目的 探討重組質(zhì)粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165 體外轉(zhuǎn)染對(duì)hBMSCs 成骨誘導(dǎo)分化的影響。 方 法 構(gòu)建hBMP-2 和hVEGF165 真核共表達(dá)載體。取健康成人自愿捐獻(xiàn)的骨髓分離培養(yǎng)hBMSCs，采用陽(yáng)離子脂質(zhì)體將構(gòu)建的質(zhì)粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165、pIRES-hBMP-2、pIRES-hVEGF165 和空質(zhì)粒載體（pIRES-neo）轉(zhuǎn)染至hBMSCs，作為A、B、C、D 組；另取相同數(shù)量的未轉(zhuǎn)染細(xì)胞作為對(duì)照組（E 組）。培養(yǎng)4 周，采用RT-PCR 檢測(cè)hBMP-2、hVEGF165 以及骨鈣mRNA 表達(dá)，Western blot 檢測(cè)細(xì)胞 hBMP-2 和 hVEGF165 表達(dá)，定量檢測(cè)ALP 活性，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Col Ⅰ表達(dá)。 結(jié) 果 與E 組比較，A 組hBMSCs 高表達(dá)hBMP-2、hVEGF165、Col Ⅰ及骨鈣素，B 組大量表達(dá)骨鈣素及Col Ⅰ，C組高表達(dá)hVEGF165，而B(niǎo) 組hVEGF165 及C 組hBMP-2 和Col Ⅰ的表達(dá)與D、E 組相似，呈陰性或僅有痕量表達(dá)。A、B、C、D 及E 組ALP 活性分別為0.91 ± 0.03、0.90 ± 0.02、0.64 ± 0.03、0.67 ± 0.01、0.66 ± 0.02，A、B 組與E 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），C、D、E 組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 重組質(zhì)粒通過(guò)陽(yáng)離子脂質(zhì)體能成功轉(zhuǎn)染hBMSCs，外源性hBMP-2 和 hVEGF165 基因在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中能持續(xù)表達(dá)，并能增強(qiáng)hBMSCs 的成骨能力。
目的 觀察持續(xù)彈性外牽引對(duì)小型豬乳頭及其支撐組織膠原含量的影響，探討該技術(shù)矯正乳頭內(nèi)陷的作用機(jī)制。 方法 取3 月齡雌性小型豬3 只，體重18.5 ～ 22.0 kg，每只均有12 個(gè)乳頭。實(shí)驗(yàn)分為兩組：每只豬取4 個(gè)乳頭不作處理，作為對(duì)照組，共12 個(gè)乳頭；其余8 個(gè)乳頭行持續(xù)彈性外牽引，作為實(shí)驗(yàn)組，共24 個(gè)乳頭。于牽引后2、4、8、12 周取乳頭及其支撐組織行HE 染色觀察內(nèi)部組織結(jié)構(gòu)的變化；飽和苦味酸天狼猩紅染色觀察組織中Ⅰ、Ⅲ型膠原分布及含量變化，結(jié)合圖像分析軟件進(jìn)行定量分析。 結(jié)果 HE 及飽和苦味酸天狼猩紅染色觀察示：對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)結(jié)構(gòu)均正常；隨觀察時(shí)間增加，實(shí)驗(yàn)組表皮增厚，基底細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及毛細(xì)血管等增生明顯，Ⅰ、Ⅲ型膠原含量及密度均逐漸增加。實(shí)驗(yàn)組牽引后4、8、12 周Ⅰ型膠原含量與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）；2、4、8、12 周時(shí)Ⅲ型膠原含量比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。牽引后2、4 周，實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、Ⅲ型膠原比值與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 持續(xù)彈性外牽引可促進(jìn)小型豬乳頭及其支撐組織的成纖維細(xì)胞分泌Ⅰ、Ⅲ型膠原，增加支撐組織的厚度與乳頭高度，改變膠原纖維的排列。
目的探討帶闊筋膜游離股前外側(cè)皮瓣（anterolateral thigh flap，ALTF）修復(fù)糖尿病足潰瘍（diabetic foot ulcers，DFUs）伴骨外露的療效。方法2019年1月—2021年1月，收治20例DFUs伴骨外露患者。男17 例，女3例；年齡48～76 歲，中位年齡57.5歲。糖尿病足Wagner分級(jí)3級(jí)10例，4級(jí)10例。足部潰瘍形成時(shí)間1～14個(gè)月，中位時(shí)間3個(gè)月。CT血管造影檢查示患者均存在雙下肢動(dòng)脈粥樣硬化表現(xiàn)；其中6例嚴(yán)重狹窄或閉塞，行經(jīng)皮血管腔內(nèi)成形術(shù)。入院后一期徹底清創(chuàng)聯(lián)合封閉式負(fù)壓引流處理，清創(chuàng)后創(chuàng)面范圍為7 cm×6 cm～27 cm×10 cm；二期采用帶闊筋膜游離ALTF修復(fù)創(chuàng)面及部分缺損肌腱，皮瓣切取范圍為8 cm×5 cm～28 cm×11 cm。供區(qū)創(chuàng)面直接縫合。記錄皮瓣成活情況、創(chuàng)面愈合時(shí)間以及并發(fā)癥發(fā)生情況。術(shù)后2周及6個(gè)月使用激光散斑血流成像系統(tǒng)檢測(cè)皮瓣及其周?chē)つw血流灌注情況。術(shù)后6個(gè)月以美國(guó)矯形足踝協(xié)會(huì)（AOFAS）評(píng)分評(píng)價(jià)足部功能。結(jié)果 術(shù)后6例出現(xiàn)皮瓣下積液，對(duì)癥處理后愈合。最終14例皮瓣完全成活；3例皮瓣邊緣部分壞死，經(jīng)換藥后愈合；3例皮瓣出現(xiàn)靜脈危象，探查后1例皮瓣完全壞死，另2例皮瓣部分成活，經(jīng)清創(chuàng)換藥后植皮修復(fù)。皮瓣成活率95.0%，保肢率100%。皮瓣移植術(shù)后創(chuàng)面愈合時(shí)間14～30 d，平均19.1 d。2例患者愈合后1個(gè)月內(nèi)再發(fā)皮瓣外周皮膚潰瘍，經(jīng)換藥后愈合。供區(qū)切口18例Ⅰ期愈合；2例局部皮膚壞死，經(jīng)清創(chuàng)縫合后愈合。患者均獲隨訪，隨訪時(shí)間6～30個(gè)月，中位時(shí)間11個(gè)月。皮瓣質(zhì)地、外觀及彈性良好。患者均能獨(dú)自行走，無(wú)行走時(shí)疼痛。術(shù)后6個(gè)月13例門(mén)診隨訪患者AOFAS評(píng)分為（75.9±11.9）分，與術(shù)前（44.7±18.4）分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=?7.025，P=0.000）；患者皮瓣外周正常皮膚血流灌注值由術(shù)后2周（38.1±7.8）PU升高至（42.7±10.3）PU，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=?4.680，P=0.001）。結(jié)論帶闊筋膜ALTF血供豐富、成活率高，可用于修復(fù)DFUs伴骨外露創(chuàng)面。皮瓣愈合后可促進(jìn)患足血運(yùn)重建，降低潰瘍復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，避免截肢。