 結(jié)果術(shù)后各組大鼠均存活至實驗完成。術(shù)后2、3 d 各組吻合口破裂壓相似(P gt; 0.05);5、7 d時,B組吻合口破裂壓顯著低于A、C組(P lt; 0.05),A、C組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。吻合口愈合指數(shù)結(jié)果示,術(shù)后各時間點,A、C組間單核細(xì)胞浸潤、黏膜上皮細(xì)胞覆蓋、黏膜下層-肌層銜接程度及肉芽組織形成相似(P gt; 0.05),A、C組黏膜上皮細(xì)胞覆蓋及肉芽組織形成均顯著優(yōu)于B組(P lt; 0.05);術(shù)后2、3 d,A、C組單核細(xì)胞浸潤顯著優(yōu)于B組(P lt; 0.05),5、7 d黏膜下層-肌層銜接程度優(yōu)于B組(P lt; 0.05)。術(shù)后2、3 d,各組Ⅰ型膠原纖維陽性染色面積比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05);5、7 d時A、C組Ⅰ型膠原纖維陽性染色面積顯著高于B組(P lt; 0.05),A、C組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論局部注射GM-CSF可通過早期動員巨噬細(xì)胞浸潤,提高大鼠黏膜下層膠原纖維沉積,從而加速結(jié)腸愈合進(jìn)程。
【摘 要】 目的 總結(jié)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)移植治療骨折外露性難愈創(chuàng)面的效果。 方法 2008 年9 月收治1 例45 歲機(jī)器軋燙傷致左橈骨遠(yuǎn)1/3 處骨折、伴骨折淺面伸指肌群和皮膚全層毀損創(chuàng)面患者,給予腹部帶蒂皮瓣修復(fù)。術(shù)后骨折端出現(xiàn)感染并破潰形成竇道,經(jīng)長時間封閉式負(fù)壓吸引、外用生長因子類藥物加強(qiáng)換藥,創(chuàng)面及骨折仍不愈合。于傷后6 個月,采用注射1 × 106 個/mL UCMSCs 細(xì)胞懸液1 mL 至竇道并填滿創(chuàng)腔治療,每隔2 ~ 3 d 治療1 次,至創(chuàng)面愈合。 結(jié)果 治療4 次后創(chuàng)面肉芽組織迅速增生填滿竇道并上皮化,12 d創(chuàng)面愈合。X 線片隨訪示治療后骨折端骨痂開始大量生長、骨折線漸模糊。傷后1 年患者入院行皮瓣修薄術(shù),見局部皮膚穩(wěn)定無潰破,骨折愈合并重塑。 結(jié)論 UCMSCs 移植改變了骨折外露創(chuàng)面遷延不愈的修復(fù)進(jìn)程,促進(jìn)了創(chuàng)面和骨折愈合,但其有效性及安全性尚需大樣本隨訪觀察。
【摘 要】 目的 體外觀察白芷活性提取物對人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞(keratinocytes,KC)生物學(xué)特性的影響,初步探討其促進(jìn)創(chuàng)面愈合的可能機(jī)制。 方法 取人皮膚KC的HaCaT細(xì)胞株,復(fù)蘇培養(yǎng)取第5代細(xì)胞進(jìn)行實驗。取白芷生藥95%乙醇提取后,將其活性提取物溶解于含0.25% FBS的DMEM培養(yǎng)液中,稀釋至5 × 10-2、5 × 10-3、5 × 10-4、5 × 10-5 g/L,分別與KC培養(yǎng)5 d后采用MTT法測定細(xì)胞增殖活性,以含0.25% FBS的DMEM培養(yǎng)作為對照。根據(jù)細(xì)胞增殖活性確定最佳濃度后,取KC分別采用最佳濃度白芷活性提取液(實驗組)及含0.25% FBS的DMEM(對照組)培養(yǎng)。培養(yǎng)48 h后流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞周期,實時熒光定量PCR檢測細(xì)胞周期相關(guān)基因細(xì)胞周期素D1(cyclin D1)、凋亡相關(guān)基因天冬氨酸半胱氨酸酶3(Caspase-3)mRNA 的表達(dá)。 結(jié)果 培養(yǎng)5 d后,MTT測定5 × 10-4、5 × 10-3、5 × 10-2 g/L濃度可促進(jìn)KC增殖,吸光度(A)值與對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05);其中5 × 10-3 g/L濃度組A值最高,確定為最佳濃度。實驗組S期及G2/M期細(xì)胞數(shù)量較對照組明顯增多,G0/G1期細(xì)胞數(shù)量明顯減少,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。實驗組cyclin D1及Caspase-3 mRNA相對表達(dá)量均低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 白芷活性提取物能促進(jìn)KC增殖,同時下調(diào)cyclin D1的表達(dá)加快細(xì)胞周期進(jìn)程,下調(diào)Caspase-3的表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡,以加快上皮化進(jìn)程促進(jìn)創(chuàng)面愈合。
目的 富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)具有促進(jìn)損傷組織修復(fù)作用。通過觀察PRP 局部注射對大鼠跟腱斷裂早期愈合的影響,為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 方法 SPF 級SD 大鼠46 只,雌雄不限,體重190 ~ 240 g。取10 只大鼠心臟動脈血制備PRP 及貧血小板血漿(platelet-poor plasma,PPP);其余36 只隨機(jī)分為3 組(n=12),分別為空白對照組、PPP 組及PRP 組。大鼠制備雙側(cè)跟腱斷裂模型后,PPP 組和PRP 組跟腱周圍局部對應(yīng)注射PPP 及PRP,每側(cè)100 μL,每周1 次至處死;空白對照組不作處理。術(shù)后觀察大鼠一般情況,于1、2、3、4 周取雙側(cè)跟腱,行大體、組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色觀察,測量新生跟腱Ⅰ型膠原纖維含量;并于4 周行生物力學(xué)測試。 結(jié)果 大鼠均存活至實驗完成。隨著時間延長,各組大鼠跟腱水腫逐漸減退,滑動性逐漸改善;術(shù)后3 周內(nèi)各組跟腱粘連逐漸加重,4 周時減輕,1、4 周時各組跟腱粘連程度分級差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。術(shù)后1 周PRP 組炎性細(xì)胞浸潤、毛細(xì)血管及膠原纖維增殖較空白對照組、PPP 組明顯,之后炎性反應(yīng)及毛細(xì)血管生成逐漸減少。各時間點各組均可見Ⅰ型膠原纖維陽性表達(dá),術(shù)后1、2、3 周PRP 組Ⅰ型膠原纖維陽性密度值多于空白對照組和PPP 組(P lt; 0.05),4 周時3 組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05)。生物力學(xué)測試:術(shù)后4 周3 組跟腱最大滑動距離比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05);PRP 組跟腱彈性模量及最大抗拉力明顯高于空白對照組及PPP 組(P lt; 0.05)。 結(jié)論 大鼠跟腱斷裂早期于斷端周圍注射PRP 能促進(jìn)跟腱愈合。