目的 觀察 alpha;-硫辛酸對(duì)高壓條件下培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGC）的保護(hù)作用。方法 將RGC分為正常對(duì)照組、陰性對(duì)照組、單純加壓組、加壓聯(lián)合不同濃度 alpha;-硫辛酸干預(yù)組。正常對(duì)照組和單純加壓組不做任何處理；陰性對(duì)照組僅接受200 mu;mol/L alpha;-硫辛酸預(yù)處理；加壓聯(lián)合不同濃度的 alpha;硫辛酸干預(yù)組分別用50、100、200 mu;mol/L等3種不同濃度的 alpha;-硫辛酸對(duì)其進(jìn)行干預(yù)。 alpha;-硫辛酸預(yù)處理1 h后，單純加壓組和各干預(yù)組置于50 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）下培養(yǎng)24 h；正常對(duì)照組、陰性對(duì)照組置于常壓下培養(yǎng)24 h。分別用噻唑藍(lán)比色法檢測(cè)各組細(xì)胞的活性；4，6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚(DAPI）染色觀察各組細(xì)胞核形態(tài)改變；實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)及蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)并比較各組細(xì)胞中錳超氧化物歧化酶（MnSOD） mRNA和蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果 單純加壓組細(xì)胞活性為（65.6 plusmn;3.4）%，50、100、200 mu;mol/L 3種濃度的 alpha;-硫辛酸干預(yù)組細(xì)胞活性分別為（75.1 plusmn;3.3）%、（81.8 plusmn;2.9）%、（87.9 plusmn;3.1）%，均較單純加壓組顯著增高（t=5.108、10.007、12.513，P＜0.05）。DAPI染色顯示，加壓后RGC-5細(xì)胞核可見空泡、染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化等典型的凋亡特征，而 alpha;-硫辛酸干預(yù)組僅有部分細(xì)胞核染色質(zhì)表現(xiàn)出濃縮現(xiàn)象。Real-time PCR及Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，加壓培養(yǎng)后細(xì)胞內(nèi)MnSOD mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量較正常對(duì)照組顯著降低（t=22.045、26.979，P＜0.01）；與單純加壓組相比， alpha;-硫辛酸干預(yù)組細(xì)胞內(nèi)MnSOD mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量均顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=9.171、12.267、23.567、7.723、12.009、28.198，P＜0.05）；不同濃度的 alpha;-硫辛酸干預(yù)組之間，隨 alpha;-硫辛酸濃度增加，MnSOD mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量呈升高趨勢(shì)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=134.273、194.597，P＜0.01）。結(jié)論 應(yīng)用 alpha;-硫辛酸可以顯著提高高壓條件下大鼠RGC的細(xì)胞活性及細(xì)胞內(nèi)MnSOD的表達(dá)水平，增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化損傷能力。
引用本文： 劉兵,郭大東,畢宏生,郭媛媛,陳寧虹,馬曉華. α-硫辛酸對(duì)高壓條件下培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用. 中華眼底病雜志, 2012, 28(5): 501-506. doi: 復(fù)制
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