目的 觀察不同濃度白細(xì)胞介素-1 beta;(IL-1 beta;)對大鼠視網(wǎng)膜M uuml;ller細(xì)胞磷酸化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子3(pSTAT3)表達(dá)的影響。方法 將體外培養(yǎng)的Sprague-Dawley(SD)大鼠M uuml;ller細(xì)胞分別以0.0、0.1、1.0、5.0、10.0 ng/ml濃度的IL-1 beta;刺激24 h后,免疫熒光法和蛋白質(zhì)印跡(Western botting)檢測細(xì)胞內(nèi)pSTAT3的表達(dá)改變。SD大鼠32只,隨機分為對照組、100、500、1000 ng/ml組,每組均為8只大鼠。分別將磷酸緩沖液(PBS)配制的濃度分別為100、500、1000 ng/ml的 IL-1 beta;注入大鼠的左眼玻璃體腔中,對照組大鼠左眼玻璃體腔注射相同容積的PBS,24 h后采用同樣方法檢測pSTAT3在視網(wǎng)膜的表達(dá)情況。結(jié)果 免疫熒光法和Western botting檢測結(jié)果顯示,IL-1 beta;刺激24 h后,IL-1 beta;濃度為0.0 ng/ml時,pSTAT3在細(xì)胞核內(nèi)有極少量表達(dá),當(dāng)濃度達(dá)到1.0 ng/ml后,pSTAT3在細(xì)胞核內(nèi)的表達(dá)隨濃度增加而升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=46.64,43.78;P<0.01)。對照組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)無明顯pSTAT3的表達(dá),當(dāng)濃度達(dá)到100.0 ng/ml后,pSTAT3在視網(wǎng)膜內(nèi)的表達(dá)隨濃度增加而升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=73.53,43.70;P<0.01);pSTAT3主要表達(dá)于內(nèi)核層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層。雙熒光標(biāo)記顯示,對照組大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)無pSTAT3表達(dá),膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)主要表達(dá)于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,并向視網(wǎng)膜色素上皮層呈絲狀放射;從100 ng/ml IL-1 beta;刺激24 h后起,內(nèi)核層就出現(xiàn)顆粒狀GFAP和pSTAT3的雙標(biāo)染色。結(jié)論 IL-1 beta;可以上調(diào)M uuml;ller細(xì)胞pSTAT3的表達(dá),這可能是M uuml;ller細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)性膠質(zhì)活化的通路之一。
引用本文: 沈璽,徐格致. 白細(xì)胞介素-1β對大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞磷酸化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子3表達(dá)的影響. 中華眼底病雜志, 2009, 25(5): 385-388. doi: 復(fù)制