目的 探討三氧化二砷(As2O3 )誘導人視網膜母細胞瘤(RB)Y79細胞系P16基因去甲基化及轉錄激活的可能機制。方法四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法(MTT)法檢測As2O3對Y79細胞生長和增生的抑制作用;流式細胞儀DNA含量分析法探討As2O3對Y79細胞周期的影響;巢式甲基特異性聚合酶鏈反應法(n-MSP)及DNA克隆測序分析法檢測As2O3作用前后Y79細胞P16基因甲基化狀態(tài);逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測P16基因、DNA甲基轉移酶 (DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA的表達。結果 As2O3 能明顯抑制Y79細胞生長,使細胞阻滯于G0~G1期;未處理組細胞P16基因不表達,As2O3作用48 h后P16基因表達增強,甲基化程度減弱,甲基轉移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA 表達下降。結論 RB Y79細胞系存在P16基因高甲基化,As2O3通過抑制DNA甲基轉移酶mRNA表達誘導P16基因去甲基化,顯著上調P16基因mRNA表達,將細胞阻滯于G0~G1期, 抑制Y79細胞增生。
引用本文: 林雯 喻愛芳 徐國興 王婷婷 沈松菲 付海英 謝茂松 沈建箴. 砷劑誘導人視網膜母細胞瘤Y79細胞系P16基因去甲基化及轉錄. 中華眼底病雜志, 2009, 25(2): 99-102. doi: 復制
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