目的?觀察光化學(xué)組織黏合(photochemical tissue bonding,PTB)技術(shù)用于修復(fù)角膜緣干細(xì)胞缺失的可行性及其對角膜愈合的影響。?方法?取新西蘭大白兔角膜緣組織,采用組織塊法培養(yǎng)角膜緣干細(xì)胞,取第2代細(xì)胞種植于完全刮除上皮細(xì)胞的人羊膜上,復(fù)合培養(yǎng)3周,制備復(fù)合培養(yǎng)移植物。3~4月齡雌性新西蘭大白兔24只,體重1.5~2.0 kg;用0.5 mol/L NaOH 灼燒法于左眼制備角膜緣干細(xì)胞缺失模型,分別采用PTB技術(shù)(PTB組,n=12)及傳統(tǒng)縫線(縫合組,n=12)縫合復(fù)合培養(yǎng)移植物與角膜創(chuàng)面。術(shù)后大體觀察角膜情況,并于3 d及28 d取角膜行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色,觀察炎性反應(yīng)及血管生成情況;ELISA法檢測IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白含量。?結(jié)果?實驗動物均存活至實驗完成。術(shù)后3 d兩組角膜透明度無明顯差異;28 d 時PTB組角膜透明度較縫合組高,新生血管形成少。組織學(xué)觀察示,術(shù)后3 d兩組復(fù)合培養(yǎng)移植物與角膜基底間均有大量炎性細(xì)胞浸潤,PTB組程度略輕,無新生血管形成;28 d時PTB組炎性細(xì)胞明顯較縫合組減少,PTB組新生血管數(shù)為(2.0 ± 0.8)個/HP,縫合組為(6.3 ± 1.3) 個/HP,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=7.966,P=0.002)。術(shù)后3 d兩組角膜組織中IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白含量均較高,組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05);28 d時PTB組以上指標(biāo)均較縫合組明顯降低(P lt; 0.05)。?結(jié)論?PTB技術(shù)可用于固定兔角膜移植物;與傳統(tǒng)縫線縫合方法相比,PTB技術(shù)可減輕組織炎癥、減少角膜血管新生,從而改善角膜緣干細(xì)胞缺失修復(fù)效果。
使用示例剖析的方法,展示中醫(yī)藥動物實驗系統(tǒng)評價的 PubMed 檢索策略,為提高衛(wèi)生工作者與科研人員中醫(yī)藥動物實驗的文獻(xiàn)檢索與構(gòu)建檢索策略的能力提供參考。
目的?通過臨床對比研究,探討重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGMCSF)凝膠劑對深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面溶痂及愈合的作用及其機制。?方法?以2008年12月-2010年12月收治的符合選擇標(biāo)準(zhǔn)的58例深Ⅱ度燒傷患者作為試驗對象。男36例,女22例;年齡12~67歲,平均32.4歲。熱液燙傷38例,火焰燒傷20例。受傷至治療時間為1~3 d,平均2.1 d。采用隨機雙盲、自身對照方法,分為給予rhGMCSF凝膠劑治療組(試驗組)及不含rhGMCSF的凝膠劑基質(zhì)治療組(對照組)。兩組用藥面積比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P gt; 0.05),具有可比性。用藥后觀察創(chuàng)面情況,于2、6、10、14、18 d計算創(chuàng)面溶痂率,記錄完全溶痂時間及創(chuàng)面愈合時間。?結(jié)果?與對照組相比,試驗組用藥4 d后黃白色壞死組織或痂皮逐漸變軟;6 d后壞死組織易浮動而脫落或痂皮邊緣翹起,基底紅白相間,深層肉芽組織增長迅速;8 d時痂皮基本溶解。用藥2 d后試驗組創(chuàng)面溶痂率即高于對照組,除用藥后18 d,其余各時間點兩組創(chuàng)面溶痂率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。試驗組完全溶痂時間為(7.71 ± 2.76)d,較對照組(14.71 ± 3.63)d明顯縮短(t=13.726,P=0.000);創(chuàng)面愈合時間為(18.41 ± 2.47) d,亦較對照組(23.58 ± 3.35)d明顯縮短(t=15.763,P=0.000)。?結(jié)論?rhGMCSF凝膠劑與單純凝膠劑基質(zhì)相比能促進深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面壞死組織脫落,加快創(chuàng)面愈合。