目的 觀察人胚胎干細(xì)胞(hESC)向視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中微小核糖核酸(miRNA)-204和211的變化特征。方法 采用自然分化法誘導(dǎo)hESC向RPE細(xì)胞分化,細(xì)胞鑒定。按細(xì)胞誘導(dǎo)分化時間秩序,分為hESC組、含色素細(xì)胞組、hESC源性RPE細(xì)胞組和原代培養(yǎng)的人胎RPE(hfRPE)細(xì)胞組。行miRNA基因表達(dá)譜芯片分析、miRNA-204和211實(shí)時熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測。 結(jié)果 miRNA芯片分析結(jié)果顯示,隨細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程, miRNA-204持續(xù)上調(diào)。其中,含色素細(xì)胞組是hESC組的5.026倍,hESC 源性RPE細(xì)胞組是含色素細(xì)胞組的3.337倍;hfRPE細(xì)胞組是hESC源性RPE細(xì)胞的13.574倍。miRNA-211在細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中上調(diào)不明顯,但從hESC源性RPE細(xì)胞到hfRPE細(xì)胞,上調(diào)倍數(shù)為44.333倍,是miRNA表達(dá)譜中差異最大的miRNA。RT-PCR檢測結(jié)果顯示,hESC組、含色素細(xì)胞組、hESC源性RPE細(xì)胞組、hfRPE細(xì)胞組miR-204相對表達(dá)量分別為91.81 plusmn;4.43、2 263.09 plusmn;206.39、5 996.80 plusmn;235.42、171 676.45 plusmn;999.82,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=18.22、20.66、279.38,P<0.001);miRNA-211相對表達(dá)量分別為2.23 plusmn;0.31、129.33 plusmn;3.75、125.76 plusmn;4.78、16 682.00 plusmn;352.97。含色素細(xì)胞組和hESC細(xì)胞組、hfRPE細(xì)胞組和hESC源性RPE細(xì)胞組miR-211相對表達(dá)量比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=58.58、81.24,P<0.001)。結(jié)論 miRNA-204和211在hESC向RPE細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中持續(xù)單一變化。
引用本文: 李文博,李筱榮,魯振宇,張云山,東莉潔,王飛,董榮. 微小核糖核酸-204和211在人胚胎干細(xì)胞向視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞分化過程的變化. 中華眼底病雜志, 2013, 29(1): 72-75. doi: 復(fù)制
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