• 1. 563003 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院眼科(張鵬飛,現在安徽淮南新華醫(yī)院眼科)2. 563003 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院眼科3. 563003 遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院眼科;

目的 觀察不同細胞密度的微囊化人內皮抑素/293(hES/293)細胞生物學性狀及其對人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)增生的抑制作用。方法 采用聚電解質絡合法制作不同密度微囊化hES/293細胞,分為1×104個/ml組(A組)、1×106個/ml組(B組)、1×108個/ml組(C組);同時將微囊內不包裹hES/293細胞者設為對照組(D組);每組6個樣本。培養(yǎng)后1、3、7、14、35 d,錐蟲藍染色計數微囊囊內細胞總數、活細胞數和存活率;噻唑藍(MTT)比色法檢測各組微囊化hES/293細胞的生長情況;酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測微囊化hES/293細胞囊外內皮抑素(ES)蛋白釋放量。取生長狀態(tài)良好的HUVEC分別與A、B、C、D組微囊化hES/293細胞共同培養(yǎng)。于共同培養(yǎng)后24、72、120 h,MTT比色法檢測微囊化hES/293細胞對HUVEC增生的抑制作用。結果 A、B、C組微囊囊內hES/293細胞總數和活細胞數均隨時間延長而增多,囊內細胞存活率于培養(yǎng)后3 d最高。A、B、C組微囊化hES/293細胞生長速率比較,培養(yǎng)后1 d時組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);培養(yǎng)后3 d,A組較B、C組高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);培養(yǎng)后7、14、35 d,B組較A、C組高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。A、B、C組微囊化hES/293細胞囊外ES蛋白釋放量比較,培養(yǎng)后1、14 d時組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);培養(yǎng)后3 d,A組較B、C組高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);培養(yǎng)后7、35 d,B組較A組高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。共同培養(yǎng)后24 h,A、B、C組對HUVEC均未表現出抑制作用(P>0.05);共同培養(yǎng)后72、120 h,A、B、C組均明顯抑制HUVEC增生,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論細胞密度為1×106個/ml的微囊化hES/293細胞生長穩(wěn)定、存活率較高,可持續(xù)穩(wěn)定的釋放ES蛋白。不同密度的微囊化hES/293細胞均可抑制HUVEC增生。

引用本文: 張鵬飛,蔡善君,詹文芳,謝兵,李紅,宿罡. 微囊化人內皮抑素/293細胞生物學性狀及其對人臍靜脈內皮細胞增生的抑制作用. 中華眼底病雜志, 2011, 27(4): 370-374. doi: 復制

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