目的 觀察體外培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞在高糖培養(yǎng)環(huán)境下谷氨酰胺合成酶(GS)的表達(dá)變化,探討重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)對其表達(dá)的影響及作用機(jī)制。方法 出生后3~5 d新生SpragueDawley大鼠10只,摘除眼球分離視網(wǎng)膜,經(jīng)胰酶消化后分離純化視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞。并將其隨機(jī)分為正常對照組、高糖培養(yǎng)組、高糖+5U/ml rhEPO組、高糖+10 U/ml rhEPO組、高糖+20 U/ml rhEPO組、高糖+40 U/ml rhEPO組。48 h后原位缺口末端標(biāo)記法檢測高糖及不同濃度rhEPO對視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞凋亡的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)法半定量檢測高糖組在不同濃度rhEPO干預(yù)下視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞GS蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果 與正常對照組比較,高糖培養(yǎng)組視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞活性下降,細(xì)胞大量凋亡,GS蛋白表達(dá)下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=27.4,P<0.01)。與高糖培養(yǎng)組比較,不同濃度rhEPO處理組凋亡細(xì)胞隨著rhEPO濃度的增加顯著性減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=857.2、2 374.6、2 473.2、2 537.7,P<0.01),GS蛋白的表達(dá)顯著性升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.2、18.0、22.5、26.4,P<0.05)。 結(jié)論rhEPO對高糖作用下視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞的凋亡具有保護(hù)作用,并可上調(diào)高糖損傷細(xì)胞內(nèi)下降的GS蛋白表達(dá)水平;促進(jìn)谷氨酸循環(huán),有效降低高濃度谷氨酸的興奮性毒性作用,可能是其抗高糖損傷的保護(hù)機(jī)制之一。
引用本文: 楊靜,孟巖. 重組人促紅細(xì)胞生成素對高糖視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞谷氨酰胺合成酶表達(dá)的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(5): 514-517. doi: 復(fù)制