目的 觀察川芎嗪(TMP)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)缺氧相關(guān)因子表達(dá)的影響。方法 體外培養(yǎng)HUVECs,取2~5代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將HUVECs分為對(duì)照組、氯化鈷(CoCl2)缺氧組及50、100、200 mu;mol/L TMP藥物處理組。對(duì)照組不作任何處理。CoCl2缺氧組利用150 mu;mol/L的CoCl2干預(yù)HUVECs 4 h;50、100、200 mu;mol/L TMP藥物處理組在CoCl2干預(yù)HUVECs 4 h后,再加入不同濃度TMP繼續(xù)培養(yǎng)8 h。分別提取各組細(xì)胞RNA和總蛋白,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)脯氨酰羥化酶2(PHD2)、缺氧誘導(dǎo)因子-1 alpha;(HIF-1 alpha;)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果 實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果 顯示,與對(duì)照組比較,CoCl2缺氧組PHD2 mRNA表達(dá)下降(t=3.734),HIF-1 alpha;和VEGF mRNA表達(dá)升高(t=4.589、3.926),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。50、100、200 mu;mol/L TMP藥物處理組分別與CoCl2缺氧組比較,PHD2 mRNA表達(dá)均升高(t=3.286、3.617、3.886),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HIF-1 alpha; mRNA表達(dá)均無(wú)明顯變化(t=1.025、0.726、-1.386),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);VEGF mRNA表達(dá)均有所下降,但50 mu;mol/L TMP藥物處理組與之差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.696,P>0.05),100、200 mu;mol/L TMP藥物處理組與之差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.974、3.492,P<0.05)。Western blot檢測(cè)結(jié)果 顯示,與對(duì)照組比較,CoCl2缺氧組PHD2蛋白表達(dá)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.122,P<0.05);HIF-1 alpha;及VEGF蛋白表達(dá)均有不同程度升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.778、3.257,P<0.05)。50、100、200 mu;mol/L TMP藥物處理組分別與CoCl2缺氧組比較,PHD2 蛋白表達(dá)均升高(t=2.813、3.026、3.078),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HIF-1 alpha;、VEGF蛋白表達(dá)均有所下降,但50 mu;mol/L TMP藥物處理組與之差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.056、1.986,P>0.05),100 mu;mol/L TMP藥物處理組(t=3.058、2.976)及200 mu;mol/L TMP藥物處理組(t=3.828、3.136)與之差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 TMP能上調(diào)缺氧HUVECs中PHD2 mRNA和蛋白的表達(dá),下調(diào)HIF-1 alpha;蛋白、VEGF mRNA和蛋白的表達(dá)。
引用本文: 梁小玲,楊誠(chéng),周煥嬌,魏麗清,林佩蓉,楊璐. 川芎嗪對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧相關(guān)因子表達(dá)的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(3): 284-289. doi: 復(fù)制