目的 觀察人視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)的形態(tài)及相關(guān)細(xì)胞骨架蛋白變化規(guī)律,進(jìn)而研究人玻璃體液對(duì)RPE細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞骨架蛋白表達(dá)的影響,探討玻璃體液在增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy,PVR)中的調(diào)控作用。 方法 行人RPE細(xì)胞原代培養(yǎng)并傳代擴(kuò)增,采用Western blot法,分別檢測(cè)角蛋白18(cytokeratin 18, CK18)、平滑肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在第2、5、8代細(xì)胞中的表達(dá)情況。用1∶4玻璃體液培養(yǎng)RPE細(xì)胞6 d后,觀察細(xì)胞形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)改變,采用免疫細(xì)胞化學(xué)及Western blot法,檢測(cè)CK18、α-SMA表達(dá)變化。 結(jié)果 人RPE細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),會(huì)逐漸喪失上皮樣形態(tài),向成纖維樣轉(zhuǎn)變,CK18在2代表達(dá)量中等,5代最高,而在8代明顯下降,而α-SMA逐漸升高。與對(duì)照組相比,人玻璃體液促進(jìn)RPE細(xì)胞在形態(tài)上向成纖維樣細(xì)胞轉(zhuǎn)變。同時(shí)細(xì)胞內(nèi)CK18表達(dá)低于對(duì)照組,差異具有顯著性的意義(P<0.05);α-SMA表達(dá)高于對(duì)照組,差異具有顯著性的意義(P<0.01)。 結(jié)論 人RPE細(xì)胞在玻璃體液與血清的作用下向具有收縮性能的間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)變,同時(shí)細(xì)胞移行能力可能發(fā)生改變,結(jié)果提示玻璃體液可能促進(jìn)RPE細(xì)胞參與的PVR的發(fā)展。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 289-292)
引用本文: 劉勇,王一,陰正勤,祝枚東. 人玻璃體液對(duì)培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞形態(tài)及骨架蛋白表達(dá)的影響. 中華眼底病雜志, 2002, 18(4): 289-292. doi: 復(fù)制