目的探討天然水蛭素對(duì)大鼠背部隨意皮瓣早期斷蒂后成活的影響。 方法取成年Wistar大鼠38只，雌雄不限，體重220～280 g；隨機(jī)分成天然水蛭素組（實(shí)驗(yàn)組）和生理鹽水組（對(duì)照組），每組19只。于兩組大鼠背部制備大小為9 cm × 3 cm的隨意皮瓣后，A組在距蒂部2、4、8 cm處選擇6個(gè)對(duì)稱注射點(diǎn)，每點(diǎn)注射0.5 mL（3 ATU）天然水蛭素；對(duì)照組對(duì)應(yīng)注射等量生理鹽水；每天注射1次至實(shí)驗(yàn)完成，術(shù)后4 d斷蒂。大體觀察大鼠皮瓣成活情況，并于斷蒂術(shù)后7 d測(cè)量皮瓣成活面積百分比。于皮瓣制備后即刻、斷蒂術(shù)前1 d及斷蒂術(shù)后3、7 d，取標(biāo)本行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色觀察，測(cè)量微血管密度（microvessel density，MVD），熒光定量RT-PCR檢測(cè)VEGF mRNA的表達(dá)。 結(jié)果兩組大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成。斷蒂術(shù)后實(shí)驗(yàn)組皮瓣壞死范圍均小于對(duì)照組，7 d時(shí)實(shí)驗(yàn)組皮瓣成活面積百分比為85.366% ± 2.872%，顯著高于對(duì)照組的75.252% ± 3.455%（t=7.117，P=0.000）。組織學(xué)觀察示皮瓣制備后即刻兩組毛細(xì)血管無(wú)顯著差異，但斷蒂術(shù)前1 d及斷蒂術(shù)后3、7 d實(shí)驗(yàn)組毛細(xì)血管均明顯多于對(duì)照組。免疫組織化學(xué)染色示，兩組均有CD34陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)；但斷蒂術(shù)前1 d及斷蒂術(shù)后3、7 d，實(shí)驗(yàn)組MVD均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。斷蒂術(shù)后7 d，熒光定量RT-PCR 檢測(cè)示實(shí)驗(yàn)組VEGF mRNA表達(dá)量為7.122 ± 0.503，對(duì)照組為5.655 ± 1.174，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.633，P=0.003）。 結(jié)論天然水蛭素可以通過(guò)提高VEGF的表達(dá)，促進(jìn)大鼠背部隨意皮瓣血管生成，改善皮瓣血供，促進(jìn)隨意皮瓣早期斷蒂并成活。
目的 探討局部應(yīng)用天然水蛭素對(duì)豬隨意型皮瓣移植后靜脈淤血的影響。 方法 6 ～ 8 月齡廣西巴馬小型豬3 只，雌雄不限，體重10 ～ 15 kg。于每只豬背兩側(cè)制備6 個(gè)大小為14 cm × 4 cm 的隨意型皮瓣，共18 個(gè)皮瓣。根據(jù)術(shù)后注射藥物不同，皮瓣隨機(jī)分為3 組（n=6）。術(shù)后即刻、1、2、3 d，A 組：局部注射3 mL 生理鹽水，作為對(duì)照組；B 組：局部注射3 mL 天然水蛭素20 ATU；C 組：局部注射3 mL 天然水蛭素40 ATU。術(shù)后1、10 d 行大體觀察，1、7d 行組織學(xué)觀察，3、7 d 測(cè)定濕重/ 干重比值，5 d 測(cè)定皮瓣表面溫度，7 d 皮瓣局部血流彩色超聲檢測(cè)，12 d 測(cè)定皮瓣成活率。 結(jié) 果 術(shù)后即刻，3 組皮瓣均出現(xiàn)遠(yuǎn)端2/3 范圍內(nèi)輕度淤血，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；術(shù)后1 d，A 組皮瓣淤血長(zhǎng)度明顯長(zhǎng)于B、C 組（P lt; 0.05），B、C 組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；術(shù)后10 d，A、C 組皮瓣壞死長(zhǎng)度明顯長(zhǎng)于B 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），A、C 組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。組織學(xué)觀察：術(shù)后1 d，B 組真皮內(nèi)毛細(xì)血管及微靜脈紅細(xì)胞淤滯現(xiàn)象較A 組明顯減輕；術(shù)后7 d，B 組皮下膠原及肉芽組織增生明顯優(yōu)于A 組。術(shù)后3 d，A、B、C 組濕重/ 干重比值分別為3.94 ± 0.14、3.43 ± 0.14、3.60 ± 0.19，A 組與B、C 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），B、C 組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05） ；術(shù)后7 d，A、B、C 組濕重/ 干重比值分別為3.61 ± 0.11、3.08 ± 0.13、3.34 ±0.21，A 組與B、C 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），B、C 組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。術(shù)后5 d，A、B、C 組皮瓣表面溫度分別為（36.64 ± 0.70）、（38.61 ± 0.42）和（37.50 ± 0.46）℃，A 組與B、C 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05），B、C 組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。術(shù)后7 d，皮瓣局部血流彩色超聲檢測(cè)示A 組血流信號(hào)稀少，B 組見(jiàn)較完整的動(dòng)靜脈回流信號(hào)，可見(jiàn)垂直于皮膚的動(dòng)脈穿支，C 組可見(jiàn)動(dòng)脈血流信號(hào)。術(shù)后12 d，A、B、C 組皮瓣成活率分別為45% ± 7%、67% ± 4%、52% ± 4%，B、C 組與A 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），B、C 組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 局部應(yīng)用天然水蛭素對(duì)豬隨意型皮瓣移植后靜脈淤血有較明顯的改善作用。
目的通過(guò) Micro-CT 及三維重建技術(shù)觀察天然水蛭素對(duì)大鼠缺血皮瓣血管生成的影響。方法選取 32 只成年 SD 大鼠，在其背部制備一8.0 cm×1.8 cm 大小的缺血皮瓣模型，然后隨機(jī)分為水蛭素組和對(duì)照組（n=16）。水蛭素組術(shù)后即刻和術(shù)后 3 d 內(nèi)每天皮下注射天然水蛭素 0.3 mL（含天然水蛭素 6 ATU），對(duì)照組皮下注射等量生理鹽水。術(shù)后 6 d，大體觀察皮瓣成活情況并測(cè)定皮瓣成活率，取材行 HE 染色觀察皮瓣組織學(xué)變化，行 Micro-CT 三維重建觀察并測(cè)量皮瓣血管容積、長(zhǎng)度及數(shù)量。結(jié)果術(shù)后兩組大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成，無(wú)感染發(fā)生。術(shù)后 6 d，兩組皮瓣遠(yuǎn)端均發(fā)生不同程度壞死，水蛭素組皮瓣成活率為 72.11%±8.97%，顯著高于對(duì)照組的58.94%±4.02%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.280，P=0.008）。組織學(xué)觀察示水蛭素組較對(duì)照組組織結(jié)構(gòu)層次更清楚，有較多微血管生成，炎癥反應(yīng)及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)更輕。Micro-CT 三維重建示水蛭素組皮瓣血管更多、更加密集；血管容積、長(zhǎng)度及數(shù)量均顯著大于對(duì)照組（P<0.05）。結(jié)論天然水蛭素可減輕組織炎癥反應(yīng)、促進(jìn)缺血皮瓣血管的新生與再通，從而提高皮瓣成活率。