華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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    發(fā)表時(shí)間:2016-09-02 05:21 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 實(shí)驗(yàn)性視網(wǎng)膜脫離后光感受器細(xì)胞的壞死性凋亡

    目的觀察實(shí)驗(yàn)性視網(wǎng)膜脫離后光感受器細(xì)胞壞死性凋亡的形態(tài)學(xué)特點(diǎn), 初步探討其發(fā)生機(jī)制。 方法雄性健康的Sprague-Dawley大鼠60只, 右眼視網(wǎng)膜下注入1%透明質(zhì)酸納50 μl建立視網(wǎng)膜脫離模型作為實(shí)驗(yàn)組, 左眼不作處理為對(duì)照組。建模后3 d, 采用電子顯微鏡觀察光感受器細(xì)胞的死亡方式及形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。建模后3 d, 提取大鼠視網(wǎng)膜組織, 采用蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)裂解的半胱氨酸蛋白酶(Caspase)8的相對(duì)蛋白表達(dá); 采用免疫沉淀法檢測(cè)磷酸化受體相互作用蛋白1(p-RIP1)的相對(duì)蛋白表達(dá)。 結(jié)果電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn), 視網(wǎng)膜脫離后光感受器細(xì)胞的死亡方式主要為凋亡和壞死。同時(shí)還可觀察到光感受器細(xì)胞的壞死性凋亡, 其形態(tài)學(xué)與壞死細(xì)胞類似。表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹, 質(zhì)膜不完整、破裂, 染色質(zhì)濃集和邊聚, 且伴有明顯的自噬泡和空泡。蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示, 實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組裂解的Caspase 8蛋白相對(duì)表達(dá)分別為0.78±0.03、0.06±0.01, 實(shí)驗(yàn)組裂解的Caspase 8蛋白相對(duì)表達(dá)較對(duì)照組明顯增加。兩組裂解的Caspase 8蛋白相對(duì)表達(dá)比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=4 023.21, P<0.05)。免疫沉淀法檢測(cè)結(jié)果顯示, 實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組p-RIP1蛋白相對(duì)表達(dá)分別為0.23±0.03、0.14±0.02, 實(shí)驗(yàn)組p-RIP1蛋白相對(duì)表達(dá)較對(duì)照組明顯增加。兩組p-RIP1蛋白相對(duì)表達(dá)比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=56.44, P<0.05)。 結(jié)論實(shí)驗(yàn)性視網(wǎng)膜脫離后光感受器細(xì)胞壞死性凋亡表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹, 質(zhì)膜不完整、破裂, 染色質(zhì)濃集和邊聚, 且伴有明顯的自噬泡和空泡; 其發(fā)生機(jī)制與p-RIP1表達(dá)增加有關(guān)。

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