目的 觀察探討糖尿?。―M)大鼠視網(wǎng)膜組織中脯氨酰羥化酶(PHD-2)的表達(dá)及意義。方法 雄性Wistar大鼠108只,隨機(jī)分為DM模型組和正常對(duì)照組,分別為60、48只。對(duì)DM模型組大鼠進(jìn)行一次性腹腔注射1%鏈脲霉素枸櫞酸(STZ)溶液建模,正常對(duì)照組腹腔注射等量的枸櫞酸緩沖液。造模后1、3、6個(gè)月,熒光顯微鏡下觀察大鼠視網(wǎng)膜血管分布形態(tài)。造模后1~6個(gè)月,采用伊凡思藍(lán)(EB)灌注視網(wǎng)膜鋪片檢測(cè)視網(wǎng)膜組織內(nèi)EB濃度;免疫組織化學(xué)染色法觀察大鼠視網(wǎng)膜PHD-2陽(yáng)性染色的分布特點(diǎn);蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜中PHD-2、缺氧誘導(dǎo)因子-1 alpha;(HIF-1 alpha;)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)。結(jié)果 熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示,正常對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜血管走行規(guī)則,淺深層血管形態(tài)清晰;DM模型組大鼠視網(wǎng)膜血管滲漏持續(xù)存在。造模后1~6個(gè)月,DM模型組大鼠視網(wǎng)膜血管外組織內(nèi)EB含量較正常對(duì)照組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.810,2.722,2.845,2.342,2.456,3.823;P<0.05)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,DM模型組及正常對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜中均可見(jiàn)PHD-2陽(yáng)性染色,主要分布于視網(wǎng)膜內(nèi)核層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層及血管壁。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,DM模型組大鼠視網(wǎng)膜中PHD-2表達(dá)在造模后1、2個(gè)月時(shí)較正常對(duì)照組下降(t=16.230,16.390;P<0.05);HIF-1 alpha;表達(dá)在造模后1、2、3個(gè)月時(shí)較正常對(duì)照組明顯升高(t=27.073,36.709,10.176;P<0.05);VEGF表達(dá)在造模后1~6個(gè)月均較正常對(duì)照組升高(t=13.547,31.984,21.897,8.912,9.019,14.046;P<0.05)。結(jié)論 PHD-2在DM大鼠視網(wǎng)膜組織中有豐富表達(dá)。PHD-2 可能在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生發(fā)展中有一定的調(diào)控作用,其作用途徑及機(jī)制與VEGF作用通路有關(guān)。
引用本文: 梁小玲,孫剛,陳方,周煥嬌,魏麗清,楊誠(chéng),丁運(yùn)剛,張熙芳. 脯氨酰羥化酶在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜的表達(dá)及其意義. 中華眼底病雜志, 2012, 28(3): 264-267. doi: 復(fù)制