【摘 要】 目的 探討毛乳頭細胞對表皮干細胞與同種異體脫細胞真皮基質構建的組織工程皮膚血管化的影響。 方法 取門診包皮環(huán)切術患者皮膚，用于表皮細胞培養(yǎng)；取孕19、20 周引產胎兒頭部皮膚，用于毛乳頭細胞培養(yǎng)；患者及家屬均知情同意。以中性蛋白酶聯(lián)合胰蛋白酶消化、分離表皮細胞，Ⅳ型膠原黏附法分選表皮干細胞；以Ⅰ型膠原酶消化法分離毛乳頭，常規(guī)成纖維細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)。以同種異體脫細胞真皮基質為支架，在真皮基質的真皮乳頭側種植毛乳頭細胞，基底膜側種植表皮干細胞構建實驗組組織工程皮膚替代物；對照組組織工程皮膚替代物不種植毛乳頭細胞。取6 ～ 8 周齡BALB/C-nu 裸鼠60 只，隨機分成實驗組和對照組（n=30）；實驗動物背部制造1 cm × 1 cm 大小全層皮膚缺損模型，將兩組組織工程皮膚替代物移植修復創(chuàng)面，2 周后觀察移植皮膚成活率。術后2、4 周，取移植皮膚替代物標本，行HE 及免疫組織化學染色，觀察移植皮膚替代物CD31 表達水平，并計算兩組標本血管密度。 結果 Ⅳ型膠原分選后表皮細胞同時表達角蛋白19、β1 整合素，提示為表皮干細胞。由毛乳頭培養(yǎng)出的細胞表達α 平滑肌肌動蛋白，提示為毛乳頭細胞。動物移植術后2 周，實驗組移植皮膚成活率為93.3%（28/30），對照組為80.0%（24/30），比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2=2.31，P=0.00）。HE 染色觀察示實驗組表皮層達12 層，表皮細胞體積較大；對照組表皮層達4 ～ 6 層，表皮細胞體積較小。實驗組術后2、4 周，血管密度分別為（38.56 ± 2.49）個/mm2 和（49.12 ± 2.39）個/mm2，對照組分別為（25.16 ± 3.73） 個 / mm2 和（36.26 ± 3.24） 個 / mm2，兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。 結論 毛乳頭細胞可促進移植皮膚替代物血管形成，利于表皮層重建，提高組織工程皮膚移植成活率。