目的 探討缺氧誘導因子-1 alpha;(HIF-1 alpha;)和血管內皮生長因子(VEGF)小片段干擾性RNA(siRNA)對人血管內皮細胞VEGF表達的影響。 方法 構建HIF-1 alpha; siRNA重組質粒。將體外培養(yǎng)的人血管內皮細胞(HUVEC-12)分成常氧(20%)組和低氧(1%)組。低氧組中,采用脂質體Lipofectamine TM 2000(LF2000)分別轉染空載體質粒(空載體組)、HIF-1 alpha; siRNA(HIF-1 alpha;組)、VEGF-165 siRNA(VEGF組)和HIF-1 alpha; siRNA+VEGF165 siRNA(共轉染組)。低氧組中未轉染的細胞為對照組。采用逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)鑒定基因轉染效率;RT-PCR和免疫細胞化學法檢測各組細胞中VEGF基因和蛋白表達的變化。 結果 成功構建HIF-1 alpha; siRNA重組質粒。人血管內皮細胞轉染24 h后,HIF-1 alpha; siRNA和VEGF-165 siRNA重組質粒有表達。常氧組細胞中僅見微弱的VEGF mRNA和蛋白表達,而低氧組表達明顯上調;HIF-1 alpha;組、VEGF組和共轉染組表達較對照組減弱,其中共轉染組抑制效果最明顯。 結論 HIF-1 alpha;和VEGF165 siRNA能有效抑制人血管內皮細胞VEGF的表達。
引用本文: 蔣劍,夏曉波,許惠卓,熊思齊,劉雙珍,李巖. 缺氧誘導因子-1α和血管內皮生長因子干擾性RNA對人血管內皮細胞血管內皮生長因子表達的抑制. 中華眼底病雜志, 2007, 23(6): 422-425. doi: 復制
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